CLL1218

U2OS LMNB1-TUBA1B-ACTB

human female bone (Disease source: Osteosarcoma)

• UNSPSC Code: 41106514
• NACRES: NA.81
• Biological source: human female bone (Source Disease: Osteosarcoma)

Właściwości

• Nazwa produktu: U2OS LMNB1-TUBA1B-ACTB,
• biological source: human female bone (Source Disease: Osteosarcoma)
• Quality Segment: 200
• OMIM accession no.: 102630, 150340, 602530
• storage temp.: −196°C
• Gene Information: human ... ACTB(60), LMNB1(4001), TUBA1B(10376)

Opis

General description

U2OS LMNB1-TUBA1B-ACTB to komórki kostniakomięsaka pochodzące od 15-letniej kobiety rasy kaukaskiej z trzema różnymi modyfikacjami ZFN tworzącymi transgen LMNB1 znakowany BFP, transgen TUBA1B znakowany GFP i transgen ACTB znakowany RFP wyrażany z ich endogennego locus genowego.

Ta linia komórkowa pochodzi z katalogu ATCC nr HTB-96.

Application

Aby dowiedzieć się więcej, odwiedź stronę internetową Cellular Reporter Cell Line.

Produkt ten jest ludzką linią komórkową U2OS, w której trzy loci genomowe - LMNB1, TUBA1B i ACTB - zostały endogennie oznakowane genami białek fluorescencyjnych odpowiednio dla niebieskiego białka fluorescencyjnego (BFP), zielonego białka fluorescencyjnego (GFP) i czerwonego białka fluorescencyjnego (RFP), przy użyciu technologii CompoZr^® zinc finger nuclease (ZFN). Integracja skutkowała endogenną ekspresją: 1) fluorescencyjnego białka fuzyjnego, BFP-laminB1, łatwo wykrywalnego w otoczce jądrowej; 2) fluorescencyjnego białka fuzyjnego, GFP-α-tubuliny, które polimeryzuje tworząc charakterystyczne wzory mikrotubul; 3) fluorescencyjnego białka fuzyjnego, RFP-β-aktyny, które polimeryzuje tworząc charakterystyczne wzory włókien aktyny. Obrazowanie linii komórkowej pokazuje fluorescencyjne znakowanie trzech białek o normalnych wzorcach dystrybucji komórkowej, co czyni linię komórkową idealną do badań przesiewowych o wysokiej zawartości w celu identyfikacji związków modulujących aktywność komórkową. Ta stabilna linia komórkowa została wyhodowana z pojedynczego klonu komórkowego. Regulacja genów LMNB1, TUBA1B i ACTB oraz odpowiadające im funkcje białek zostały zachowane w przeciwieństwie do linii komórkowych wykazujących nadekspresję z egzogennego promotora.

Biochem/physiol Actions

Jądrowy lamin B1, kodowany przez gen LMNB1, jest białkiem filamentu pośredniego otoczki jądrowej. Białko to wykazuje aktywność transkrypcyjną i odgrywa kluczową rolę w replikacji DNA, starzeniu się komórek i odpowiedzi na stres. W związku z tym LMNB1 może być wykorzystywany jako potencjalny biomarker dla HCC.
Tubulina α 1b (TUBA1B) jest białkiem mikrotubul, które odgrywa istotną rolę w dynamicznym procesie polimeryzacji i depolimeryzacji podczas replikacji i podziału komórek. TUBA1B ulega nadekspresji w tkankach nowotworowych raka wątrobowokomórkowego (HCC) i proliferujących komórkach HCC. Ta zwiększona ekspresja genu prowadzi do złych rokowań i oporności na chemioterapię w HCC.
Aktyna β (ACTB) jest obfitym białkiem utrzymującym cytoszkielet. Białko ulega ekspresji w jądrze i kontroluje ekspresję genów, podział komórek i proliferację. ACTB jest powszechnie stosowany jako gen referencyjny do pomiaru poziomu ekspresji w nowotworach.

Features and Benefits

Ukierunkowana integracja trzech różnych znaczników fluorescencyjnych za pośrednictwem Zinc Finger Nuclease (ZFN): LMNB1 jest znakowany BFP na chromosomie 5q23.2-q31.1, TUBA1B jest znakowany GFP na chromosomie 12q13.12, a ACTB jest znakowany RFP na chromosomie 7p22.1, aby stworzyć linię komórkową wykazującą stabilną ekspresję wszystkich trzech transgenów.

Komórki U2OS są przylegające, a czas podwojenia wynosi około 29 godzin.

Preparation Note

Podłoże należy wymieniać dwa do trzech razy w tygodniu.

Szybko rozmrozić fiolkę poprzez delikatne mieszanie w łaźni wodnej o temperaturze 37°C (~2 minuty), trzymając korek fiolki z dala od wody. Odkazić 70% etanolem, dodać 9 ml podłoża hodowlanego i odwirować 125 x g (5-7 minut). Ponownie zawiesić w pełnym podłożu hodowlanym i inkubować w temperaturze 37°C w atmosferze 5% CO2.

Współczynnik podhodowli: ok. 1:3-1:6

Podstawowym podłożem dla tej linii komórkowej jest McCoy's 5A Medium Modified, nr kat. Nr kat. M9309. Aby uzyskać kompletną pożywkę wzrostową, należy dodać następujące składniki do pożywki podstawowej: płodową surowicę bydlęcą, nr kat. Nr kat. F4135, do końcowego stężenia (v/v) 10%.

Pożywka do zamrażania komórek - DMSO 1X, Nr kat. Nr kat. C6164.

Analysis Note

Tested for Mycoplasma, sterility, post-freeze viability, short terminal repeat (STR) analysis for cell line identification, cytochrome oxidase I (COI) analysis for cell line species confirmation.

Legal Information

CompoZr is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 10 - Combustible liquids
• Co się dzieje?: WGK 3
• Temperatura zapłonu (°F): Not applicable
• Temperatura zapłonu (°C): Not applicable