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Merck

A6964

Accutase® solution

sterile-filtered, suitable for cell culture

Synonyme(s) :

Cell detachment solution

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A propos de cet article

Numéro MDL:
Code UNSPSC :
12352204
Nomenclature NACRES :
NA.75

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Stérilité

sterile-filtered

Niveau de qualité

Forme

liquid

Concentration

400-600 units/mL

Technique(s)

cell culture | mammalian: suitable
single cell analysis: suitable

Impuretés

≤1 EU/mL endotoxin

pH

6.8-7.8

Conditions d'expédition

dry ice

Température de stockage

−20°C

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Cet article
SCR005SCR104A7089
technique(s)

cell culture | mammalian: suitable, single cell analysis: suitable

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cell culture | mammalian: suitable

technique(s)

cell culture | mammalian: suitable, single cell analysis: suitable

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400-600 units/mL

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−20°C

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−20°C

Description générale

La solution Accutase® (dans du tampon phosphate salin de Dulbecco [DPBS] sans Ca++ ou Mg++) contient des enzymes protéolytiques et collagénolytiques pour détacher les cellules. Elle s'utilise en routine pour dissocier les cellules des surfaces de culture tissulaire standards en plastique et des surfaces recouvertes d'un revêtement d'adhérence. La solution Accutase est préférée à la trypsine lorsqu'il s'agit de détacher les cellules des récipients de culture car elle endommage moins les cellules durant le processus. La solution Accutase est donc souvent employée pour traiter les cellules sensibles ou pour analyser les marqueurs de surface.

Application

Efficace pour détacher les fibroblastes primaires, les cellules endothéliales, les neurones, les lignées cellulaires tumorales et les cellules d′insectes. Sa performance est exceptionnelle pour détacher les cellules en vue de l′analyse de marqueurs de surface, d′essais de croissance virale et de cytométrie en flux, ainsi que la mise à échelle en bioréacteurs. Ne contient aucun produit d′origine bactérienne ou de mammifères.
La solution Accutase® a été utilisée pour la dissociation ou la digestion de cellules non adhérentes formant des agrégats en culture, comme les cellules de tumeurs cérébrales[1], les cellules souches pluripotentes induites (CSPi)[2] et les cellules de glioblastome[3] pour former une suspension de cellules individuelles.

Ce produit peut être utilisé pour préparer des suspensions de cellules individuelles en vue d'un séquençage.

Caractéristiques et avantages

Liquide prêt à l′emploi consistant en un mélange breveté d′enzymes protéolytiques et collagénolytiques pour dissocier les cellules de surfaces de culture standard en plastique ou à revêtement adhésif.

Notes préparatoires

Ce produit contient du rouge de phénol. Il est expédié sur glace carbonique et une accumulation significative de CO2 dans l'emballage est possible. Ce CO2 peut pénétrer dans la solution et abaisser légèrement le pH, ce qui produit une couleur jaune-orangé (pH d'environ 6,8). La solution peut être utilisée telle quelle, ou le pH peut être ajusté à l'aide d'hydroxyde de sodium. Un flacon d'Accutase entièrement congelé est de couleur jaune qui évolue vers une couleur orange lors de sa décongélation. Une fois déballé, le produit peut être recongelé ou placé directement au réfrigérateur en vue d'un usage ultérieur. Ne pas décongeler le produit au bain-marie. Accutase est sensible aux températures supérieures à 37 °C et devient inactif après 45 minutes à cette température. Il est recommandé de décongeler le produit au réfrigérateur toute une nuit, ou dans un bain d'eau de ville froide pendant 1 à 1,5 heure. Après décongélation, agiter le flacon d'Accutase pour garantir une dissolution uniforme des ingrédients. Il n'est pas nécessaire de réchauffer ces produits avant utilisation. Une fois sortis du réfrigérateur, les produits doivent être utilisés rapidement et remis au réfrigérateurs après usage.
Préparé dans tampon phosphate salin de Dulbecco (0,2 g/l KCl, 0,2 g/l KH2PO4, 8 g/l NaCl, et 1,15 g/l Na2HPO4) contenant 0,5 mM EDTA•4Na et 3 mg/l de de rouge de phénol. Consulter la fiche technique du produit sur Internet pour des informations relatives à l′utilisation du produit.

Informations légales

Accutase is a registered trademark of Innovative Cell Technologies, Inc.

Produit(s) apparenté(s)

Réf. du produit
Description
Tarif

Code de la classe de stockage

12 - Non Combustible Liquids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 1

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable


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Questions

1–10 of 11 Questions  
  1. Is Accutase Solution A6964 animal-origin free? Is serum free?

    1 answer
    1. As per the Product Information Sheet, the Accutase solution does not contain mammalian or bacterial-derived products. This solution is supplied as a sterile, ready-to use, frozen liquid. This product is serum free.

      Helpful?

  2. Can accutase be thawed, aliquoted, and refrozen at -20 to preserve it longer?

    1 answer
    1. Yes, this product is stable after undergoing several freeze/thaw cycles. The thawed product may be aliquoted and stored at –20 °C or stored for up to 2 months at 4°C.
      The graphic below demonstrates the freeze/thaw stability of Accutase.

      Helpful?

  3. On the Innovative cell technologies website it says that accumax is the same as accutase but with 3x the amount of enzymes. Why did the technician here answer that it contains DNAse?

    1 answer
    1. Thank you for calling this to our attention. The manufacturer, Innovative Cell Technologies, has been contacted regarding this matter. The manufacturer has confirmed that both Accutase and Accumax products DO contain a small amounts of DNAse. The concentration is not measured, but it is present in the formulation. In addition, both products also contain 0.5 mM EDTA.

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  4. What is the appropriate cell dissociating product to be used for ES cells that will be injected into blastocysts?

    1 answer
    1. Accutase®, product A6964, or Accumax™ (Accutase® with DNase), product A7089, will work well for dissociation of ES cells. The Accutase® product has protease and dispase activity to dissociate the cells.  The Accumax™ product also has DNase to limit the aggregation that is caused by DNA released from ruptured cells during the dissociation/scraping.Please see the reference and link below for more information on the use of Accutase® with ES cells:Mol Reprod Dev. 2008 May;75(5):818-27

      Helpful?

  5. How can I inactivate Accutase® with fetal bovine serum?

    1 answer
    1. Due to its gentle nature Accutase® cell detachment solution usually does not need to be neutralized following cell passaging. Accutase® is also heat inactivated after 45 minutes at 37°C. If this method of neutralization does not work for your cells, or if you want to neutralize Accutase® in a shorter period of time, the addition of 10% FBS containing media will accomplish this task. Experiments have shown that diluting a sample of Accutase® with 10% with fetal bovine serum achieved an environment similar to that found in cell culture. Measurements of the enzyme activity in this diluted sample showed decreased activity over time, falling below that of the required level for cell detachment (>175 units/mL). After about 6 minutes of serum interaction, the enzyme activity of Accutase® was well below this level, demonstrating effective inhibition by FBS.

      Helpful?

  6. For what purposes can Product A6964, Accutase® solution, be used?

    1 answer
    1. It can be used for detaching cells, analysis of cell surface markers and virus growth assays.

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  7. What is the concentration of Product A6964, Accutase® solution?

    1 answer
    1. This product is typically at a concentration of 400-600 units/mL.

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  8. What is the difference between Accutase and Accumax?

    1 answer
    1. Accutase is a mixture of non-mammalian proteases.  Accumax is accutase that has been augmented with DNase to reduce clumping associated with DNA release from damaged cells.

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  9. Will Product A6964, Accutase® solution, work on tissue?

    1 answer
    1. This product is not tested for tissue, but it should work on soft tissue.

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  10. Does Product A6964, Accutase® solution, contain animal components?

    1 answer
    1. Accutase is purified from a marine invertebrate.  There are no other animal or bacterial derived proteins present.

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