biological source
Escherichia coli (HB101)
assay
100% (SDS-PAGE)
form
solution
specific activity
≥20 U/μL
mol wt
100 kDa (single polypeptide chain)
packaging
pkg of 1,000 U (11031163001), pkg of 5,000 U (11031171001)
manufacturer/tradename
Roche
concentration
<0.1 % (w/w)
technique(s)
DNA sequencing: suitable, Northern blotting: suitable, Southern blotting: suitable, hybridization: suitable
color
colorless
pH
7.9 (39 °F), 8.0 (68 °F)
solubility
water: miscible
suitability
suitable for molecular biology
NCBI accession no.
UniProt accession no.
application(s)
genomic analysis
life science and biopharma
foreign activity
Nicking activity 150 units, none detected, RNases 150 units, endonucleases 150 units, none detected
storage temp.
−20°C
Gene Information
Escherichia coli ... rpoB(948488)
General description
Mit diesem Enzym kann homogen markierte Einzelstrang-RNA hergestellt werden. Transkripte können nicht-radioaktiv mit Biotin oder DIG-11-UTP bzw. radioaktiv bis zu einer hochspezifischen Aktivität mit [α-32P]- oder [α-35S]-markierten Nukleotiden markiert werden. T3-RNA-Polymerase ist eine DNA-abhängige RNA-Polymerase mit hoher Promotor-Spezifität. Nur DNA hinter dem T3-Promotor wird transkribiert.
Application
T3-RNA-Polymerase kann RNA von hinter einem T3-Promotor klonierten DNA-Templates transkribieren. Die Synthese kann mit markierten NTPs durchgeführt werden, um hochmarkierte RNA herzustellen. Synthetisierte RNA kann in vielen Anwendungen eingesetzt werden, einschließlich:
- RNA- oder DNA-Blotting-Techniken
- In-situ-Hybridisierung
- RNase-Schutz-Untersuchungen: Durch das Enzym synthetisierte Transkripte werden als Vorläufer-RNA zum Untersuchen von RNA-Splicing und -Prozessierung verwendet.
- Synthese von RNA mit Cap-Struktur in vitro unter Zugabe von m7GpppG oder m7GpppA über GTP oder ATP während der Transkriptionsreaktion. Die generierte Antisense-RNA kann in Zellen eingeführt werden, um die Expression der entsprechenden Gene zu unterdrücken.
Biochem/physiol Actions
Promotorspezifität
T3-RNA-Polymerase ist extrem promotorspezifisch und transkribiert nur Bakteriophage-T3-DNA oder hinter einem T3-Promotor klonierte DNA.
Hitzeinaktivierung: Die Reaktion wird durch Zugabe von 2 μl 0,2 M EDTA (pH 8,0) und/oder Erwärmung auf 65 °C gestoppt.
T3-RNA-Polymerase ist extrem promotorspezifisch und transkribiert nur Bakteriophage-T3-DNA oder hinter einem T3-Promotor klonierte DNA.
Hitzeinaktivierung: Die Reaktion wird durch Zugabe von 2 μl 0,2 M EDTA (pH 8,0) und/oder Erwärmung auf 65 °C gestoppt.
Features and Benefits
Volumenaktivität: = 20 U/μl
Synthese von Hybridisierungssonden: T3-RNA-Polymerase ermöglicht die hocheffiziente Produktion von homogen markierter RNA. Diese markierte RNA kann als Hybridisierungssonden in Southern, Northern und Dot Blots sowie In-situ-Hybridisierungen verwendet werden.
Geeignete Markierungen: Transkripte können nicht-radioaktiv mit Biotin-16-UTP, DIG-11-UTP oder Fluorescein-12-UTP markiert werden. Sie können auch radioaktiv bis zu einer hochspezifischen Aktivität mit [a-32P]- oder [a-35S]-markierten Nukleotiden markiert werden.
Hinweis: Roche hat 10x konzentrierte RNA-Markierungsmischungen, die spezifisch für die DIG-, Biotin- oder Fluorescein-Markierung konzipiert wurden. Diese Mischungen funktionieren gut mit T3-RNA-Polymerase.
Synthese von Hybridisierungssonden: T3-RNA-Polymerase ermöglicht die hocheffiziente Produktion von homogen markierter RNA. Diese markierte RNA kann als Hybridisierungssonden in Southern, Northern und Dot Blots sowie In-situ-Hybridisierungen verwendet werden.
Geeignete Markierungen: Transkripte können nicht-radioaktiv mit Biotin-16-UTP, DIG-11-UTP oder Fluorescein-12-UTP markiert werden. Sie können auch radioaktiv bis zu einer hochspezifischen Aktivität mit [a-32P]- oder [a-35S]-markierten Nukleotiden markiert werden.
Hinweis: Roche hat 10x konzentrierte RNA-Markierungsmischungen, die spezifisch für die DIG-, Biotin- oder Fluorescein-Markierung konzipiert wurden. Diese Mischungen funktionieren gut mit T3-RNA-Polymerase.
Packaging
1 Kit mit 2 Komponenten
Preparation Note
Aktivator: BSA/Spermin
Behälter dicht verschlossen an einem trockenen und gut belüfteten Ort aufbewahren.
Analysis Note
Nach Maßgabe der aktuellen Qualitätskontrollverfahren frei von Endonuklease, Nicking-Aktivität und RNasen. Funktionstest mit dem SP6/T7-Transkriptions-Kit.
Other Notes
Eine Einheit ist die Enzymaktivität, die 1 nmol CMP innerhalb von 60 Minuten bei +37 °C in säurefällbare RNA einbaut.
Volumenaktivität: ≥20 U/μl
Volumenaktivität: ≥20 U/μl
Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht für den Einsatz in diagnostischen Verfahren geeignet.
Nur Kit-Komponenten
Produkt-Nr.
Beschreibung
- T3 RNA Polymerase, in buffer, pH 7.9 ≥20 U/μl
- Transcription Buffer 10x concentrated
Signalwort
Warning
Lagerklasse
12 - Non Combustible Liquids
Was ist los?
WGK 2
Flammpunkt (°F)
does not flash
Flammpunkt (°C)
does not flash
Gefahrencodes
Sicherheitshinweise
Hazard Classifications
Eye Irrit. 2 - Skin Sens. 1
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