17-601

ChIPAb+ Sp1 - durch ChIP validiertes Antikörper- und Primer-Set

from rabbit

• Synonym(e): Transcription factor Sp1, TSFP1
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Clone: polyclonal
• Species reactivity: rat, human, mouse
• Application: ChIP, WB
• Citations: 36

Eigenschaften

• biological source: rabbit
• Quality Segment: 100
• clone: polyclonal
• species reactivity: rat, human, mouse
• manufacturer/tradename: ChIPAb+, Upstate^®
• technique(s): ChIP: suitable, western blot: suitable
• NCBI accession no.: NM_138473.2
• UniProt accession no.: P08047
• shipped in: dry ice

Beschreibung

General description

105 kDa und 95 kDa

Der Transkriptionsfaktor SP1 kann die Transkription als Reaktion auf physiologische und pathologische Reize aktivieren oder unterdrücken. Er bindet mit hoher Affinität an GC-reiche Motive und reguliert die Expression einer großen Anzahl von Genen, die an einer Reihe von Prozessen wie Zellwachstum, Apoptose, Differenzierung und Immunantworten beteiligt sind. Wird stark durch posttranslationale Modifikationen (Phosphorylierung, Sumoylierung, proteolytische Spaltung, Glykosylierung und Acetylierung) reguliert. Bindet auch an den PDGFR-alpha-G-box-Promotor. Könnte beim Modulieren der Zellreaktion auf DNA-Schäden eine Rolle spielen. Ist an der Chromatin-Remodellierung beteiligt. Spielt eine Rolle bei der Rekrutierung von SMARCA4/BRG1 am c-FOS-Promotor. Spielt eine wichtige Rolle bei der Regulation der FE65-Genexpression. In einem Komplex mit ATF7IP erhält er die Telomeraseaktivität in Krebszellen durch die Einleitung der TERT- und TERC-Genexpression. Isoform 3 ist ein stärkerer Aktivator der Transkription als Isoform 1. Reguliert die Transkription der CLOCK-Kernkomponente ARNTL/BMAL1 positiv.

Jede Charge der ChIPAb+-Reihe von Antikörpern wird einzeln für die Chromatin-Immunpräzipitation validiert, um jedes Mal erfolgreiche ChIP-Assays zu garantieren. Jeder Antikörper umfasst ein Kontrollprimerset zur Bestätigung der Leistung. Der Sp1-Antikörper und der Negativkontrolle-Antikörper (normales Kaninchen-IgG) können verwendet werden, um zu demonstrieren, dass der Sp1-Antikörper für die Präzipitation von Sp1-assoziiertem Chromatin funktionell validiert wurde.
Die enthaltenen qPCR-Primer flankieren die Sp1-Bindungsstelle des humanen DHFR-Promotors.

Immunogen

Erkennt humanes Sp1-Protein von voller Länge

Application

Durch ChIP validiertes SP1-Antikörper- und Primer-Set, einschließlich Antikörper in ChIP-Qualität und spezifische PCR-Kontrollprimer für die Chromatin-Immunpräzipitation von SP1.

Forschungs-Unterkategorie
Chromatin-Biologie

Forschungskategorie
Epigenetik & Zellkernfunktion

Western-Blot-Analyse:
HeLa-Zellkernextrakt wurde durch Elektrophorese aufgelöst, auf Nitrocellulose übertragen und mit Anti-Sp1 (0,2 μg/ml) untersucht. Die Proteine wurden mit einem an HRP konjugierten Anti-Kaninchen-Sekundärantikörper der Ziege und einem Chemilumineszenz-Nachweissystem visualisiert (siehe Abbildungen).

Biochem/physiol Actions

Sp1

Packaging

25 Assays je Kit, ~4 μg je Chromatin-Immunpräzipitation.

Physical form

Anti-Sp1 (polyklonales Kaninchen-IgG). Ein Fläschchen mit 100 μg mit Protein A aufgereinigtem IgG in 100 μl 0,014-mol/l-Phosphatpuffer, pH-Wert 7,6, 0,175 mol/l NaCl, 0,07 % Natriumazid und 30 % Glycerin. Bei -20 °C aufbewahren. Der Sp1-Antikörper wurde gegen humanes Sp1-Protein von voller Länge entwickelt und erkennt Sp1, Molekülmasse 105 kDa und 95 kDa, von Mensch, Maus und Ratte.

Normales Kaninchen-IgG. Ein Fläschchen mit 125 μg normalem Kaninchen-IgG in 125 μl. Bei -20 °C aufbewahren.

ChIP-Primer für DHFR. Ein Fläschchen mit 75 μl von 5 μmol/l jedes Kontrollprimers, spezifisch für den humanen Dihydrofolatreduktase (DHFR)-Promotor. Bei -20 °C aufbewahren.
FÜR: TCG CCT GCA CAA ATA GGG AC
REV: AGA ACG CGC GGT CAA GTT T

Format: Aufgereinigt

Mit Protein A aufgereinigt

Preparation Note

Bei -20 °C ab Versanddatum 1 Jahr haltbar.

Analysis Note

Chromatin-Immunpräzipitation:
Beschalltes Chromatin aus 1 x 10⁶ HeLa-Zellen wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 4 μg Negativkontrolle-Antikörper, normalem Kaninchen-IgG oder Anti-Sp1 des Kaninchens und dem Magna ChIP™ A Kit (Katalognr. 17-610) Rapid Protocol (2-Std.-IP) unterzogen. Die erfolgreiche Anreicherung von Sp1-assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit ChIP-Primern für DHFR verifiziert, die den humanen DHFR-Promotor flankieren, der eine Sp1-Bindungsstelle enthält (siehe Abbildungen).
Bitte beziehen Sie sich für experimentelle Details auf das Protokoll für EZ-ChIP A (Katalognr. 17-408)
oder EZ-ChIP (Katalognr. 17-371).

Kontrolle
Einschließlich Kaninchen-IgG als Negativkontrolle und für den humanen Dihydrofolatreduktase (DHFR)-Promotor spezifische Kontrollprimer.

Legal Information

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

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• Lagerklasse: 10 - Combustible liquids
• Was ist los?: WGK 2