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biological source
Bacillus polymyxa (dispase), Bacillus sp. (thermolysin - Bacillus thermoproteolyticus), Clostridium histolyticum (collagenase)
description
high Thermolysin concentration
form
lyophilized
packaging
pkg of 10 mg (05401135001 [2 x 5 mg]), pkg of 100 mg (05401151001 [2 x 50 mg])
manufacturer/tradename
Roche
parameter
35-37 °C optimum reaction temp.
technique(s)
tissue processing: suitable
optimum pH
7.4
storage temp.
−20°C
Verwandte Kategorien
1 of 4
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|---|---|---|---|
| technique(s) tissue processing: suitable | technique(s) single cell analysis: suitable, tissue processing: suitable | technique(s) activity assay: suitable | technique(s) tissue processing: suitable |
| biological source Bacillus polymyxa (dispase), Clostridium histolyticum (collagenase), Bacillus sp. (thermolysin - Bacillus thermoproteolyticus) | biological source - | biological source enzyme from Bacillus polymyxa (Protease), enzyme from Clostridium histolyticum (collagenase) | biological source Bacillus polymyxa (dispase), Bacillus sp. (thermolysin - Bacillus thermoproteolyticus), Clostridium histolyticum (collagenase) |
| form lyophilized | form lyophilized | form lyophilized | form lyophilized |
| optimum pH 7.4 | optimum pH 7.4 | optimum pH 7.4 | optimum pH 7.4 |
| storage temp. −20°C | storage temp. −20°C | storage temp. −20°C | storage temp. - |
| manufacturer/tradename Roche | manufacturer/tradename Roche | manufacturer/tradename Roche | manufacturer/tradename Roche |
General description
Application
Features and Benefits
- Maximale Ausbeute und Lebensfähigkeit isolierter Zellen
- Höhere spezifische Aktivität der Enzymmischung
- Höhere Versuchsreproduzierbarkeit
- Erhöhte Sicherheit
Preparation Note
Arbeitskonzentration: Arbeitskonzentration für Liberase-Enzyme in Forschungsqualität:
Liberase-Enzyme verfügen über eine signifikant höhere spezifische Aktivität als herkömmliche Collagenasen. Dies bedeutet, dass die Arbeitskonzentration der aufgereinigten Liberase-Enzyme in Forschungsqualität, in mg/ml angegeben, geringer ist als die von herkömmlichen Collagenasen.
Wenn die Anwendung auf der Liste der Anwendungen von Roche unter www.collagenase.com enthalten ist, verwenden Sie die für diese Anwendung empfohlene Konzentration von Liberase-Enzymen in Forschungsqualität.
Wenn die Anwendung nicht in der Liste aufgeführt ist, verwenden Sie Liberase TM in Forschungsqualität zunächst in einer Konzentration von 0,08–0,28 Wünsch-Einheiten/ml.
Ziel ist es, die beste Startkonzentration der Liberase-Enzymmischungen zu bestimmen. Dies ist der Ausgangspunkt. Die endgültige Konzentration kann in Abhängigkeit von Verfahrens- und Chargenunterschieden bei herkömmlichen Collagenasen variieren.
Collagenase-Arbeitskonzentration
Multiplizieren Sie Ihre vorherige Collagenase-Arbeitskonzentration (mg/ml) mit ihrer spezifischen Aktivität (Wünsch-Einheiten/mg, [wie oben bestimmt]), um Wünsch-Einheiten/ml zu erhalten. Zur Bestimmung des erforderlichen Volumens an Liberase-Enzymmischung in Forschungsqualität multiplizieren Sie zuerst Ihre Collagenase-Arbeitskonzentration (in Wünsch-Einheiten/ml) mit dem Gesamtvolumen Ihrer Enzym-Arbeitslösung, um die erforderliche Gesamtaktivität der Collagenase zu ermitteln (Wünsch-Einheiten). Dividieren Sie dann die erforderliche Gesamtaktivität der Collagenase durch die Konzentration der Liberase-Stammlösung („Rekonstituierung und Lagerung“). Das Ergebnis gibt an, wie viele Milliliter Stammlösung der Liberase-Enzymmischung in Forschungsqualität für Ihre Enzym-Arbeitslösung verwendet werden müssen.
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): Bewahren Sie nicht verwendete Stammlösung in Aliquoten für den Einmalgebrauch bei -15 bis -25 °C auf. Weitere Informationen zur Produktstabilität finden Sie auf der Roche Liberase-Enzym-Website unter www.collagenase.com.
Hinweis: Wiederholtes Einfrieren und Auftauen ist zu vermeiden.
Rekonstituieren Sie den gesamten Inhalt des Fläschchens. Wiegen Sie keine Einzelportionen des Lyophilisats ab. Wenn Feuchtigkeit in das Fläschchen gelangt, verringert sich die Enzymaktivität.
Bewahren Sie das Fläschchen während der Rehydrierung des lyophilisierten Enzyms auf Eis auf.
Schütteln Sie das Fläschchen vorsichtig bei 2 bis 8 °C, bis sich das Enzym vollständig aufgelöst hat (max. 30 min).
Je nach Gewebedissoziationspuffer, der zum Auflösen gereinigter Liberase-Enzymmischungen in Forschungsqualität verwendet wird, sind ggf. geringfügige Ausfällungen sichtbar, die sich in der verdünnten Arbeitslösung leicht auflösen und die Enzymaktivität nicht beeinflussen.
Entnehmen Sie ein Aliquot der Stammlösung, um die Arbeitslösung herzustellen.
Rekonstituierungsvolumen
2 ml (1 Fläschchen mit 5 mg–10 mg), 10 ml (1 Fläschchen mit 50 mg–100 mg)
Collagenase Wünsch (Einheiten/ml)
13 (1 Fläschchen mit 5 mg–10 mg), 26 (1 Fläschchen mit 50 mg–100 mg)
Gesamtkonzentration Collagenase [mg/ml]
2,5 (1 Fläschchen mit 5 mg–10 mg) 5,0 (1 Fläschchen mit 50 mg–100 mg)
Other Notes
Legal Information
signalword
Danger
Hazard Classifications
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
target_organs
Respiratory system
Lagerklasse
11 - Combustible Solids
wgk
WGK 1
flash_point_f
does not flash
flash_point_c
does not flash
hcodes
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Protokolle
Liberase Enzyme Blend selection depends on tissue dissociation protocol and success with collagenase.
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