429700

Leptyna, ludzka, rekombinowana, E. coli

• Synonim(y): rhOB
• Numer CAS: 177404-21-6
• UNSPSC Code: 12352202
• NACRES: NA.77
• MDL number: MFCD01094205
• Biological source: Escherichia coli
• Form: lyophilized
• Assay: ≥95% (SDS-PAGE)

Właściwości

• biological source: Escherichia coli
• Quality Segment: 100
• description: Merck USA index - 14, 5443
• sterility: non-sterile
• assay: ≥95% (SDS-PAGE)
• form: lyophilized
• manufacturer/tradename: Calbiochem^®
• storage condition: OK to freeze
• impurities: ≤1.0 EU/μg Endotoxin (EU/μg leptin)
• shipped in: ambient
• storage temp.: −70°C

Opis

General description

Rekombinowana ludzka leptyna wyrażana w E. coli. Leptyna została pierwotnie zidentyfikowana jako produkt białkowy mysiego genu otyłości. U myszy z mutacjami w genie obese, które blokują syntezę leptyny, stwierdzono otyłość i cukrzycę oraz obniżoną aktywność, metabolizm i temperaturę ciała. Klony cDNA kodujące leptynę zostały wyizolowane z komórek ludzkich, małpich, mysich i szczurzych. Ludzka leptyna wykazuje około 84% identyczności sekwencji z białkiem mysim. Ludzki cDNA leptyny koduje białko o długości 167 aminokwasów z 21 aminokwasową sekwencją sygnałową, która jest rozszczepiana w celu uzyskania dojrzałego białka o długości 146 aminokwasów. Wykazano, że ekspresja mRNA leptyny jest ograniczona do tkanki tłuszczowej.



Następnie sklonowano receptor o wysokim powinowactwie dla leptyny (OB-R) z homologią do gp130 i receptora G-CSF. Domena cytoplazmatyczna OB-R przekazuje sygnał leptyny poprzez szlak JAK-STAT. Chociaż początkowo wykazano, że mRNA OB-R ulega ekspresji głównie w splocie naczyniówkowym i podwzgórzu, nowsze dane ujawniły również ekspresję tego receptora w komórkach śródbłonka (Ecs). Co więcej, aktywność angiogenną leptyny wykazano zarówno in vitro, jak i in vivo, co sugeruje fizyczny mechanizm, w którym indukowana leptyną angiogeneza może ułatwiać zwiększone wydatkowanie energii.

Biochem/physiol Actions

ED₅₀ = 0,4-2 ng/ml, mierzone jego zdolnością do indukowania proliferacji zależnych od leptyny mysich komórek BAF3 transfekowanych rOB-R.

Physical form

Liofilizowany ze sterylnego przefiltrowanego roztworu w PBS.

Preparation Note

Aby odtworzyć liofilizowaną leptynę, dodaj do fiolki 15 mM sterylnego HCl (0,5 ml/1 mg fiolkę lub 2,5 ml/5 mg fiolkę). Po całkowitym rozpuszczeniu białka dodaj 7,5 mM sterylnego NaOH (0,3 ml/1 mg fiolki lub 1,5 ml/5 mg fiolki), aby doprowadzić pH do ~5,2. Liofilizowane próbki są stabilne przez co najmniej sześć miesięcy w temperaturze -70°C. Po rekonstytucji cytokina ta może być przechowywana w sterylnych warunkach w temperaturze 4°C przez jeden miesiąc lub w temperaturze -70°C przez trzy miesiące bez wykrywalnej utraty aktywności. Należy unikać powtarzających się cykli zamrażania/rozmrażania odtworzonych roztworów.

Other Notes

Anderwald, C., et al. 2002. Mol. Endocrinol.16, 1612.
Ookuma, M., et al. 1998. Diabetes 47, 219.
Campfield, L.A., et al. 1995. Science 269, 546.
Halaas, J.L., et al. 1995. Science 269, 543.
Pelleymounter, M.A., et al. 1995. Science 269, 540.
Zhang, Y., et al. 1994. Nature372, 425.

Legal Information

CALBIOCHEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Toksyczność: Standardowa obsługa (A)

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 11 - Combustible Solids
• Co się dzieje?: WGK 1