TRYPSEQM-RO

modifiziertes Trypsin in Sequenzierqualität

from bovine pancreas

• Synonym(e): Trypsin
• UNSPSC Code: 12352204
• EG-Nummer: 3.4.21.4 (BRENDA, IUBMB)
• NACRES: NA.54
• Biological source: bovine pancreas
• Concentration: 0.01-0.2 % (w/w)

Eigenschaften

• biological source: bovine pancreas
• form: lyophilized (salt-free)
• mol wt: 24.000 g/mol
• packaging: pkg of 4 × 100 μg (11418033001), pkg of 4 × 25 μg (11418025001)
• manufacturer/tradename: Roche
• storage condition: (Keep container tightly closed in a dry and well-ventilated place.)
• concentration: 0.01-0.2 % (w/w)
• technique(s): protein sequencing: suitable
• impurities: Chymotrypsin
• color: white
• optimum pH: 8.0
• solubility: 10 g/L
• suitability: suitable for protein modification
• UniProt accession no.: P00760
• application(s): life science and biopharma
• foreign activity: Contaminating activities corresponds; Chymotrypsin , contains
• storage temp.: 2-8°C
• Gene Information: cow ... PRSS1(780933)

Beschreibung

General description

Modifiziertes Trypsin, Sequenzierungsqualität, wird als hochgereinigte und spezifische Protease aus dem Rinderpankreas isoliert und anschließend modifiziert.

Trypsin ist eine hocheffiziente und spezifische Protease, die in der Proteomik häufig für den Proteinverdau verwendet wird. Es produziert kurze Peptide mit spezifischen Eigenschaften, die mit aktuellen Trennungs- und Identifizierungsmethoden[1] wie Flüssigkeitschromatographie und Massenspektrometrie (MS) kompatibel sind.[2]

Inhibitoren: TLCK, DFP, PMSF, Leupeptin, Sojabohnen-Trypsin-Inhibitor, Trypsin-Inhibitor von Hühnereiern, Aprotinin, α2-Makroglobulin, α1-Antitrypsin, APMSF und Antipain.

Application

Verwenden Sie die modifiziertes Trypsin, Sequenzierungsqualität, zur Erzeugung von Glykopeptiden aus gereinigten Glykoproteinen.
Anwendungsgebiete:

• Aufklärung der Proteinstruktur
• Tryptisches Mapping
• Fingerprinting-Analyse
• Sequenzanalyse
• Translokationsstudien
• Proteinidentifikation[3][4][5][6]
• Proteinverdau während der Lipoproteinvorbereitung für die Flüssigkeitschromatographie-Tandem-Massenspektrometrie (LC-MS/MS)

Biochem/physiol Actions

Trypsin ist eine Serin-Endopeptidase. Mit einem pH-Wert von 7,5-9 hydrolisiert es insbesondere Proteine und Peptidbindungen auf der C-terminalen Seite von Lysin und Arginin. Außerdem werden Amide und Esterbindungen von Arg und Lys gespalten. Die Spezifität des modifizierten Trypsins in Sequenzierqualität wird mit der oxidierten B-Kette von Insulin (Insulin B_ox) als Substrat verifiziert. Hohe Konzentrationen von modifiziertem Trypsin in Sequenzierqualität (1 Gewichtsteil Enzym und 9 Gewichtsteile Insulin B_ox) werden 18 Stunden lang inkubiert, um Spuren von Verunreinigungen durch Chymotrypsin nachzuweisen.

Preparation Note

Arbeitskonzentration: 1/100 bis 1/5 des Proteins, bezogen auf das Gewicht
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): -15 bis -25 °C
modifiziertes Trypsin in Sequenzierqualität ist selbst bei pH-Werten im neutralen und niedrigen Basisbereich gegenüber einer Autolyse beständiger. Das Enzym eignet sich zur Verwendung in hohen Konzentrationen.
Eine Lösung in 1 % Essigsäure oder 1 mM HCI kann bei einer Lagerung bei 2 bis 8 °C bis zu einer Woche lang verwendet werden. Bei einer Lagerung in Aliquoten bei -15 bis -25 °C ist die Lösung ohne Wirkungseinbußen mindestens ein Jahr lang stabil.

Trocken lagern

Analysis Note

Reinheit: Frei von Verunreinigungen, welche die Separation von Peptiden in der Umkehrphasen-HPLC beeinträchtigen können.

Other Notes

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Sicherheitshinweise

• pictograms: GHS07,GHS08
• signalword: Danger
• pcodes: P261 - P264 - P280 - P284 - P304 + P340 + P312 - P342 + P311
• Hazard Classifications: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• target_organs: Respiratory system
• Lagerklasse: 11 - Combustible Solids
• wgk: WGK 1
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable
• hcodes: H315,H319,H334,H335