This material is soluble in aqueous buffers or water. The recommended resonstitution volume is reported on the product label. Please see the link below to review addtional information available in the product datasheet:
https://www.emdmillipore.com/product/Diphtheria-Toxin-Unnicked-Corynebacterium-diphtheriae-Calbiochem,EMD_BIO-322326#anchor_PDS
322326
Diphtheria Toxin, Unnicked
from Corynebacterium diphtheriae, Major band under reduced conditions (SDS-PAGE), <15% nicking, solid, protein synthesis inhibitor, Calbiochem®
Synonym(e):
DTx
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| Größe/SKU | Verfügbarkeit | Preis |
|---|---|---|
1 mg | Warenkorb auf Verfügbarkeit prüfen | € 608,00 |
Über diesen Artikel
UNSPSC Code:
12352200
NACRES:
NA.77
Form:
solid
Storage condition:
OK to freeze
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Unterstützung erhaltenProduktname
Diphtherietoxin, Unnicked, Corynebacterium diphtheriae, Diphtheria toxin catalyzes ADP-ribosylation of eukaryotic aminoacyltransferase II (EF2) using NAD as substrate. Activation requires nicking with a protease followed by reduction with DTT.
Quality Segment
description
RTECS - XW5807200
form
solid
manufacturer/tradename
Calbiochem®
storage condition
OK to freeze
solubility
soluble (Aqueous buffers or H2O. Please see vial label for lot-specific reconstitution volume.)
shipped in
ambient
storage temp.
2-8°C
General description
Diphtherietoxin, Unnicked, aus Corynebacterium diphtheriae katalysiert die ADP-Ribosylierung der eukaryotischen Aminoacyltransferase II (EF2) mit NAD als Substrat und hemmt dadurch die Proteinsynthese. Kann auch den internukleosomalen Abbau induzieren. Verursacht DNA-Fragmentierung und Zytolyse in U937-Zellen. Für die Aktivierung ist Nicking mit einer Protease und die anschließende Reduktion mit DTT erforderlich. Das als Proenzym synthetisierte und ausgeschiedene Diphtherietoxin besteht aus einer einzigen Polypeptidkette mit 63 kDa. Damit seine enzymatische Aktivität ausgeprägt wird, müssen in dem Toxin zwei kovalente Strukturänderungen erfolgen. Zunächst entsteht durch eine schwache Proteolyse ein enzymatisch inaktives sogenanntes „nicked toxin“, das aus zwei über eine Disulfidbindung verbundenen Hauptfragmenten (A und B) besteht. Das „nicked toxin“ wird durch Thiole (DTT) reduziert und dadurch das enzymatisch aktive N-terminale A-Fragment (24 kDa) freigesetzt. Das C-terminale B-Fragment (39 kDa) weist keine offensichtliche enzymatische Aktivität auf. Das B-Fragment wird für die Toxizität benötigt und ist für die Erkennung und die Bindung des Toxins an Rezeptoren auf der Zelloberfläche verantwortlich.
Application
Biochem/physiol Actions
Das Produkt konkurriert nicht mit ATP.
Hinweis: Die Toxizität kann chargenabhängig variieren. Jedes Labor sollte die optimale Dosierung für jede einzelne Anwendung ermitteln.
Primärziel
Eukaryotische Aminoacyltransferase II (EF2)
Eukaryotische Aminoacyltransferase II (EF2)
Reversibel: nein
Zellpermeabel: nein
Physical form
Lyophilisiert aus sterilem 10 mM Tris, 1 mM EDTA, pH 7,5.
Preparation Note
Das chargenspezifische Rekonstituierungsvolumen entnehmen Sie bitte dem Fläschchenetikett.
Nach der Rekonstituierung in Aliquote aufteilen, rasch auf Trockeneis einfrieren und anschließend bei -70 °C einfrieren. Die Aliquote sollten ausschließlich bei Raumtemperatur wieder aufgetaut werden. Für Tests, in denen eine sehr geringe Konzentration des Diphtherietoxins zum Einsatz kommt, wird ein Trägerprotein wie BSA oder HSA empfohlen.
Analysis Note
Hauptbande (unter reduzierenden Bedingungen) mit ~ 63 kDa
Other Notes
Das Diphtherietoxin wird aus dem Corynebacterium-diphtheriae-Stamm Park Williams 8 durch ein modifiziertes Verfahren nach Pappenheimer et al. isoliert und aufgereinigt. Disk-Elektrophorese bei alkalischem pH-Wert unter nicht denaturierenden Bedingungen ergab, dass dieses Produkt als eine Hauptbande von 63 kDa wandert; dies entspricht dem intakten Toxin. Es können auch zwei schnellere, schwächer gefärbte Banden (24 und 39 kDa) auftreten, die den A- und B-Fragmenten entsprechen. Nach der Trypsinbehandlung in DTT zeigt das Diphtherietoxin in Tests auf seine Fähigkeit zur ADP-Ribosylierung der EF2 eine hohe Aktivität. Die ermittelte ED50 für CHO-Zellen beträgt ca. 0,4 ng/ml.
Das Diphtherietoxin wird aus dem Corynebacterium-diphtheriae-Stamm Park Williams 8 durch ein modifiziertes Verfahren nach Pappenheimer et al. isoliert und aufgereinigt. Disk-Elektrophorese bei alkalischem pH-Wert unter nicht denaturierenden Bedingungen ergab, dass dieses Produkt als eine Hauptbande von 63 kDa wandert; dies entspricht dem intakten Toxin. Es können auch zwei schnellere, schwächer gefärbte Banden (24 und 39 kDa) auftreten, die den A- und B-Fragmenten entsprechen. Nach der Trypsinbehandlung in DTT zeigt das Diphtherietoxin in Tests auf seine Fähigkeit zur ADP-Ribosylierung der EF2 eine hohe Aktivität. Die ermittelte ED50 für CHO-Zellen beträgt ca. 0,4 ng/ml.
Legal Information
CALBIOCHEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Disclaimer
Toxizität: Gesundheitsschädlich (C)
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Dieser Artikel | |||
|---|---|---|---|
| description Diphtheria toxin catalyzes ADP-ribosylation of eukaryotic aminoacyltransferase II (EF2) using NAD as substrate. Activation requires nicking with a protease followed by reduction with DTT. | description lyophilized powder, Product is in unnicked form | description Tetanus toxin is produced by Clostridium tetani. Composed of a 100 kDa heavy and a 50 kDa light chain joined by a single interchain disulfide bond. | description This Pertussis toxin, CAS 70323-44-3, catalyzes ADP-ribosylation of guanine nucleotide-binding regulatory proteins Gi, Go, and Gt. |
| form solid | form lyophilized powder | form lyophilized | form lyophilized |
| manufacturer/tradename Calbiochem® | manufacturer/tradename - | manufacturer/tradename Calbiochem® | manufacturer/tradename Calbiochem® |
| Quality Level 100 | Quality Level 200 | Quality Level 100 | Quality Level 100 |
| storage temp. 2-8°C | storage temp. 2-8°C | storage temp. 2-8°C | storage temp. 2-8°C |
| solubility soluble (Aqueous buffers or H2O. Please see vial label for lot-specific reconstitution volume.) | solubility - | solubility soluble (Please refer to the vial label for lot-specific reconstitution volume.) | solubility soluble (Reconstitute with 500 µl H2O. Obtain a uniform suspension before each use by scraping the walls of the tube and gently pipetting the solution to mix.) |
| storage condition OK to freeze | storage condition - | storage condition OK to freeze | storage condition do not freeze |
Signalwort
Danger
Gefahrencodes
Sicherheitshinweise
Hazard Classifications
Acute Tox. 1 Inhalation - Acute Tox. 1 Oral
Lagerklasse
6.1A - Combustible acute toxic Cat. 1 and 2 / very toxic hazardous materials
Flammpunkt (°F)
Not applicable
Flammpunkt (°C)
Not applicable
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how to reconstitute diphtheria toxin
1 answer-
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Could information be provided on the suitability of product 322326-1MG for cell deletion involving DTT receptors in animals? Additionally, what are the differences between 322326-1MG and D0564?
1 answer-
Product 322336 has not been validated for in vivo application, but it has been known to work well on animal models with DT receptors. For further reference, find the citation "Curr Biol. 2021 Jun 7;31(11):2469-2476. Efferocytosis by Paneth cells within the intestine" with PMID: 33852873. 322326-1MG and D0564 products are same but with slight differences in specifications tested for batch release
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For in vivo application on mice, is nicking necessary when using this product?
1 answer-
The Diphtheria Toxin preparation is not tested for in vivo application. However, based on data published in the literature, the unnicked form of the toxin seems to work as well as the nicked form for in vivo application.
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