OGS391

PSF-CMV-PGK-?GAL - PLAZMID Z PODWÓJNYM PROMOTOREM BETA GAL

plasmid vector for molecular cloning

• Synonim(y): szybki wektor
• NACRES: NA.85
• UNSPSC Code: 12352200
• Promoter: Promoter name: CMV; Promoter activity: constitutive; Promoter type: mammalian
• Origin of replication: pUC (500 copies)
• Bacteria selection: kanamycin
• Reporter gene: beta Gal
• Peptide cleavage: no cleavage

Właściwości

• form: buffered aqueous solution
• mol wt: size 7888 bp
• bacteria selection: kanamycin
• origin of replication: pUC (500 copies)
• peptide cleavage: no cleavage
• promoter: Promoter name: CMV; Promoter activity: constitutive; Promoter type: mammalian
• reporter gene: beta Gal
• shipped in: ambient
• storage temp.: −20°C

Opis

General description

Plazmid ten zawiera dwa promotory, które kończą transkrypcję przy tym samym sygnale poliadenylacji, umożliwiając ekspresję dwóch genów z jednej kasety ekspresyjnej, gdzie drugim genem jest kolorymetryczny gen reporterowy beta galaktozydazy (beta gal). Drugi promotor (PGK) jest około 10-krotnie słabszy niż promotor CMV w większości powszechnie stosowanych linii komórkowych.

Poziom ekspresji promotora: Ten plazmid zawiera promotor CMV ssaków do napędzania ekspresji genów. Przetestowaliśmy wszystkie nasze promotory ssaków w różnych typach komórek i CMV jest konsekwentnie najsilniejszy w tych, które badaliśmy. Istnieje jednak wiele doniesień o promotorze CMV wykazującym wyciszenie przez metylację w hodowli długoterminowej.

Application

Klonowanie genu: Plazmid ten został zaprojektowany tak, aby był kompatybilny z wieloma technikami klonowania. Miejsce wielokrotnego klonowania zawiera szereg standardowych, powszechnie stosowanych miejsc restrykcyjnych do klonowania. Korzystając z tych miejsc, geny mogą być wstawiane przy użyciu standardowych metod klonowania z ligazą DNA. Można również stosować inne metody, takie jak klonowanie niezależne od ligazy (LIC) Gibson Assembly InFusionHD lub Seamless GeneArt, a ponieważ wszystkie nasze plazmidy są oparte na tym samym szkielecie, ta sama metoda może być stosowana do klonowania we wszystkich naszych wektorach katalogowych.

Uwagi dotyczące miejsca wielokrotnego klonowania: W MCS znajduje się kilka ważnych miejsc. Obejmują one miejsce NcoI, miejsce XbaI oraz miejsca BsgI i BseRI. Miejsce NcoI zawiera kodon startowy, który znajduje się bezpośrednio za miejscem wiązania rybosomalnego Kozak i Shine-Dalgarno. Pozwala to na optymalne pozycjonowanie genów, gdy kodon startowy jest umieszczony w tym miejscu. Jeśli nie jest to wymagane i chcesz użyć miejsca downstream do klonowania genów, możesz usunąć miejsce NcoI poprzez rozszczepienie plazmidu za pomocą KpnI.

Miejsce XbaI zawiera kodon stop. Ten kodon stop jest umieszczony w określonej pozycji w stosunku do miejsc BsgI i BseRI, które znajdują się bezpośrednio za nim. Kiedy BseRI lub BsgI rozszczepiają plazmid, wytwarzają nawis TA z kodonu stop w miejscu XbaI, który jest kompatybilny ze wszystkimi naszymi plazmidami znaczników peptydowych ciętymi w tych samych miejscach. Miejsca BseRI i BsgI są niepalindromowe i rozszczepiają określoną liczbę zasad z dala od miejsca wiązania.

Za każdym razem, gdy klonujemy gen w naszym miejscu wielokrotnego klonowania, zawsze umieszczamy kodon start i stop w tych samych pozycjach w MCS. Jeśli początki i końce genów nie są kompatybilne z NcoI i XbaI, przedłużamy sekwencję do najbliższych miejsc zewnętrznych, ale utrzymujemy spójne położenie kodonów start i stop.

Analysis Note

Aby wyświetlić certyfikat analizy dla tego produktu, należy odwiedzić stronę www.oxgene.com .

Other Notes

Aby wyświetlić informacje o sekwencji dla tego produktu, odwiedź stronę produktu .

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 12 - Non Combustible Liquids
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable