07-579

Przeciwciało anty-REST

Upstate^®, from rabbit

• Synonim(y): Czynnik wyciszający ograniczający neurony, czynnik transkrypcyjny wyciszający RE1, represor pola X2, czynnik wyciszający ograniczający neurony, represor wiążący się z polem X2
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Conjugate: unconjugated
• Clone: polyclonal
• Application: WB
• Citations: 123

Właściwości

• biological source: rabbit
• Quality Segment: 100
• conjugate: unconjugated
• antibody form: purified immunoglobulin
• antibody product type: primary antibodies
• clone: polyclonal
• species reactivity: human
• manufacturer/tradename: Upstate^®
• technique(s): western blot: suitable
• isotype: IgG
• NCBI accession no.: NM_005612
• UniProt accession no.: Q13127
• shipped in: wet ice
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: human ... REST(5978) ; mouse ... Rest(19712) ; rat ... Rest(83618)

Opis

General description

Wyciszający czynnik transkrypcyjny RE1 (UniProt: Q13127; znany również jako REST, Neural-restrictive silencer factor, X2 box repressor) jest kodowany przez gen REST (znany również jako NRSF, XBR) (Gene ID: 5978) u człowieka. REST jest represorem transkrypcji, który działa poprzez wiązanie elementu sekwencji DNA zwanego neuron-restrictive silencer element (NRSE). Ulega wszechobecnej ekspresji, a wyższa ekspresja występuje w tkankach przedziału limfocytarnego, w tym w śledzionie, grasicy, limfocytach krwi obwodowej i jajniku. Występuje również w niezróżnicowanych neuronalnych komórkach progenitorowych i uważa się, że działa jako główny negatywny regulator neurogenezy. Ekspresja REST jest zależna od cyklu komórkowego z obniżonymi poziomami w fazie G2. Jest on zaangażowany w utrzymywanie stanu spoczynku dorosłych neuronalnych komórek macierzystych i zapobiega ich przedwczesnemu różnicowaniu w dojrzałe neurony. REST ogranicza ekspresję genów neuronalnych poprzez asocjację z dwoma różnymi korepresorami, SIN3A i RCOR1, które z kolei rekrutują deacetylazę histonową do promotorów genów regulowanych przez REST. REST pośredniczy również w represji poprzez rekrutację kompleksu BHC w miejscach RE1/NRSE, który działa poprzez deacetylację i demetylację określonych miejsc na histonach i działa jako modyfikator chromatyny. Mutacje w genie REST mogą prowadzić do guzów Wilmsa, dziecięcego nowotworu złośliwego nerki, który występuje z powodu niekontrolowanego namnażania się nerkowych komórek macierzystych, zrębowych i nabłonkowych. (Ref.: Mahamdallie, SS., et al. (2015). Nat. Genet. 47(12); 1471-1474; Huang, Z., et al. (2011). Nat. Cell Biol. 13(2); 142-152).

Zaobserwowano ~160 kDa; obliczono 121,87 kDa. W niektórych lizatach można zaobserwować niescharakteryzowane pasma.

Immunogen

Rekombinowany fragment znakowany GST odpowiadający 297 aminokwasom z C-końcowego regionu ludzkiego czynnika transkrypcyjnego wyciszającego RE1 (REST).

Application

Anti-REST, Nr kat. 07-579, jest króliczym przeciwciałem poliklonalnym, które wykrywa REST i jest testowane do stosowania w Western Blotting.

Kategoria badawcza
Epigenetyka i funkcje jądrowe

Podkategoria badawcza
Czynniki transkrypcyjne

Zaktualizowane informacje - reszta jest glikozylowana. Z http://amsdottorato.cib.unibo.it/687/
Z podsumowania:
"Na koniec przeanalizowano wzór glikozylacji białka REST, wychodząc z obserwacji, że masa cząsteczkowa obliczona na podstawie sekwencji REST wynosi około 116 kDa, ale przy użyciu western blotting ten czynnik transkrypcyjny wydaje się mieć inną pozorną masę cząsteczkową (patrz Tabela 1.1): tę różnicę można wyjaśnić potranslacyjnymi modyfikacjami białek, takimi jak glikozylacja. W rzeczywistości ostatnio kilka badań podkreśliło znaczenie O-glikozylacji w modulowaniu wyciszania transkrypcji, fosforylacji białek, degradacji białek przez proteasom i interakcji białko-białko [Julenius i in., 2005; Zachara i Hart, 2006]. Analiza deglikozylacji wykazała, że białko REST w komórkach SH-SY5Y i HEK293 jest oglikozylowane, a nie N-glikozylowane. Co więcej, przy użyciu kilku kombinacji enzymów deglikozylujących można postawić hipotezę o obecności reszt Gal-β(1-3)-GalNAc na endogennym REST, podczas gdy rekombinowane białko REST wyrażone w komórkach HEK293 może zawierać reszty β(1-4)-galaktozy. Jednak proces O-glikozylacji wytwarza ogromną różnorodność struktur chemicznych, a monosacharydy muszą być sekwencyjnie hydrolizowane przez szereg egzoglikozydaz. Potrzebne są dalsze eksperymenty, aby scharakteryzować wszystkie potranslacyjne modyfikacje czynnika transkrypcyjnego REST". W szczególności autorzy pokazują, że REST migruje przy 200kd w komórkach SH-SY5Y.

Biochem/physiol Actions

To królicze przeciwciało poliklonalne wykrywa czynnik transkrypcyjny wyciszający RE1 (REST). Celuje w epitop w regionie C-końcowym.

Physical form

Format: Oczyszczony

Oczyszczone białko A

Oczyszczone królicze przeciwciało poliklonalne w buforze zawierającym 0,014 M bufor fosforanowy, pH 7,6, 0,175 M NaCl z 0,07% azydkiem sodu i 30% glicerolem.

Preparation Note

Przechowywać w temperaturze od -10°C do -25°C. Zalecenia dotyczące postępowania: Po otrzymaniu i przed zdjęciem nasadki odwirować fiolkę i delikatnie wymieszać roztwór. Rozdzielić do probówek mikrowirówkowych i przechowywać w temperaturze -20°C. Unikać powtarzających się cykli zamrażania/rozmrażania, które mogą uszkodzić IgG i wpłynąć na działanie produktu.

Analysis Note

Kontrola
Pozytywna kontrola antygenu: Katalog #12-309, ekstrakt jądrowy komórek Hela. Dodać równą objętość buforu Laemmli do 10 μl ekstraktu i gotować przez 5 minut w celu zredukowania preparatu. Załadować 20 μg zredukowanego ekstraktu na pas dla minigelów.

Evaluated by Western Blotting in HEK293 cell lysate.Western Blotting Analysis: A 1:1,000 dilution of this antibody detected REST in HEK293 cell lysate.

Other Notes

Stężenie: Stężenie specyficzne dla danej partii można znaleźć w certyfikacie analizy.

Legal Information

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

O ile nie określono inaczej w naszym katalogu lub innej dokumentacji firmy dołączonej do produktu(-ów), nasze produkty są przeznaczone wyłącznie do użytku badawczego i nie mogą być wykorzystywane do żadnych innych celów, w tym między innymi do nieautoryzowanych zastosowań komercyjnych, zastosowań diagnostycznych in vitro, zastosowań terapeutycznych ex vivo lub in vivo lub jakiegokolwiek rodzaju konsumpcji lub zastosowania u ludzi lub zwierząt.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: WGK 2