The optimal pH range for product P8375 is 6.0 - 6.5.
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P8375
Peroxidase aus Meerrettich
Type VI, essentially salt-free, lyophilized powder, ≥250 units/mg solid (using pyrogallol)
Synonym(e):
HRP, Nachweis-Enzym, Peroxidase, Donor:hydrogen-peroxide oxidoreductase, Meerrettichperoxidase
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Über diesen Artikel
CAS-Nummer:
eCl@ss:
32160410
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.54
EC Number:
232-668-6
MDL number:
Specific activity:
≥250 units/mg solid (using pyrogallol)
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Unterstützung erhaltentype
Type VI
Quality Segment
form
essentially salt-free, lyophilized powder
specific activity
≥250 units/mg solid (using pyrogallol)
mol wt
~44 kDa
solubility
0.1 M phosphate buffer: soluble 10 mg/mL, clear, orange to red (pH 6.0)
absorbance ratio
RZ 2.5-4.0
application(s)
diagnostic assay manufacturing
storage temp.
2-8°C
SMILES string
[O+H2]O[O-]
InChI
1S/H2O3/c1-3-2/h1-2H
InChI key
JSPLKZUTYZBBKA-UHFFFAOYSA-N
General description
Horseradish peroxidase (HRP) wird aus Meerrettich (Amoracia rusticana) Wurzeln isoliert und ist innerhalb der Peroxidasen der Gruppe der Ferroprotoporpyhrine zuzuordnen. HRP besteht aus einer einzelnen Polypeptidkette und entält vier Disulfidbrücken. Sie ist ein Glykoprotein mit einem Kohlenhydratanteil von 18%. Der Kohlenhydratanteil besteht aus Galactose, Arabinose, Xylose, Fucose, Mannose, Mannosamin und Galactosamin - in Mengenverhältnissen abhängig vom Isoenzym. Ihr Molekulargewicht (~44 kDa) setzt sich aus der Polypeptidkette (33,890 Daltons), dem Hemin plus Ca2+ (~700 Daltons) und der Glykosylierung (~9,400 Daltons) zusammen. Es existieren zumindest sieben Isoenzyme von HRP. Der isoelektrische Punkt von HRP ist in einem Bereich von pH 3 3.0 - 9.0.
Application
Meerrettichperoxidase (HRP) wird aus Meerrettichwurzeln (Amoracia rusticana) isoliert und gehört zur Ferroprotoporphyringruppe der Peroxidasen. Sie wird in biochemischen Anwendungen wie Western Blots, ELISA und Immunhistochemie eingesetzt. Meerrettichperoxidase wird zur Amplifikation eines schwachen Signals und zur Steigerung der Nachweisbarkeit eines Zielmoleküls, z. B. eines Proteins, verwendet. Produkt P8375, Typ VI ist ein im Wesentlichen salzfreies, lyophilisiertes Pulver. Sie wird häufig zur Bestimmung der Mengen von Glucose und Peroxiden in Lösung verwendet. Sie wurde zur Untersuchung des sensorischen Inputs der Neuronen des zervikalen Rückenmarks eingesetzt[1].
Das Enzym diente zur Entwicklung eines thermostabilen, auf Sojabohnen-Peroxidase basierenden Biosensors durch Vernetzung und elektrische ′Verbindung′ des Enzyms mit einer Glaskohlenstoff-Elektrode durch ein redox-leitendes Hydrogel. Es wurde auch zur Untersuchung der Oxidation von Lipoprotein niederer Dichte verwendet.[2]
Biochem/physiol Actions
Wenn Meerrettichperoxidase mit einem Substrat inkubiert wird, erzeugt sie ein farbiges, fluorimetrisches oder lumineszierendes Derivat des markierten Moleküls, wodurch die Quantifizierung ermöglicht wird. Meerrettichperoxidase verringert das Maß der Hemmung in einem mutierten cydAB leicht. Bekannte Inhibitoren sind Natriumazid, Cyanid, L-Cystein, Dichromat, Ethylenthioharnstoff, Hydroxylamin, Sulfid, Vanadat, p-Aminobenzoesäure sowie die Ionen Cd2+, Co2+, Cu2+, Fe3+, Mn2+, Ni2+ und Pb2+.
HRP kann leicht mit Wasserstoffperoxid (H2O2) kombiniert werden, und der resultierende [HRP-H2O2]-Komplex kann ein breites Spektrum an Wasserstoffdonatoren oxidieren. Der optimale pH-Wert beträgt 6,0–6,5 und das Enzym ist bei einem pH-Wert im Bereich von 5,0–9,0 am stabilsten. HRP kann durch verschiedene Verfahren an Antikörper konjugiert werden, einschließlich durch Glutaraldehyd, Periodatoxidation, Disulfidbindungen und Amino- oder Thiol-gerichtete Vernetzungsmittel. Sie ist kleiner und stabiler als die Enzymmarkierungen β-Galactosidase und alkalische Phosphatase, wodurch sie die begehrteste Markierung ist. Ihre Glykosylierung führt auch zu einer geringeren nichtspezifischen Bindung.
Analysis Note
Die RZ (Reinheitszahl) ist das Absorptionsratio A403/A275 bestimmt bei 0.5-1.0 mg/ml in deionisiertem Wasser. Es ist ein Mass für den Hämingehalt, nicht für die Enzymaktivität. Selbst Zubereitungen mit hoher RZ können eine tiefe Enzymaktivität haben.
Other Notes
Eine Pyrogalloleinheit bildet in 20 s bei einem pH-Wert von 6,0 und 20 °C 1 mg Purpurogallin aus Pyrogallol.
Weitere Informationen über Peroxidase finden Sie unter www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer.
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| specific activity ≥250 units/mg solid (using pyrogallol) | specific activity ≥250 units/mg solid (using pyrogallol), 950-2000 units/mg solid (using ABTS) | specific activity 150-250 units/mg solid (using pyrogallol) | specific activity ≥250 units/mg solid (using pyrogallol) |
| application(s) diagnostic assay manufacturing | application(s) diagnostic assay manufacturing | application(s) diagnostic assay manufacturing | application(s) diagnostic assay manufacturing |
| form essentially salt-free, lyophilized powder | form essentially salt-free, lyophilized powder | form essentially salt-free, lyophilized powder | form powder, stabilized |
| storage temp. 2-8°C | storage temp. 2-8°C | storage temp. 2-8°C | storage temp. 2-8°C |
| solubility 0.1 M phosphate buffer: soluble 10 mg/mL, clear, orange to red (pH 6.0) | solubility 0.1 M phosphate buffer: soluble 10 mg/mL, clear, orange to red (pH 6.0), H2O: soluble | solubility 0.1 M phosphate buffer: soluble (pH 6.0), H2O: soluble | solubility phosphate buffer: soluble |
| mol wt ~44 kDa | mol wt ~44 kDa | mol wt ~44 kDa | mol wt - |
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signalword
Danger
hcodes
pcodes
Hazard Classifications
Resp. Sens. 1
Lagerklasse
11 - Combustible Solids
wgk
WGK 1
ppe
Eyeshields, Gloves, type N95 (US)
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What is the optimal pH range of Peroxidase from horseradish, Product P8375?
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How do I convert units of Peroxidase from horseradish, Product P8375, to solid?
1 answer-
The activity listed on the Certificate of Analysis for each lot can be used to convert from units to milligrams of solid.
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What can you tell me about the stability of Peroxidase from horseradish, Product P8375, (as is, in suspension and in solution)?
1 answer-
This product is stable as a powder, kept refrigerated. See the certificate of analysis for a lot-specific recommended retest date. It is also stable as a crystalline suspension of 3.2 M (NH4)2SO4 solution containing potassium phosphate buffer, pH 6.0 (see Product No. P6140). It is reasonably stable in solution in phosphate buffer. We have found that at 10 mg/mL in 0.1 phosphate buffer, pH 6.0, solutions kept frozen at -20°C lose less than 2% of their activity per week.
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What is the Department of Transportation shipping information for this product?
1 answer-
Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.
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