Przejdź do
OGS92
PSF-CMV-NH2-INSULINSP-NCOI - PLAZMID WYDZIELANIA SSAKÓW
plasmid vector for molecular cloning
Synonim(y):
szybki wektor
Zaloguj się, aby wyświetlić ceny organizacyjne i kontraktowe.
Informacje o tej pozycji
UNSPSC Code:
12352200
Promoter:
Promoter name: CMV
Promoter activity: constitutive
Promoter type: mammalian
Promoter activity: constitutive
Promoter type: mammalian
Origin of replication:
pUC (500 copies)
Bacteria selection:
kanamycin
Reporter gene:
none
Peptide cleavage:
no cleavage
form
buffered aqueous solution
mol wt
size 4292 bp
technique(s)
molecular cloning: suitable
bacteria selection
kanamycin
origin of replication
pUC (500 copies)
peptide cleavage
no cleavage
peptide tag location
N-terminal
promoter
Promoter name: CMV
Promoter activity: constitutive
Promoter type: mammalian
reporter gene
none
secretion signal
human Insulin
shipped in
ambient
storage temp.
−20°C
General description
Plazmid ten dodaje wydzielniczy peptyd sygnałowy, który normalnie indukuje wydzielanie insuliny u ludzi. Będzie on przenosił każde białko, do którego jest przyłączony na N-końcu, do retikulum endoplazmatycznego. Jest on umieszczony przed miejscem wielokrotnego klonowania, ale w sąsiedztwie miejsca restrykcji NcoI. Jeśli białko nie ma sygnałów zatrzymania w organellach lub specyficznych sekwencji transportu, najprawdopodobniej będzie wydzielane do pożywki przez mechanizmy egzocytozy przepływu masowego.
Ten znacznik przeniesie białko, do którego jest dołączony, do retikulum endoplazmatycznego (ER) komórki eukariotycznej, po czym peptyd sygnałowy zostanie odcięty. Sygnały, które przenoszą białko do ER, znajdują się w znaczniku, podobnie jak sygnały, które pośredniczą w jego odcięciu od białka znajdującego się poniżej. Jego aktywność opiera się bardziej na hydropatii sekwencji peptydu sygnałowego niż na rzeczywistej kolejności aminokwasów w nim zawartych. Sekwencja aminokwasowa peptydu sygnałowego to MALWMRLLPLLALLALWGPDPAAA. Rozszczepienie następuje natychmiast po końcowej reszcie alaniny.
Poziom ekspresji promotora: Ten plazmid zawiera promotor CMV ssaków do napędzania ekspresji genów. Przetestowaliśmy wszystkie nasze promotory ssaków w różnych typach komórek i CMV jest konsekwentnie najsilniejszy w tych, które badaliśmy. Istnieje jednak wiele doniesień o promotorze CMV wykazującym wyciszenie przez metylację w hodowli długoterminowej.
Ten znacznik przeniesie białko, do którego jest dołączony, do retikulum endoplazmatycznego (ER) komórki eukariotycznej, po czym peptyd sygnałowy zostanie odcięty. Sygnały, które przenoszą białko do ER, znajdują się w znaczniku, podobnie jak sygnały, które pośredniczą w jego odcięciu od białka znajdującego się poniżej. Jego aktywność opiera się bardziej na hydropatii sekwencji peptydu sygnałowego niż na rzeczywistej kolejności aminokwasów w nim zawartych. Sekwencja aminokwasowa peptydu sygnałowego to MALWMRLLPLLALLALWGPDPAAA. Rozszczepienie następuje natychmiast po końcowej reszcie alaniny.
Poziom ekspresji promotora: Ten plazmid zawiera promotor CMV ssaków do napędzania ekspresji genów. Przetestowaliśmy wszystkie nasze promotory ssaków w różnych typach komórek i CMV jest konsekwentnie najsilniejszy w tych, które badaliśmy. Istnieje jednak wiele doniesień o promotorze CMV wykazującym wyciszenie przez metylację w hodowli długoterminowej.
Application
Klonowanie w genie: Wektor ten został zaprojektowany w celu umożliwienia dodania znacznika peptydowego na końcu białka będącego przedmiotem zainteresowania przy użyciu standardowych technik klonowania. Uwagi dotyczące wielu miejsc klonowania:
W miejscu NcoI znajduje się kodon startowy, który w razie potrzeby można usunąć przez trawienie KpnI. MCS dla wstawień genów rozciąga się od NotI do XbaI, jednak znacznik znajduje się między miejscami NotI i HindIII. Istnieją sekwencje Shine-Dalgarno i sekwencje KOZAK dopasowane do kodonu startowego znacznika peptydowego.
Miejsca ClaI do NheI mają inne funkcje, takie jak dodawanie C-końcowych znaczników peptydowych, drugich promotorów lub składników ekspresji IRES. Miejsca restrykcyjne BsgI i BseRI rozszczepiają się w obrębie kodonu stop w miejscu XbaI i umożliwiają retrospektywną fuzję C-końcowych sekwencji znaczników peptydowych, jeśli kodon stop jest umieszczony w tej pozycji.
W miejscu NcoI znajduje się kodon startowy, który w razie potrzeby można usunąć przez trawienie KpnI. MCS dla wstawień genów rozciąga się od NotI do XbaI, jednak znacznik znajduje się między miejscami NotI i HindIII. Istnieją sekwencje Shine-Dalgarno i sekwencje KOZAK dopasowane do kodonu startowego znacznika peptydowego.
Miejsca ClaI do NheI mają inne funkcje, takie jak dodawanie C-końcowych znaczników peptydowych, drugich promotorów lub składników ekspresji IRES. Miejsca restrykcyjne BsgI i BseRI rozszczepiają się w obrębie kodonu stop w miejscu XbaI i umożliwiają retrospektywną fuzję C-końcowych sekwencji znaczników peptydowych, jeśli kodon stop jest umieszczony w tej pozycji.
Analysis Note
Aby wyświetlić certyfikat analizy dla tego produktu, należy odwiedzić stronę www.oxgene.com .
Other Notes
Aby wyświetlić informacje o sekwencji dla tego produktu, odwiedź stronę produktu .
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.
Klasa składowania
12 - Non Combustible Liquids
Temperatura zapłonu (°F)
Not applicable
Temperatura zapłonu (°C)
Not applicable
Wybierz jedną z najnowszych wersji:
Masz już ten produkt?
Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.