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Informazioni su questo articolo
UNSPSC Code:
41106509
NACRES:
NA.81
eCl@ss:
32011203
Biological source:
mouse
Prezzi e disponibilità al momento non sono disponibili
Servizio Tecnico
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Permettici di aiutartibiological source
mouse
Quality Segment
manufacturer/tradename
Specialty Media, EmbryoMax®
technique(s)
cell culture | stem cell: suitable
input
sample type induced pluripotent stem cell(s)
sample type: human embryonic stem cell(s)
sample type primary embryotic fibroblasts (PMEFs)
sample type: mouse embryonic stem cell(s)
shipped in
liquid nitrogen
storage temp.
-140 to -196°C
General description
I fibroblasti primari di embrione di topo (PMEF), ceppo CF1, sono trattati con mitomicina C e vengono usati come cellule nutrici (feeder layer) per le cellule ES/IPS sia umane, sia murine.
Piastratura dello strato di MEF
Procedura:
1. Prima di scongelare i PMEF, ricoprire le piastre/fiasche con una soluzione di gelatina.
2. Scongelare rapidamente le vial di PMEF in un bagno ad acqua a 37 °C. Trasferirle in una provetta da 15 mL pre-riempita con 10 mL di PMEF Feeder Cell Medium pre-riscaldato. Capovolgere delicatamente la provetta per mescolare e centrifugare a 300 xg per 4–5 minuti.
3. Rimuovere il surnatante e risospendere il pellet in PMEF Feeder Cell Medium pre-riscaldato.
4. Rimuovere la soluzione di gelatina dalle piastre/fiasche e aliquotare la sospensione di PMEF alle densità consigliate nella tabella 4.1 della guida ai protocolli per ES di topo
5. Incubare le cellule nutrici PMEF a 37 °C con il 5% di CO2. Utilizzare le figure 4A, B e C riportate nella guida ai protocolli per ES di topo come riferimento per valutare la densità e l′aspetto ottimali
Le piastre ricoperte con la gelatina possono essere utilizzate per 12–14 giorni.
Piastratura dello strato di MEF
Procedura:
1. Prima di scongelare i PMEF, ricoprire le piastre/fiasche con una soluzione di gelatina.
2. Scongelare rapidamente le vial di PMEF in un bagno ad acqua a 37 °C. Trasferirle in una provetta da 15 mL pre-riempita con 10 mL di PMEF Feeder Cell Medium pre-riscaldato. Capovolgere delicatamente la provetta per mescolare e centrifugare a 300 xg per 4–5 minuti.
3. Rimuovere il surnatante e risospendere il pellet in PMEF Feeder Cell Medium pre-riscaldato.
4. Rimuovere la soluzione di gelatina dalle piastre/fiasche e aliquotare la sospensione di PMEF alle densità consigliate nella tabella 4.1 della guida ai protocolli per ES di topo
5. Incubare le cellule nutrici PMEF a 37 °C con il 5% di CO2. Utilizzare le figure 4A, B e C riportate nella guida ai protocolli per ES di topo come riferimento per valutare la densità e l′aspetto ottimali
Le piastre ricoperte con la gelatina possono essere utilizzate per 12–14 giorni.
La gamma di cellule PMEF EmbryoMax offre ai ricercatori una soluzione conveniente per la coltura delle cellule staminali, evitando di isolare e preparare le cellule per il feeder layer, con grande risparmio di tempo. Molti protocolli per la coltura delle cellule staminali embrionali richiedono l'uso di fibroblasti primari embrionali di topo (PMEF). In questi protocolli, le cellule ES sono coltivate su un monostrato di PMEF (feeder layer). Le cellule del feeder layer (cellule nutrici) svolgono due importanti ruoli per la coltura delle cellule staminali: secernono nel terreno diversi importanti fattori di crescita che aiutano a mantenere la pluripotenza delle ES e forniscono una matrice cellulare che aiuta a supportarne la crescita.
Biochem/physiol Actions
Fibroblasti primari embrionali di topo
Packaging
5-6x106 ciascuna
Preparation Note
Dopo il ricevimento conservare le vial a -80°C. Per tempi di conservazione maggiori di 6 mesi: le cellule possono essere conservate nella fase vapore dell′azoto liquido, assicurandosi che il tappo sia ben chiuso, per un massimo di 2 anni.
Legal Information
EmbryoMax is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Disclaimer
Salvo diversa indicazione nel nostro catalogo o in altra documentazione fornita dall′azienda insieme al prodotto, i nostri prodotti sono destinati esclusivamente a scopi di ricerca e non devono essere utilizzati per altre finalità, inclusi a titolo esemplificativo ma non esaustivo, fini commerciali non autorizzati, applicazioni diagnostiche in vitro, usi terapeutici ex vivo o in vivo o qualsiasi altro tipo di assunzione o applicazione rivolta agli esseri umani o agli animali.
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Classe di stoccaggio
12 - Non Combustible Liquids
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