Endoproteinase Glu-C, Sequenzierqualität

Name: Endoproteinase Glu-C, Sequenzierqualität
Brand: ROCHE

from Staphylococcus aureus V8

Synonym(e):

Protease

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Über diesen Artikel

UNSPSC Code:

12352204

EG-Nummer:

3.4.21.19 (BRENDA, IUBMB)

NACRES:

NA.54

Specific activity:

≥15 units/mg protein

Biological source:

Staphylococcus aureus (V8)

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Eigenschaften

biological source

Staphylococcus aureus (V8)

form

lyophilized (salt-free), lyophilized

specific activity

≥15 units/mg protein

mol wt

M_r 27 kDa

packaging

pkg of 3 × 50 μg (11047817001), pkg of 50 μg (11420399001)

manufacturer/tradename

Roche

optimum pH

4.0-7.8

storage temp.

2-8°C

Beschreibung

General description

Endoproteinase Glu-C in Sequenzierqualität ist eine Serinprotease, die aus Staphylococcus aureus V8 als hochreine und spezifische Protease isoliert wird. Endoproteinase Glu-C wird durch DFP, α2-Macroglobulin und TLCK gehemmt.

Application

Verwenden Sie Endoproteinase Glu-C in Sequenzierqualität zur Proteinstrukturanalyse und zur Sequenzanalyse.

Biochem/physiol Actions

Serinprotease, die ganz spezifisch Peptidbindungen auf der Carboxyl-Seite von Glu (in Ammoniumbicarbonat, pH 7,8, oder Ammoniumacetatpuffer, pH 4,0) oder Glu und Asp (in Phosphatpuffer, pH 7,8) hydrolysiert. Die Spezifität der Endoproteinase Glu-C in Sequenzierqualität wird mit der oxidierten B-Kette von Insulin (Insulin B_ox) als Substrat verifiziert. Hohe Konzentrationen von Endoproteinase Glu-C in Sequenzierqualität (1 Gewichtsteil Enzym und 10 Gewichtsteile Insulin B_ox) werden inkubiert, um Spuren von Verunreinigungen, wie z. B. kontaminierende Proteasen, nachzuweisen.
Hitzeinaktivierung: Die meisten Proteasen in Sequenzierqualität werden durch 5-minütiges Sieden gestoppt.

Features and Benefits

Frei von Verunreinigungen, die mit der Separation von Peptiden in der RP-HPLC interferieren können.

Preparation Note

Arbeitskonzentration: 1/100 bis 1/20 (w/w)
Mit einer Mindestmenge von 1 bis 5 μg Insulin B_ox, können ausreichende Mengen mit der Säule Aquapore RUP 300, 4,6 x 100 nm, 7 μm nachgewiesen werden.
Arbeitslösung: Als Lösungsmittel wird bidestilliertes Wasser empfohlen.
Andere Lösungsmittel außer Wasser wurden noch nicht getestet; Roche empfiehlt die Verwendung von 50 mM Hepes, pH 7,8.
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): 1-2 Tage bei +2 °C bis +8 °C.
Stabilität: Innerhalb des spezifizierten Bereichs 12 Monate bei +2 bis +8 °C; trocken gelagert.

Lyophilisierte Endoproteinase Glu-C in Sequenzierqualität wird in bidestilliertem Wasser rekonstituiert. Um eine Autolyse zu vermeiden, sollte die Inkubationstemperatur 25 °C nicht überschreiten.