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Merck

HPLC-Lösungsmittel

Drei Flaschen mit LiChrosolv®-Lösungsmitteln

Die HPLC (Hochleistungsflüssigkeitschromatographie) ist eine leistungsstarke Analysetechnik zur Trennung, Aufreinigung und Quantifizierung von Analyten aus komplexen Gemischen. Das Trennverfahren beruht auf der selektiven Adsorption und differentiellen Migration von Analyten durch eine Säule mit einer stationären Phase, angetrieben durch eine mobile Phase mit kontrollierten Durchflussraten. Als mobile Phase dienen Lösungsmittel in HPLC-Qualität, die hochgradig aufgereinigt sind, um die strengen Qualitätsstandards zu erfüllen und sicherzustellen, dass sie keine Verunreinigungen einbringen oder die Analyse beeinträchtigen. Die Auswahl der geeigneten Lösungsmittel ist entscheidend für eine optimale Trennung und Analyse. Diese Lösungsmittel werden anhand der Polarität der zu trennenden Analyten als unpolare, mäßig polare, polare oder hochpolare Lösungsmittel kategorisiert.


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Unpolare Lösungsmittel in der HPLC

Unpolare Lösungsmittel werden häufig sowohl in der Normalphasen- als auch in der Umkehrphasen-HPLC verwendet und sind für verschiedene Trennanwendungen vielseitig einsetzbar. Diese Lösungsmittel, wie Hexan und Cyclohexan, eignen sich besonders gut für die Trennung von unpolaren Verbindungen, einschließlich von Kohlenwasserstoffen und Lipiden.

Mäßig polare Lösungsmittel in der HPLC

Mäßig polare Lösungsmittel können sowohl in der Normalphasen- als auch in der Umkehrphasen-HPLC verwendet werden und eignen sich für die Trennung einer Vielzahl von Analyten. Sie eignen sich besonders gut für die Trennung von mäßig polaren Verbindungen. Ethylacetat wird zum Beispiel häufig zur Extraktion von Verbindungen aus biologischen Proben verwendet.

Polare Lösungsmittel in der HPLC

Polare Lösungsmittel werden hauptsächlich in der Umkehrphasen-HPLC verwendet, bei der die stationäre Phase unpolar und die mobile Phase polar ist. Gängige Lösungsmittel wie Methanol und Acetonitril eignen sich hervorragend für die Trennung polarer Verbindungen, einschließlich von Aminosäuren, Zucker und Arzneimitteln.

Hochpolare Lösungsmittel in der HPLC

Wasser ist ein hochpolares Lösungsmittel, das häufig in der Umkehrphasen-HPLC verwendet wird, oft in Kombination mit anderen Lösungsmitteln. Es dient als Hauptbestandteil mobiler Phasen, insbesondere bei der Analyse hochpolarer Verbindungen oder wenn Gradientenelution zur besseren Trennung eingesetzt wird.

Lösungsmittel in HPLC-Qualität

Unsere Lösungsmittel in HPLC-Qualität sind unter zwei Premium-Marken erhältlich: LiChrosolv®-Lösungsmittel und OmniSolv®-Lösungsmittel (nur in den USA und Kanada). Das Supelco®-Portfolio wurde für regulierte/akkreditierte Anwendungsbereiche entwickelt, das SigmaAldrich®-Portfolio ist hingegen für Anwendungsbereiche in der Forschung vorgesehen.

Lösungsmittel für die isokratische HPLC

Bei der isokratischen HPLC bleibt die Zusammensetzung der mobilen Phase während des gesamten Trennungsprozesses konstant. Diese Lösungsmittel sind auf 0,2 μm mikrofiltriert, was einen stabilen Durchfluss gewährleistet, das Risiko einer Verstopfung minimiert und die Gesamteffizienz des HPLC-Systems verbessert. Sie haben ein niedriges UV-Profil, wodurch Hintergrundinterferenzen bei der UV-Detektion reduziert und klarere, genauere Analytmessungen ermöglicht werden. Darüber hinaus sind diese Lösungsmittel für LC-UV-Anwendungen geeignet.

Lösungsmittel für die HPLC-Gradientenelution

Bei der Gradientenelution in der HPLC wird die Zusammensetzung der mobilen Phase während des chromatographischen Laufs verändert. Dies macht sie ideal für die Trennung von Gemischen mit verschiedenen Retentionsfaktoren. Diese Lösungsmittel sind auf 0,2 μm mikrofiltriert, weisen eine minimale UV-Absorption auf, um Hintergrundinterferenzen während der Detektion zu reduzieren, und ermöglichen einen klareren, genaueren Analytnachweis. Sie unterstützen auch Flüssigkeitschromatographie-(LC)-Basislinien mit geringem Verunreinigungsgradienten und gewährleisten so eine hochwertige Trennung.

HPLC-Plus-Lösungsmittel

HPLC-Plus-Lösungsmittel zeichnen sich durch hohe Reinheit, langsame Gradienten-Basisliniendrift und minimale Verunreinigungen aus und sind daher ideal für anspruchsvolle analytische Anwendungen geeignet. Ihr niedriges UV-Profil reduziert Hintergrundinterferenzen und ermöglicht so einen klaren und präzisen Nachweis. Diese Lösungsmittel sind auch für Gaschromatografie-(GC)-, LC-UV- und LC-MS-Anwendungen geeignet.

UHPLC-MS-Lösungsmittel

Die Ultrahochleistungsflüssigkeitschromatografie (UHPLC) arbeitet mit einem höheren Druck als die herkömmliche HPLC. In Verbindung mit Massenspektrometrie (MS) ermöglicht sie eine präzise Identifizierung und Quantifizierung von Molekülen auf der Grundlage ihres Masse-zu-Ladungs-Verhältnisses. Die UHPLC ermöglicht die Trennung komplexer Gemische mit höherer Auflösung und Geschwindigkeit, wodurch die Analyse kleinerer Probenmengen bei gleichzeitig höherer Sensitivität und Präzision ermöglicht wird.

Diese Lösungsmittel weisen eine extrem niedrige Basislinie mit einem Minimum an Verunreinigungsspitzen, z. B. Phthalaten und Polyethylenglycol (PEG), auf, die den Nachweis und die Quantifizierung der Zielanalyten beeinträchtigen können. Darüber hinaus ist ihre Adduktbildung in der Massenspektrometrie minimal, was die Genauigkeit und Zuverlässigkeit der Analyse verbessert und eine ausgezeichnete Reproduzierbarkeit von Charge zu Charge für eine gleichbleibende Leistung über verschiedene Chargen hinweg ermöglicht. 



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