Pertumbuhan & Pemeliharaan Sel
Kultur sel adalah teknik mendasar yang digunakan dalam penelitian ilmu hayati untuk membuat model biologis yang relevan atau untuk menghasilkan protein rekombinan, partikel virus, atau terapi biologis. Pertumbuhan dan pemeliharaan sel yang dikultur seperti bakteri, ragi, dan sel mamalia dilakukan di dalam lemari biosafety (sering disebut tudung kultur sel atau jaringan) dengan menggunakan teknik steril yang tepat untuk mencegah kontaminasi mikroba dan bahan kimia.
Jenis Kultur Sel
Dua pendekatan yang paling menonjol terhadap kultur sel mamalia adalah kultur primer dan kultur kontinu. Kultur primer berasal langsung dari jaringan manusia atau hewan dan memiliki masa hidup dalam kultur yang dibatasi oleh penuaan sel. Kultur kontinu dianggap sebagai kultur 'abadi', karena kultur ini sering kali berasal dari jaringan kanker pasien.Garis sel juga dapat dibuat dengan mengabadikan sel dan dapat diperbanyak secara serial atau & nbsp; dilewati & nbsp; untuk berbagai siklus pembelahan sel, atau tanpa batas waktu.
Kategori Unggulan
Pilih dari berbagai formulasi media kultur sel yang dioptimalkan, termasuk DMEM, RPMI-1640, dan opsi bebas serum untuk beragam kebutuhan sel.
Meningkatkan kultur sel dengan sisipan Millicell®, pelat, slide ruang, labu. Dapatkan pertumbuhan yang relevan secara biologis, pilih sisipan yang menggantung atau berdiri.
Jelajahi suplemen kultur sel berkualitas tinggi, termasuk serum, faktor pertumbuhan, sitokin, hormon, dan reagen pembekuan.
Kaya akan faktor pemacu pertumbuhan, Fetal bovine serum (FBS) atau fetal calf serum (FCS) adalah suplemen yang ideal untuk kultur sel mamalia.
Sel dapat dikultur dalam suspensi atau sebagai monolayer 2D yang menempel pada labu kultur jaringan atau pelat multiwell. Metode kultur ditentukan oleh jaringan asal sel; sel yang berasal dari darah umumnya tumbuh dalam suspensi, sedangkan sel yang berasal dari jaringan padat biasanya tumbuh dalam lapisan tunggal.
Model kultur sel 3D (organoid dan sferoid) umumnya dianggap lebih mirip dengan lingkungan in vivo sel daripada sel yang ditumbuhkan pada permukaan 2D. Spheroid sering dibentuk dari garis sel kanker atau biopsi tumor (xenograft yang berasal dari pasien, atau PDX) sebagai agregat sel yang mengambang bebas di pelat perlekatan yang sangat rendah, sedangkan organoid biasanya berasal dari sel induk jaringan yang tertanam dan kemudian berdiferensiasi di dalam matriks hidrogel ECM.
Fase Pertumbuhan Sel
Memastikan pertumbuhan sel yang memadai sangat penting untuk mengumpulkan data yang akurat dari studi kultur sel. Jumlah sel dapat ditentukan dengan menggunakan hemositometer atau penghitung sel otomatis, yang menawarkan jumlah sel yang lebih akurat.
Pertumbuhan sel dalam kultur umumnya terjadi dalam empat fase:
ol>
- Sel menyesuaikan diri dengan kondisi kultur dan tidak membelah.
Media Kultur Sel, Suplemen, dan Reagen
Sel yang dikultur membutuhkan pasokan nutrisi untuk pertumbuhan. Media kultur sel mamalia harus mempertahankan pH fisiologis, selain menyediakan garam, karbohidrat, asam amino, vitamin, asam lemak dan lipid yang seimbang, protein dan peptida, elemen, dan faktor pertumbuhan. Fetal bovine serum (FBS) adalah suplemen pertumbuhan yang paling banyak digunakan untuk kultur sel mamalia, karena mengandung banyak nutrisi seluler esensial dan telah terbukti mendukung pertumbuhan sel dan jaringan dalam kultur. Untuk aplikasi yang membutuhkan media yang ditentukan atau komponen hewan yang dikurangi, formulasi media bebas xeno menyediakan formulasi bebas hewan dengan komposisi yang diketahui.
Karena media dan suplemen sering kali menyediakan nutrisi yang kaya untuk pertumbuhan mikroba oportunistik, kultur sel yang sukses membutuhkan teknik aseptik dan pengamatan rutin untuk memastikan tidak adanya kontaminan yang dapat menyebabkan kematian sel atau mengacaukan pertumbuhan in vivo. Untuk kontaminan mikroba umum yang tidak dapat diamati secara mikroskopis, skrining rutin dengan reagen pendeteksi mikoplasma melindungi kultur dan lingkungan perbanyakan jaringan. Kultur ragi, seperti & nbsp;S. cerevisiae & nbsp; dan P. pastoris & nbsp; (Pichia), umumnya digunakan dalam penelitian untuk ekspresi protein rekombinan dan studi fungsi gen. Nutrisi penting yang biasanya disertakan dalam formulasi media kultur ragi adalah pepton, ekstrak ragi, dan dekstrosa atau glukosa.
Kiat dan Trik Passing Sel
Passaging sel adalah langkah mendasar dalam kultur sel secara umum untuk menjaga kesehatan sel dan pertumbuhan sel yang optimal. Tutorial ini menjelaskan proses pemindahan sel, termasuk pentingnya pertemuan dan kepadatan sel. Protokol untuk passaging sel melibatkan proses-proses seperti pemantauan dan penghitungan sel, tripsinisasi atau pemisahan sel, dan penyemaian kembali sel ke dalam peralatan kultur yang baru.
Lingkungan kultur sel dan peralatan kultur
Sel yang dikultur ditumbuhkan dan ditangani dengan menggunakan peralatan plastik steril sekali pakai, termasuk labu kultur jaringan dan pelat sumur banyak, pipet serologis, filter atas botol steril, dan filter jarum suntik steril. Labu dan pelat kultur jaringan plastik biasanya diberi perlakuan untuk memberikan permukaan hidrofilik guna memfasilitasi perlekatan sel yang melekat. Sebagai alternatif dari permukaan 2D, pelat berbasis membran mikropori menyediakan lingkungan pertumbuhan yang lebih fisiologis untuk pengujian sel yang kompleks, seperti migrasi sel, komunikasi sel-sel, dan polarisasi sel.
Sel yang dikultur harus dipertahankan pada suhu dan lingkungan gas yang menciptakan kembali parameter-parameter ini pada organisme asal mereka. Peralatan kultur yang berisi sel dan media biasanya dipelihara dalam peralatan inkubasi yang memberikan kontrol suhu dan campuran gas yang tepat. Namun, sistem inkubasi benchtop skala kecil yang menggunakan mikrofluida dan memfasilitasi pencitraan sel dalam kultur tanpa gangguan dapat memberikan lingkungan yang paling otentik untuk model in vitro prediktif.
Kunjungi pencarian dokumen kami untuk mendapatkan lembar data, sertifikat, dan dokumentasi teknis.
Artikel Terkait
- Know when to use antibiotics to prevent bacterial or fungal, mycoplasma, or viral contamination in cell culture and find suitable antibiotics or other biological agents.
- Antibiotic kill curve is a dose response experiment in which mammalian cells are subjected to increasing amounts of selection antibiotic
- Poly-Lysine enhances cell binding with positively-charged surface ions, optimizing electrostatic interaction on culture surfaces for increased cell attachment.
- Cell Culture Freezing Tips - Are you following best practices for cryostorage? We have cool tips for protecting your cells.
- Experimental studies measuring cell proliferation have had implications in cancer biology, immunology, cell biology, and developmental biology.
- Lihat Semua (22)
Protokol Terkait
- Learn about using our MILLIPLEX® Cell Health Panel to monitor cell proliferation and stress on cells grown on Millicell® hanging cell culture inserts.
- Cryopreservation affects post-thaw recovery, viability, and functionality. Stress during freezing and suboptimal media lead to cell death.
- Dilute fibronectin for cell attachment, varying per cell type. Coating protocol, products, and FAQs provided.
- Discover our collection of primary human hepatic Kupffer cells and protocol for thawing, plating, and growing Kupffer cells. Find the formulation for Kupffer culture maintenance media.
- Discover our collection of primary human hepatic sinusoidal endothelial cells, a protocol for thawing, plating, and growing HHSECs, and a recipe for our HHSEC maintenance media formulation.
- Lihat Semua (9)
Temukan Artikel dan Protokol Lainnya
Bagaimana Kami Dapat Membantu
Jika ada pertanyaan, silakan kirimkan permintaan dukungan pelanggan
atau hubungi tim layanan pelanggan kami:
Email [email protected]
atau hubungi +1 (800) 244-1173
Dukungan Tambahan
- Chromatogram Search
Use the Chromatogram Search to identify unknown compounds in your sample.
- Kalkulator & Aplikasi
Web Toolbox - alat dan sumber daya penelitian sains untuk kimia analitik, ilmu hayati, sintesis kimia, dan ilmu material.
- Customer Support Request
Dukungan pelanggan termasuk bantuan dengan pesanan, produk, akun, dan masalah teknis situs web.
- FAQ
Explore our Frequently Asked Questions for answers to commonly asked questions about our products and services.
Untuk melanjutkan membaca, silakan masuk atau buat akun.
Tidak Punya Akun?