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cOmplete^™, EDTA-freier Proteasehemmer-Cocktail

Tablets provided in EASYpacks

• Synonym(e): Proteaseinhibitor
• NACRES: NA.21
• UNSPSC Code: 12352204
• Form: tablet
• Solubility: aqueous buffer: soluble, water: soluble
• Storage temp.: 2-8°C

Eigenschaften

• form: tablet
• packaging: pkg of 20 tablets (individually packed in foil blister packs)
• manufacturer/tradename: Roche
• input: general use sample(s)
• solubility: aqueous buffer: soluble, water: soluble
• absorption: 0.08 at 280 nm
• storage temp.: 2-8°C

Beschreibung

General description

cOmplete, EDTA-freie Proteasehemmer-Tabletten hemmen zahlreiche Serin- und Cysteinproteasen. Im Gegensatz zu anderen cOmplete-Tabletten enthalten sie kein EDTA – oder andere Chelatbildner wie z. B. EGTA – und beeinflussen die Stabilität und Funktion metallabhängiger Proteine daher nicht. Die Affinitätsreinigung von Poly-His-Tag-Fusionsproteinen mit IMAC (Immobilisierte Metall-Affinitätschromatographie) wird ebenfalls erleichtert (Dialyse ist nicht erforderlich).
Die Tabletten weisen durch ihre optimierte Zusammensetzung eine exzellente Hemmung von Serin- und Cysteinproteasen auf und sind deshalb gut geeignet, um isolierte Proteine aus tierischen Geweben, Pflanzen, Hefen und Bakterien zu schützen. EDTA-freie cOmplete-Tabletten enthalten sowohl irreversible als auch reversible Proteasehemmer. Metallo- und Aspartatproteasen werden nicht gehemmt.

Die EDTA-freien cOmplete-Tabletten sind mit cOmplete-Tabletten identisch; der einzige Unterschied besteht darin, dass sie weder EDTA noch andere Chelatbildner (z. B. EGTA) enthalten.

Application

EDTA-freies cOmplete^™ hemmt Serin- und Cysteinproteasen in Bakterien-, Hefe-, Pflanzen- und Säugerzellextrakten effizient. Metallo- und Aspartatproteasen werden nicht gehemmt.
EDTA-freie cOmplete-Tabletten werden zur Hemmung der proteolytischen Aktivität in großen Volumina (bis zu 50 ml) verwendet, wenn EDTA die Proteinstabilität (z. B. bei metallhaltigen Proteinen) oder nachfolgende Assays beeinträchtigen könnte. Da EDTA die IMAC (Immobilisierte Metall-Affinitätschromatographie) beeinträchtigt, werden EDTA-freie cOmplete-Tabletten bevorzugt für die Isolierung von Poly-His-markierten Fusionsproteinen eingesetzt.
Wenn eine Hemmung der proteolytischen Aktivität in kleineren Volumina (bis zu 10 ml) erforderlich ist, empfehlen wir die Verwendung von EDTA-freien cOmplete-Mini-Tabletten.

Pro 50 ml Inkubationslösung wurde eine EDTA-freie cOmplete-Tablette dazugegeben. Die proteolytische Aktivität wurde mit dem universellen Roche-Proteasesubstrat (Casein, Resorufin-markiert) bestimmt. Wenn Extraktionen oder Ein-Schritt-Isolierungen im sauren pH-Bereich notwendig sind, geben Sie einfach Pepstatin zusammen mit den EDTA-freien cOmplete-Tabletten dazu, um die Aspartatprotease (saure Protease) zu hemmen. Alle Experimente wurden bei +15 bis +25 °C durchgeführt.

cOmplete^™ EDTA-freier Proteasehemmer-Cocktail wurde als Bestandteil folgender Lösungen verwendet

• Lysepuffer für die Lyse transfizierter humaner embryonaler Nierenzellen (HEK293T) und Radioimmunpräzipitationslysepuffer (RIPA) für die Homogenisierung von Zebrafischembryonen
• Reagens für die Proteinextraktion aus Gewebe (T-PER) für die Homogenisierung von Hippocampus-Gewebe
• Natriumdodecylsulfat(SDS)-Lysepuffer für die Lyse von Hepatozyten

Biochem/physiol Actions

Gemisch aus verschiedenen Proteasehemmern. Für die Hemmung von Serin- und Cystein-, aber nicht von Metalloproteasen.

Features and Benefits

cOmplete Proteasehemmer-Tabletten schützen Ihre Proteine vor zahlreichen Proteasen. In nur wenigen Minuten kann ungehemmte proteolytische Aktivität das Protein, das Sie in tagelanger Arbeit isoliert haben, abbauen. Jede dieser praktischen wasserlöslichen Tabletten enthält ein Proteasehemmergemisch, das die proteolytische Aktivität der meisten Zelltypen, einschließlich Tier-, Pflanzen-, Hefe- und Bakterienzellen, hemmt. Da kein Abwiegen oder Abmessen erforderlich ist, werden konstante Ergebnisse gewährleistet.

• Praktisch: Drücken Sie die schnell lösliche Tablette durch die EASYpack-Folienverpackung in den Puffer.
• Umfassender Schutz: Sofortiger Schutz von Proteinen vor zahlreichen Proteasen.
• Flexibel: Schutz von Proteinen in Extrakten aus praktisch allen Geweben oder Zellen, einschließlich von Tieren, Pflanzen, Hefen, Bakterien oder Schimmelpilzen.
• Sicher: Die Auswahl nicht toxischer Hemmstoffe stellt kein Risiko für das Umfeld dar.
• Für die IMAC-Aufreinigung geeignet: cOmplete His-Tag Aufreinigungsharz dient zur Aufreinigung polyhistidinmarkierter Proteine.

Packaging

20 einzeln verpackte cOmplete-Proteasehemmer-Cocktail-Tabletten in Folien-Blisterpackungen.

Physical form

Tabletten in Folien-Blisterpackungen

Preparation Note

Arbeitskonzentration: 1 Tablette pro 50 ml Extraktionslösung
Arbeitslösung: Handhabung

Die Tablette vorsichtig mit dem Daumen (nicht mit dem Fingernagel) durch die Folienverpackung drücken, um ein Auseinanderbrechen der Tablette zu vermeiden.

Ansetzen der Arbeitslösung

Eine einzelne EDTA-freie cOmplete-Tablette reicht aus, um die proteolytische Aktivität in einer 50-ml-Extraktionslösung zu hemmen. Bei sehr hoher proteolytischer Aktivität sollte eine Tablette pro 25 ml Extraktionspuffer verwendet werden. Die Tabletten können dem Extraktionsmedium direkt zugegeben werden. Alternativ dazu kann eine Stammlösung (25x konz.) hergestellt werden.

Herstellung der Stammlösung (25x konz.)

Lösen Sie eine EDTA-freie cOmplete-Tablette in 2 ml destilliertem Wasser oder in 2 ml 100 mM Phosphatpuffer pH 7,0.
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): Die Stammlösung kann 1 bis 2 Wochen bei 2 bis 8 °C oder mindestens 12 Wochen bei -15 bis -25 °C aufbewahrt werden.

Bei 2 bis 8 °C aufbewahren. (Die Lagerung bei -15 bis -25 °C ist ebenfalls möglich.)

In wässrigen Puffern löslich oder kann direkt zum Extraktionsmedium gegeben werden. Alternativ dazu kann eine 25x-Stammlösung in 2 ml Wasser oder 100 mM Phosphatpuffer (pH 7,0) hergestellt werden. Die Stammlösung ist 1–2 Wochen bei 2–8 °C oder mindestens 12 Wochen bei -15 bis -25 °C haltbar; kann in thiolhaltigen Lösungen bei 15–25 °C verwendet werden.

Analysis Note

Leistungsgeprüft mit Pankreasextrakt.

Other Notes

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht für den Einsatz in diagnostischen Verfahren geeignet.

Proprietäres Gemisch aus verschiedenen Proteasehemmern mit breiter Hemmspezifität.

Legal Information

cOmplete is a trademark of Roche

Sicherheitshinweise

• pictograms: GHS05
• signalword: Danger
• hcodes: H314
• pcodes: P260 - P280 - P301 + P330 + P331 - P303 + P361 + P353 - P304 + P340 + P310 - P305 + P351 + P338 + P310
• Hazard Classifications: Eye Dam. 1 - Skin Corr. 1B
• wgk: WGK 2
• flash_point_f: does not flash
• flash_point_c: does not flash
• Lagerklasse: 8A - Combustible corrosive hazardous materials