MSQC4

SILu^™Lite SigmaMAb universeller Antikörperstandard human

• Synonym(e): IgG1-Leichtkette, SILu^™Lite SigmaMAb universeller Antikörperstandard, human, SigmaMAb
• NACRES: NA.12
• UNSPSC Code: 23201100
• Technique(s): protein mass spectrometry: suitable
• Species reactivity: -
• Application: protein mass spectrometry
• Citations: 9

Eigenschaften

• recombinant: expressed in CHO cells
• Quality Segment: 200
• technique(s): protein mass spectrometry: suitable
• shipped in: wet ice
• storage temp.: −20°C

Beschreibung

General description

SILu^™ Lite SigmaMAb ist ein rekombinanter humaner monoklonaler IgG1-Lambda Leichtketten-Antikörper mit einer Molekülmasse von ∼150 kDa, die in CHO-Zellen exprimiert wurden. Er ist für die Optimierung einer akkuraten Analyse der intakten Masse monoklonaler Antikörper, Biosimilars und pharmazeutischer Produkte konzipiert. Eine akkurate Analyse der intakten Masse solcher großen Biomoleküle kann umfassende Informationen über strukturelle und posttranslationale Modifikationen wie die Glycosylierung vermitteln. Andere Informationen, wie Heterogenität, Variation zwischen Chargen, Aminosäurenkürzung und die Verarbeitung, Aggregation sowie der Abbau von N-terminalem Lysin kann bestimmt werden. Die Analyse der intakten Masse mithilfe der Massenspektrometrie ist auch sehr wichtig für Formulierung und Lagerung in der Entwicklung von Arzneistoffen aus therapeutischen monoklonalen Antikörpern.
Es besteht aus zwei identischen schweren Ketten und zwei identischen leichten Ketten. Die schweren Ketten und die leichten Ketten sind durch eine Disulfidbrücke verbunden. Die schweren Ketten sind durch zwei Disulfidbrücke in einer Gelenkdomäne verbunden. Die anderen 12 Cysteinbindungen sind intramolekular auf sechs verschiedene globuläre Domänen beschränkt. Die Antikörpersequenz wurde durch Analyse der intakten Masse und Peptid-Mfapping unter Verwendung vier verschiedener Enzyme bewertet: Chymotrypsin, Endoproteinasen Asp-N und Glu-C sowie Trypsin. Eine Sequenzabdeckung von 100 % wurde erreicht.

Application

SILu^™ Lite SigmaMAb universeller menschlicher Antikörperstandard wurde als Modellsystem verwendet, um die quantitative Beziehung zwischen der Entfaltung monoklonaler Antikörper (Monoclonal Antibody, mAb) in der Gasphase und den einzelnen Stufen der mAb-Glycosylierung zu untersuchen.

Features and Benefits

Die berechneten Molekülmassen der SigmaMAb-Leichtketten und -Schwerketten sowie intakten Proteine mit den am reichlichsten vorhandenen Glycoformen lauten wie folgt:

Beschreibung / Zusammensetzung / Modifikation / Durchschnittliche Masse (Da)

Leichtkette, reduziert / C₁₀₀₆H₁₅₅₅N₂₆₇O₃₃₃S₇ / Pyroglutaminsäure (Q) / 22942,2

Schwerkette, reduziert / C₂₁₈₁H₃₃₉₃N₅₈₇O₆₆₃S₁₆ / (keine Modifikation) / 48957,8
C₂₂₃₇H₃₄₈₅N₅₉₁O₇₀₂S₁₆ / G0F / 50403,2
C₂₂₄₃H₃₄₉₅N₅₉₁O₇₀₇S₁₆ / G1F / 50565,3
C₂₂₄₉H₃₅₀₅N₅₉₁O₇₁₂S₁₆ / G2F / 50727,5

Native intakte Masse, nicht reduziert / C₆₃₇₄H₉₈₆₄N₁₇₀₈O₁₉₉₂S₄₆ / 2 x Pyroglutaminsäure (Q) / 143767,7
C₆₄₈₆H₁₀₀₄₈N₁₇₁₆O₂₀₇₀S₄₆ / G0F+G0F / 146658,4
C₆₄₉₂H₁₀₀₅₈N₁₇₁₆O₂₀₇₅S₄₆ / G0F+G1F / 146820,6
C₆₄₉₈H₁₀₀₆₈N₁₇₁₆O₂₀₈₀S₄₆ / G1F+G1F / 146982,7
C₆₅₀₄H₁₀₀₇₈N₁₇₁₆O₂₀₈₅S₄₆ / G1F+G2F / 147144,8
C₆₅₁₀H₁₀₀₈₈N₁₇₁₆O₂₀₉₀S₄₆ / G2F+G2F / 147307,0

Physical form

Erhältlich als lyophilisiertes Pulver mit phosphatgepufferter Kochsalzlösung.

Preparation Note

Die SigmaMAb-Rückgewinnung wird maximiert, wenn Phosphatpuffer mit pH 6–7 zur Rekonstitution des lyophilisierten Produkts verwendet wird.

Analysis Note

SigmaMAb-Schwerkette
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCVASGFTLNNYDMHWVRQGIGKGLEWVSKI
GTAGDRYYAGSVKGRFTISRENAKDSLYLQMNSLRVGDAAVYYCARGAGRW
APLGAFDIWGQGTMVTVSS|ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYF
PEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVN
HKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISR
TPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRV
VSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPS
RDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFL
YSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG

SigmaMAb-Leichtkette
QSALTQPRSVSGSPGQSVTISCTGTSSDIGGYNFVSWYQQHPGKAPKLMIY
DATKRPSGVPDRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCCSYAGDYTPGV
VFGGGTKLTVL|GQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTV
AWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQ
VTHEGSTVEKTVAPTECS

Auch erhältlich als stabiles isotopmarkiertes Produkt SILu^™MAb (Produktnummer MSQC3)

Packungsgröße basiert auf dem mittels A_{280 bestimmten Proteingehalt.}

Other Notes

PBS ist für die Rekonstitution zu vermeiden.
Röhrcheninhalte durch Hinzufügen von 500 μL Reinstwasser oder Phosphatpuffer und anschließendes energisches Mischen rekonstituieren. Das aufgelöste Produkt kann nach Bedarf weiter verdünnt werden:

Legal Information

SILu is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 11 - Combustible Solids
• Was ist los?: WGK 1
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable