07072001

ES-R1

NOTE: Both the cell line and DNA from the cell line may be available for this product. Please choose -1VL or VIAL for cells, or -DNA-5UG for DNA, 07072001, mouse embryo. Monolayer of spheroidal cells on feeder layer of PMEFs.

• NACRES: NA.81
• UNSPSC Code: 41106514
• Biological source: mouse embryo
• Growth mode: Adherent
• Karyotype: Not specified
• Morphology: Adherent monolayer of spheroidal cells on feeder layer of mouse primary embryonic fibroblasts

Właściwości

• Quality Segment: 100
• biological source: mouse embryo
• form: liquid
• packaging: tube of 5 μg 07072001-DNA-5UG, pkg of vial of cells 07072001-1VL
• growth mode: Adherent
• karyotype: Not specified
• morphology: Adherent monolayer of spheroidal cells on feeder layer of mouse primary embryonic fibroblasts
• products: Not specified
• receptors: Not specified
• technique(s): cell culture | mammalian: suitable
• shipped in: dry ice
• storage temp.: −196°C

Opis

Biochem/physiol Actions

Embrionalne komórki macierzyste myszy

Pluripotencjalna linia mysich embrionalnych komórek macierzystych. Komórki R1 ES zostały utworzone w sierpniu 1991 roku z męskiej blastocysty hybrydy dwóch podras 129 (129X1/SvJ i ^{129S1/SV-+p+Tyr-c} Kitl ^Sl-J/+).

Packaging

UWAGA: Dla tego produktu może być dostępna zarówno linia komórkowa, jak i DNA z linii komórkowej. Wybierz -1VL lub VIAL dla komórek lub -DNA-5UG dla DNA.

Preparation Note

Embrionalne komórki macierzyste (ES) wymagają użycia mitotycznie inaktywowanych komórek zasilających w celu wsparcia wzrostu komórek macierzystych w stanie niezróżnicowanym. Można stosować mysie fibroblasty embrionalne, STO (nr katalogowy Sigma 86032003) lub SNL 76/7 (nr katalogowy Sigma 07032801). W ECACC plastikowe naczynia są wstępnie powlekane żelatyną przed umieszczeniem w nich komórek.

Żelatyna świńska (Sigma G1890) jest rozpuszczana w sterylnej wodzie (0,5 g/500 ml) w temperaturze 56 °C. Roztwór 0,1% jest sterylizowany przez filtrację (0,22 μm). Dodać 0,1% żelatynę do plastikowego naczynia, aby przykryć dno i inkubować przez 20 minut w temperaturze pokojowej. Usunąć żelatynę, przemyć raz PBS i zastąpić odpowiednim podłożem hodowlanym. Nie wolno dopuścić do wyschnięcia kolby/naczynia.

Warstwy pożywki są przygotowywane na zżelatynowanych kolbach co najmniej 24 godziny przed ich użyciem. Ampułka jest rozmrażana w łaźni wodnej o temperaturze 37°C, a jej zawartość jest szybko przenoszona do 15 ml probówki wirówkowej. Pożywkę MEF dodaje się kroplami do 5 ml. Komórki odwirowuje się z prędkością 150 x g przez 5 minut w temperaturze pokojowej (RT). Komórki są ponownie zawieszane w 5 ml pożywki MEF. Komórki są liczone i dodawane do kolb zawierających odpowiednią pożywkę w ilości 1-3 x^{104 komórek/cm2}.

Ampułka z komórkami ES jest rozmrażana w łaźni wodnej o temperaturze 37°C, a jej zawartość jest szybko przenoszona do probówki wirówkowej o pojemności 15 ml. Pożywkę KSR dodaje się kroplami do objętości 5 ml. Komórki wiruje się z prędkością 150 x g przez 5 minut. Komórki są ponownie zawieszane w 5 ml pożywki KSR. Przygotowaną kolbę zasilającą przepłukuje się raz PBS i dodaje pożywkę KSR. Komórki ES należy umieścić w ilości 4-5 x^{104 komórek/cm2}. Hodowle należy inkubować w nawilżanym 5%_CO2/95% powietrzem inkubatorze w temperaturze 37 °C. Codziennie należy wymieniać 100% pożywki i pasażować komórki co 2-3 dni. Kolonie nie mogą stykać się ze sobą, ponieważ nadmierny wzrost spowoduje różnicowanie.

Pożywka MEF składa się z Advanced DMEM/F12 (Invitrogen 12634010), 10% FBS (Perbio SH30070.03E), 2 mM glutaminy (Invitrogen 25030024) i 0,1 mM β-merkaptoetanolu (Sigma M6250).

Podłoże KSR składa się z KO-DMEM (Gibco 10829), 20% Knock-Out Serum Replacer (Gibco 10828), 2 mM glutaminy (Invitrogen 25030024), NEAA (Invitrogen 11140035), 0,1 mM β-merkaptoetanolu (Sigma M6250) i LIF 1000 jednostek/ml (ESGRO ESG1106).

Other Notes

Depozytariusz i pomysłodawca: Dr A Nagy, Samuel Lunenfeld Research Institute, Mount Sinai Hospital, 600 University Ave, Toronto, Ontario, M5G 1X5, Kanada.

Kultury pochodzące z HPA Culture Collections i dostarczone przez firmę Sigma są przeznaczone wyłącznie do celów badawczych. Zapytania dotyczące komercyjnego wykorzystania linii komórkowej są kierowane do deponenta linii komórkowej. Niektóre linie komórkowe mają dodatkowe specjalne warunki zwolnienia, takie jak wymóg wypełnienia umowy transferu materiału przez potencjalnego odbiorcę przed dostarczeniem linii komórkowej. Więcej informacji można znaleźć w Terms & Conditions of Supply.

W przypadku przesyłek w regionie Azji i Pacyfiku mogą obowiązywać dodatkowe opłaty za transport i obsługę. Więcej informacji można uzyskać u lokalnego przedstawiciela działu obsługi klienta.

This cell line is part of the European Collection of Authenticated Cell Cultures (ECACC), an international repository managed by the United Kingdom Health Security Agency (UKHSA). No licensing agreement is required when either this cell line or the DNA extracted from it are used for internal research purposes only. Any other use of these products is prohibited without the express written permission of UKHSA. Inquiries regarding authorized use of this cell line or its genomic DNA may be directed to culturecollections@ukhsa.gov.uk.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 10 - Combustible liquids
• Co się dzieje?: WGK 3
• Temperatura zapłonu (°F): Not applicable
• Temperatura zapłonu (°C): Not applicable