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C2139

Collagenase aus Clostridium histolyticum

suitable for release of rat epididymal adipocytes and hepatocytes (for methodology see Type II and Type IV), Type VIII, 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid, ≥125 CDU/mg solid

Collagenase from Clostridium histolyticum

Synonym(e):

Clostridiopeptidase A

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Über diesen Artikel

CAS-Nummer:
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.54
EC Number:
232-582-9
MDL number:
EG-Nummer:
Specific activity:
≥125 CDU/mg solid, 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid
Biological source:
Clostridium histolyticum

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biological source

Clostridium histolyticum

Quality Level

type

Type VIII

form

powder

specific activity

≥125 CDU/mg solid, 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid

mol wt

68-125 kDa

suitability

suitable for release of rat epididymal adipocytes and hepatocytes (for methodology see Type II and Type IV)

application(s)

diagnostic assay manufacturing

storage temp.

−20°C

General description

Clostridium histolyticum ist ein Pathogen, das Rohcollagenasen erzeugt. Diese Enzymmischung enthält Collagenase, unspezifische Proteasen und Clostripain.[1]

Application

Collagenase kann verwendet werden:[1]
  • zur Präparation von Arteriengewebe für die Untersuchung auf fortgeschrittene Glycosylierungsendprodukte (AGE)
  • zusammen mit anderen Proteasen zur Disaggregation von menschlichem Tumorgewebe, Mäusenieren, menschlichem Hirngewebe, Lungenepithel und vielen anderen Geweben.
  • in Leber- und Nierenperfusionsstudien, beim Pankreasverdau und bei der Isolierung von nicht-parenchymalen Leberzellen.
  • zur Präparation lebensfähiger Rattenhepatozyten und zur Isolierung von Fettzellen aus adipösem Rattengewebe

Biochem/physiol Actions

Collagenase wird durch vier Grammatom Calcium pro Mol Enzym aktiviert. Sie wird durch Ethylenglycol-bis-(beta-aminoethylether)-N, N, N′,N′-tetraessigsäure, β-Mercaptoethanol, Glutathion, Thioglycolsäure und 8-Hydroxychinolin gehemmt.
Collagenase wird durch vier Grammatom Calcium pro Mol Enzym aktiviert. Sie wird durch Ethylenglycol-bis(β-aminoethylether) - N, N, N′,N′-tetraessigsäure, β-Mercaptoethanol, Glutathion, Thioglycolsäure und 8-Hydroxychinolin gehemmt. Collagenase-Enzyme und neutrale Protease spielen eine wichtige Rolle bei der effektiven Freisetzung von Zellen aus Gewebe. Collagenase erkennt die Sequenz -R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-, wobei X eine neutrale Aminosäure repräsentiert.

Analysis Note

Enthält außerdem Clostripain, unspezifische neutrale Protease und tryptische Aktivitäten.

Other Notes

Eine Collagen-Aufschlusseinheit (Collagen Digestion Unit, CDU) setzt Peptide aus Rinder-Achillessehnencollagen entsprechend der Ninhydrin-Anfärbung von 1,0 μmol Leucin in 5 Stunden bei pH 7,4 und 37 °C in Gegenwart von Calciumionen frei. Eine FALGPA-Hydrolyseeinheit hydrolysiert 1,0 μmol Furylacryloyl-Leu-Gly-Pro-Ala pro Minute bei 25 °C. Eine neutrale Protease-Einheit hydrolysiert die Caseinmenge, die eine Färbung entsprechend 1,0 μmol Tyrosin pro 5 Stunden bei pH 7,5 und 37 °C produziert. Eine Clostripain-Einheit hydrolysiert 1,0 μmol BAEE pro Minute bei pH 7,6 und 25 °C in Gegenwart von DTT.

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Clostridium histolyticum

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≥125 CDU/mg solid, 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid

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≥125 CDU/mg solid, 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid

specific activity

≥125 CDU/mg solid, 0.5-5.0 FALGPA units/mg solid

specific activity

≥1 FALGPA units/mg solid, >125 CDU/mg solid

suitability

suitable for release of rat epididymal adipocytes and hepatocytes (for methodology see Type II and Type IV)

suitability

-

suitability

suitable for release of physiologically active rat hepatocytes

suitability

-

form

powder

form

powder

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powder

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powder

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diagnostic assay manufacturing

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diagnostic assay manufacturing

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diagnostic assay manufacturing

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diagnostic assay manufacturing

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Hazard Classifications

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Respiratory system

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WGK 1

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Not applicable

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dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves



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Protokolle

To measure collagenase activity, N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala is used in a continuous spectrophotometric rate determination at 345 nm. Collagenase hydrolyzes collagen peptide bonds.

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Ce Tang et al.
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Fleischer, S. and B. Fleischer
Methods in Enzymology, 192, 829-829 (1990)
Alan Moreira de Araujo et al.
Cells, 7(8) (2018-08-01)
Hepatocytes may rupture after a drug overdose, and their intracellular contents act as damage-associated molecular patterns (DAMPs) that lead to additional leukocyte infiltration, amplifying the original injury. Necrosis-derived DNA can be recognized as a DAMP, activating liver non-parenchymal cells (NPCs).



Global Trade Item Number

SKUGTIN
C2139-1G04061833475188
C2139-100MG04061833475171
C2139-500MG04061833475195
C2139-5G04061833475201

Questions

1–2 of 2 Questions  
  1. Can I use C2139 to make collagenase solution with medium, and then store it at -20?

    1 answer
    1. Yes, as mentioned in the product datasheet, the powder form should be stored at –20°C. Stock solutions may be prepared at 100 mg/mL in DMEM/F12 or other culture medium, and stored at –20°C in frozen aliquots. Avoid repeated freeze/thaw cycles. Please see the link below to review the product datasheet for additional information:
      https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/173/127/c2139pis.pdf

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  2. is C2139 sterile ?

    1 answer
    1. Product C2139 is not sterile.

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