ROANNV

Annexin-V-FLUOS Färbekit

sufficient for 50 tests (11858777001), sufficient for 250 tests (11988549001), kit of 1 (3 components), suitable for cell analysis

• UNSPSC Code: 12352200

Eigenschaften

• usage: sufficient for 250 tests (11988549001), sufficient for 50 tests (11858777001)
• packaging: kit of 1 (3 components)
• manufacturer/tradename: Roche
• application(s): cell analysis
• shipped in: wet ice
• storage temp.: 2-8°C

Beschreibung

General description

In den frühen Phasen der Apoptose treten Veränderungen auf der Zelloberfläche auf. Eine diese Veränderungen der Plasmamembran ist die Translokation von Phosphatidylserin (PS) von der Innenseite der Plasmamembran auf die Außenseite, wodurch PS auf der Zelloberfläche exponiert wird. Makrophagen erkennen das auf der Zelloberfläche von Lymphozyten präsentierte PS spezifisch während der Entwicklung der Apoptose. Die Erkennung und Phagozytose von apoptotischen Zellen und Körperchen schützt den Organismus vor der Exposition gegenüber zellulären Substanzen, die zu einer Entzündung führen, wie sie normalerweise mit einer Nekrose einhergeht. Annexin V ist ein 35,8 kDa, Ca²⁺ -abhängiges Phospholipid-bindendes Protein mit einer hohen Affinität zu PS. Deshalb ist markiertes Annexin ein ausgezeichnetes Nachweismittel.

Nachweis: Annexin-V-FLUOS kann direkt durch FACS-Analyse und Immunchemie ohne zweites Nachweissystem detektiert werden.

Probenmaterial: Zelllinien und frisch isolierte Zellen.

Kit mit FLUOS-konjugiertem Annexin V und Propidiumiodid für den Nachweis und die Quantifizierung der Apoptose und die Differenzierung gegenüber der Nekrose auf Einzelzellebene.

Application

Markiertes Annexin V mit seiner hohen Phosphatidylserinaffinität (PS) ist eine sensitive Sonde für das auf der Außenseite der apoptotischen Zellen präsentierte PS. Da nekrotische Zellen ebenfalls PS als Folge des Verlusts der Membranintegrität präsentieren, wird Propidiumiodid als DNA-Färbemittel für die Unterscheidung zwischen nekrotischen Zellen und Annexin-V-markierten Zellaggregaten eingesetzt. Auch andere Sekundärmarkierungen sind möglich, wie die Membranoberflächenfärbung mit Phycoerythrin- oder TRITC-markierten monoklonalen Antikörpern für die weitere zelluläre Charakterisierung.

Biochem/physiol Actions

Annexin-V-FLUOS bindet Ca²⁺-abhängig an negativ geladene Phospholipidoberflächen und weist eine hohe Phosphatidylserinspezifität auf. Deshalb färbt es sowohl apoptotische als auch nekrotische Zellen. Propidiumiodid färbt nur die DNA leckender nekrotischer Zellen und ermöglicht die Unterscheidung zwischen apoptotischen und nekrotischen Zellen.

Packaging

1 Kit mit 3 Komponenten

Preparation Note

Arbeitslösung: 20 μl Annexin-V-FLUOS Markierungsreagens in 1 ml Inkubationspuffer vorverdünnen und 20 μl Propidiumiodidlösung hinzufügen.
Hinweis: 1 ml ist ausreichend für 10 Proben
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): Die verdünnte Färbelösung sollte immer frisch zubereitet werden.

Other Notes

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Nur Kit-Komponenten

• Annexin-V-FLUOS Solution ready-to-use
• Propidium iodide solution ready-to-use
• Incubation Buffer (HEPES Buffer) ready-to-use

Sicherheitshinweise

• Piktogramme: GHS07
• Signalwort: Warning
• Gefahrencodes: H317
• Sicherheitshinweise: P261 - P272 - P280 - P333 + P313 - P362 + P364 - P501
• Hazard Classifications: Skin Sens. 1
• Lagerklasse: 12 - Non Combustible Liquids
• Was ist los?: WGK 1
• Flammpunkt (°C): does not flash
• Flammpunkt (°F): does not flash