D5319

Desoxyribonuklease I Rind

recombinant, expressed in Pichia pastoris, buffered aqueous glycerol solution, ≥5,000 units/mg protein

• Synonym(e): DNAse I, Desoxyribonukleat-5′-oligo-nukleotidhydrolase
• UNSPSC Code: 12352204
• NACRES: NA.54
• EG-Nummer: 3.1.21.1 (BRENDA, IUBMB)
• MDL number: MFCD00130918
• Specific activity: ≥5,000 units/mg protein
• Assay: ≥95%
• Biological source: bovine
• Recombinant: expressed in Pichia pastoris

Eigenschaften

• biological source: bovine
• Quality Segment: 200
• recombinant: expressed in Pichia pastoris
• assay: ≥95%
• form: buffered aqueous glycerol solution
• specific activity: ≥5,000 units/mg protein
• mol wt: ~39 kDa
• technique(s): DNA extraction: suitable
• input: general use sample(s)
• suitability: suitable for molecular biology
• application(s): diagnostic assay manufacturing
• foreign activity: RNAse and protease, free
• shipped in: dry ice
• storage temp.: −20°C

Beschreibung

Application

DNase I von Sigma wurde in einer Studie verwendet, um durch Behandlung von nukleärem Lysat einzelne Nukleosome zu erhalten. Außerdem wurde das Enzym für die Präparierung und das Abernten von Milchdrüsen der Maus genutzt.

Ebenso wurde Desoxyribonuklease I des Rindes in einer Studie genutzt, um die initialen Aktionen von Desoxyribonuklease der Milz und des Pankreas zu vergleichen. Außerdem wurde Desoxyribonuklease I des Rindes in einer Studie verwendet, um Deoxythymidin-3′, 5′-di-p-nitrophenylphosphat als synthetisches Substrat aus Desoxyribonuklease des Rinderpankreas zu untersuchen.

Wird verwendet für das Entfernen von DNA aus Proteinproben.

Biochem/physiol Actions

Dnase I ist eine Endonuklease; sie wirkt auf Phosphodiesterbindungen, die neben Pyrimidinen liegen, und erzeugt so Polynukleotide mit terminalen 5′-Phosphaten. Der optimale pH-Wert liegt zwischen 7 und 8. Zweiwertige Kationen wie Mn²⁺, Ca²⁺, Co²⁺ und Zn²⁺ aktivieren das Enzym. Eine Konzentration von 5 mM Ca²⁺ stabilisiert das Enzym gegen proteolytische Verdauung. 2-Mercaptoethanol, Chelatoren, Natriumdodecylsulfat (SDS) und Aktin hemmen bekanntlich die Enzymaktivität.

Erzeugt aus ein- und doppelsträngiger DNA mittels Verdau eine Mischung aus Mono- und Oligonukleotiden, die 5′-Phosphate und 3′-OH-Termini besitzen. Diese katalytische Aktivität ist divalent ionenabhängig. In Gegenwart von Mg²⁺ hydrolysiert DNase I jeden Strang von Doppelstrang-DNA unabhängig und nach dem Zufallsprinzip. In Gegenwart von Mn²⁺ können beide Stränge aufgespalten werden.

Features and Benefits

• RNA-Aufreinigung durch Entfernen von DNA
• Präparation von DNA für die Nick-Translation¹
• Footprinting-Assays für die Bestimmung von DNA-Protein-Interaktionen²

Physical form

Wird als Lösung in 4 mg/ml Glycin bei pH 5,0, 5 mM Calciumacetat und 50 % Glycerin geliefert

Preparation Note

Produziert ohne Verwendung von Tierzellen oder Materialien tierischen Ursprungs

Other Notes

Eine Einheit erzeugt ein ΔA₂₆₀ von 0,001 pro Minute und pro Milliliter Reaktionsgemisch, wobei DNA vom Thymus des Kalbs bei einem pH-Wert von 5,0 und einer Temperatur von 25 °C verwendet wird.

Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 10 - Combustible liquids
• Was ist los?: WGK 1
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable