COLLDISP-RO

Collagenase/Dispase^®

lyophilized, non-sterile, optimum pH 7.0-8.0

• Synonym(e): Kollagenase
• UNSPSC Code: 12352204
• NACRES: NA.54
• Specific activity: >0.8 U/mg lyophilizate, pH 7.5, 37 °C (casein as substrate, Dispase)
• Biological source: enzyme from Bacillus polymyxa ( Dispase ), enzyme from bacterial ( Collagenase from Vibrio alginolyticus)
• Concentration: 1 mg/mL (Collagenase: 0.1U/mL, Dispase: 0.8U/mL)

Eigenschaften

• biological source: enzyme from Bacillus polymyxa ( Dispase ), enzyme from bacterial ( Collagenase from Vibrio alginolyticus)
• sterility: non-sterile
• form: lyophilized
• collagenase activity: >0.1 U/mg lyophilizate, 25 °C (4-phenyl-azobenzyl-oxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg as substrate)
• specific activity: >0.8 U/mg lyophilizate, pH 7.5, 37 °C (casein as substrate, Dispase)
• packaging: pkg of 100 mg (10269638001), pkg of 500 mg (11097113001)
• manufacturer/tradename: Roche
• concentration: 1 mg/mL (Collagenase: 0.1U/mL, Dispase: 0.8U/mL)
• technique(s): tissue processing: suitable
• color: light yellow to brown
• optimum pH: 7.0-8.0
• solubility: water: soluble
• UniProt accession no.: P43154
• application(s): life science and biopharma; sample preparation
• foreign activity: proteolytic activities <0.1 U/mg (hemoglobin as the substrate)
• storage temp.: 2-8°C

Beschreibung

General description

Dispase ist eine neutrale, schnell wirkende, sanfte Protease, die die intakte Epidermis von der Dermis trennt. Außerdem trennt sie intakte kultivierte Epithelzellen von der Trägerschicht (Substratum). Sie spaltet die Basalmembranzone und die Epithelzellen bleiben intakt.[1] Collagenase ist eine Protease, die das Dreifachhelix-Protein Collagen spaltet. Es gibt drei Arten von Gewebecollagenasen, die zur Familie der Matrix-Metallproteinasen (MMP) gehören.[2] Collagenase aus Clostridium histolyticum weist eine sehr starke Aktivität auf, da es Collagen von beiden Enden bei Temperaturen von nur 4-10 °C verdaut.[3]

Application

Collagenase/Dispase^® wird zur Präparation von Zellen aus vielen verschiedenen Geweben und Organen verwendet.[4][5][6]

Biochem/physiol Actions

Collagenase baut natives Collagen ab. Dispase^® ist eine unspezifische Protease.

Preparation Note

Aktivator: Ca²⁺

Arbeitskonzentration: Ca. 1 mg/ml (Collagenase: 0,1 U/ml, Dispase: 0,8 U/ml)

Enzymaktivität:
Collagenase: 0,1 U/mg (nach Wünsch) Lyophilisat (+25 °C, 4-Phenyl-azobenzyl-oxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg als Substrat)
Dispase^®: 0,8 U/mg (nach Wünsch) Lyophilisat (+37 °C, Casein als Substrat, pH 7,5)
Kontaminierende proteolytischen Aktivitäten: <0,1 U/mg Lyophilisat (Hämoglobin als Substrat)

Arbeitslösung: Vorbereitung der Arbeitslösung Enzym in Wasser lösen, auf eine Endkonzentration von 100 mg/ml. Mit PBS (Ca²⁺/Mg²⁺-frei) auf eine Endkonzentration von 1 mg/ml verdünnen und durch einen sterilen 0,2-μm-Membranfilter filtrieren.
Enzymkonzentration der sterilen Lösung: Collagenase, 0,1 U/ml PBS; Dispase^®, 0,8 U/ml PBS.

Inhibitoren:
Collagenase-Inhibitoren: EDTA, EGTA
Collagenase/Dispase wird durch Serum nicht gehemmt.

Lagerbedingungen (Arbeitslösung): -15 bis -25 °C
Die rekonstituierte Lösung ist bei -15 bis -25 °C stabil.
Hinweis: In geeigneten Aliquoten aufbewahren und wiederholtes Einfrieren und Auftauen vermeiden.

Rekonstitution in Wasser (100 mg/ml). Weiter Verdünnung mit PBS (phosphatgepufferter Kochsalzlösung) (Ca²⁺/Mg²⁺-frei).

Trocken lagern

Other Notes

Collagenase aus Vibrio alginolyticus, Dispase^® aus Bacillus polymyxa

EC 3.4.24.4 & 3.4.24.3

Eine Einheit ist die Enzymaktivität, die unter Assaybedingungen innerhalb von einer Minute Folin-positive Aminosäuren und Peptide freisetzt, die 1 μmol Tyrosin entsprechen.

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Legal Information

Dispase is a registered trademark of Godo Shusei Co., Ltd.

Sicherheitshinweise

• pictograms: GHS07,GHS08
• signalword: Danger
• pcodes: P261 - P264 - P280 - P284 - P304 + P340 + P312 - P342 + P311
• Hazard Classifications: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• target_organs: Respiratory system
• Lagerklasse: 11 - Combustible Solids
• wgk: WGK 1
• flash_point_f: does not flash
• flash_point_c: does not flash
• hcodes: H315,H319,H334,H335