SCT150

Glühwürmchen-Luciferase-HTS-Assay

Glow-type luciferase assay for the quantification of firefly luciferase gene expression in mammalian cells with signal half-life of about 3 hours

• Synonym(e): Firefly Luciferase Assay, Bioluminescent Assay
• NACRES: NA.84
• UNSPSC Code: 12352207
• Technique(s): cell based assay: suitable, live cell imaging : suitable
• Storage temp.: -65 to -96°C
• Detection method: chemiluminescent
• Shipped in: ambient

Eigenschaften

• technique(s): cell based assay: suitable, live cell imaging : suitable
• detection method: chemiluminescent
• shipped in: ambient
• storage temp.: -65 to -96°C

Beschreibung

General description

Glühwürmchen-Luciferase wird häufig als Reporter zum Untersuchen der Genregulierung und -funktion sowie für Arzneimittelscreenings eingesetzt. Es handelt sich hierbei aufgrund der fehlenden endogenen Luciferase-Aktivität in Säugetierzellen und -gewebe um einen Genreporter mit hoher Sensitivität. Glühwürmchen-Luciferase ist ein 62.000-Da-Protein, das als Monomer aktiv ist und für dessen Aktivität keine Weiterverarbeitung erforderlich ist. Das Enzym katalysiert die ATP-abhängige Oxidation von D-Luciferin zu Oxyluciferin, wodurch eine Lichtemission bei 560 nm generiert wird. Die durch die Reaktion erzeugte Lichtemission ist direkt proportional mit der Anzahl der Luciferase-Enzymmoleküle.

Die durch die Reaktion erzeugte Lichtproduktion führt jedoch zur Bildung von suizidalem Adenyl-Oxyluciferin an der Enzymoberfläche. So entsteht eine sehr kurze Halbwertszeit der Lichtemission mit einer Flash-Kinetik. Der Glühwürmchen-Luciferase-HTS-Assay wurde als proprietäres Gemisch von Substanzen entwickelt, welche die enzymatische Reaktion modifizieren, um ein langanhaltendes Signal (Dauerleuchten) zu erzeugen, indem sie die Bildung von Adenyl-Oxyluciferin an der Enzymoberfläche verhindern. Es handelt sich um ein homogenes, hochempfindliches Glühwürmchen-Luciferase-Reporter-Gen-Assay-Kit zur Quantifizierung der Glühwürmchen-Luciferase-Expression in Säugetierzellen mit einer Signalhalbwertszeit von ca. 3 Stunden (Abbildung 2). Luciferase-Tests vom Glow-Typ weisen im Vergleich zu Flash-Typ-Assays ein geringeres Lumineszenzsignal auf. Die Sensitivität und Nachweisgrenze des Assays hängt von den Luciferase-Expressionsgraden in Ihrem experimentellen System sowie von der Luminometerempfindlichkeit ab.

Application

Forschungskategorie
Zellsignalwege

Forschungsunterkategorie
Farbstoff für lebende Zellen

Glow-Typ-Luciferase-Assay zur Quantifizierung der Glühwürmchen-Luciferase-Genexpression in Säugetierzellen mit einer Signalhalbwertszeit von etwa 3 Stunden

Glühwürmchen-Luciferase-Assay

Physical form

Flüssig

Preparation Note

Den Glühwürmchen-Luciferase-HTS-Assay bei -80 °C aufbewahren. Die Kit-Komponenten sind mindestens sechs Monate ab Empfangsdatum haltbar, wenn sie gemäß den Empfehlungen gelagert werden. Wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen vermeiden.

Other Notes

1) Assay-Puffer (CS224524): 1 x 100 ml

2) D-Luciferin (CS224523): 1 x 25 mg

Disclaimer

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 10 - Combustible liquids