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DUO92012

Duolink® In Situ Detection Reagents Brightfield

Synonym(e):

in situ Proximity Ligation Assay reagent, Protein Protein Interaction Assay reagent

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NACRES:
NA.32
UNSPSC Code:
12352200

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product line

Duolink®

packaging

pkg of Box A (-20°C), pkg of Box B (2-8°C)

technique(s)

proximity ligation assay: suitable

suitability

suitable for brightfield

storage temp.

−20°C

Application

Der Duolink®Proximity Ligation Assay (PLA®) ermöglicht die endogene Detektion von Protein-Interaktionen, posttranslationalen Modifikationen und Proteinexpressionswerten auf Einzelmolekülebene in fixierten Zellen und Gewebeproben.

Beachten Sie das Duolink®-In-situ-Hellfeldprotokoll zur Anwendung dieses Produkts.

Besuchen Sie unser Duolink®-PLA-Informationszentrum, wo Sie Anleitungen zur Durchführung von Duolink®-Versuchen, Anwendungen, Fehlerbehebungen und andere Sachverhalten finden.

Zur Durchführung eines kompletten Duolink®-PLA-In-situ-Versuchs benötigen Sie zwei Primärantikörper (PLA-, IHC-, ICC- oder IF-validiert), die zwei Zielepitope erkennen. Andere benötigte Reagenzien sind ein Paar PLA-Sonden von verschiedenen Spezies (eine PLUS und eine MINUS), Detektionsreagenzien, Waschpuffer und Eindeckmittel. Beachten Sie bitte, dass die Primärantikörper von den gleichen Spezies stammen müssen wie die Duolink®-PLA-Sonden. Die Analyse wird mit HRP zur Detektion im Hellfeld durchgeführt.

Spezifität
Hellfeld-Detektionsreagenzien werden für Proben mit starker Autofluoreszenz eingesetzt.

Anwendungshinweis
Es werden zwei Primärantikörper aus unterschiedlichen Spezies benötigt. Testen Sie Ihre Primärantikörper (IgG-Klasse, monoklonal oder polyklonal) in einem gebräuchlichen Immunfluoreszenz- (IF), immunhistochemischen (IHC) oder immunzytochemischen (ICC) Assay, um die optimalen Fixierungs-, Blockierungs- und Titerbedingungen zu bestimmen. Duolink®-In-situ-Reagenzien sind zur Anwendung auf fixierten Zellen, Zytospin-Zellen, auf Objektträgern gewachsenen Zellen, formalinfixierten Paraffinschnitten (FFPE) oder Gewebeschnitten (frisch oder gefroren) geeignet. Es ist keine minimale Zellzahl erforderlich.

Wir können Ihnen Arbeit abnehmen! Informieren Sie sich über unser kundenspezifisches Serviceprogramm zur Beschleunigung Ihrer Duolink®-Projekte

Vollständige Duolink®-Produktliste
Spezifität
Hellfeld-Nachweisreagenzien werden für Proben mit deutlicher Autofluoreszenz verwendet.

Anwendungshinweis
Es werden zwei Primärantikörper aus unterschiedlichen Spezies benötigt. Testen Sie Ihre Primärantikörper (IgG-Klasse, monoklonal oder polyklonal) in einem gebräuchlichen Immunfluoreszenz-(IF-), immunhistochemischen (IHC-) oder immunzytochemischen (ICC-)Assay, um die optimalen Fixierungs-, Blockierungs- und Titerbedingungen zu bestimmen. Duolink®-In-situ-Reagenzien sind zur Anwendung auf fixierten Zellen, Zytospin-Zellen, auf Objektträgern gewachsenen Zellen, Formalin-fixierten Paraffinschnitten (FFPE) oder Gewebeschnitten (frisch oder gefroren) geeignet. Es ist keine Mindestanzahl von Zellen erforderlich.

Wir können Ihnen Arbeit abnehmen! lnformieren Sie sich über unser kundenspezifisches Serviceprogramm zur Beschleunigung der Duolink®-Projekte

Sehen Sie sich die vollständige Duolink®-Produktliste an

Features and Benefits

  • Keine Überexpression oder genetische Manipulation erforderlich
  • Hohe Spezifität (weniger falsch-positive Ergebnisse)
  • Einzelmolekül-Sensitivität durch RCA (Rolling-Circle-Amplifikation)
  • Relative Quantifizierung möglich
  • Keine Spezialgeräte erforderlich
  • Schneller und einfacher als FRET
  • Höhere Präzision als co-IP
  • Publikationsreife Ergebnisse

Other Notes

Lagerung und Stabilität
Box A und alle Komponenten bei -20 °C lagern. Die Enzyme müssen kontinuierlich eingefroren sein (-20 °C). Beim Entfernen aus dem Gefrierschrank einen Gefrierblock verwenden.
Box B und alle Komponenten bei 2–8 °C lagern.
Dieses Produkt besteht aus folgenden Komponenten:
Box A:
  • 5x Ligation - Enthält Oligonukleotide, die an die PLA-Sonden und alle für die Ligation benötigten Komponenten außer der Ligase hybridisieren
  • 1x Ligase (1 Einheit/μL)
  • 5x Amplifikation - Enthält alle Komponenten, die für die Rolling-Circle-Amplifikation (RCA) erforderlich sind, außer der Polymerase
  • 5x Hellfeld-Detektion - Enthält Oligonukleotid-Sonden, die mit Meerrettichperoxidase (HRP) markiert sind und an das RCA-Produkt hybridisieren
  • 1x Polymerase (10 Einheiten/μL)

Box B:
  • 1x Wasserstoffperoxid - Enthält 0,3 % Wasserstoffperoxid
  • Substrat-Reagenzien A–D - Enthalten alle für die enzymatischen Reaktionen von HRP benötigten Substratkomponenten
  • 1x Kernfärbung - Enthält Mayers Hämatoxylinlösung für die Zellkernfärbung
Weitere Informationen entnehmen Sie bitte dem Datenblatt.

Nicht im Detektionskit enthalten:

Primärantikörper, PLA-Sonden, Waschpuffer, Eindeckmittel

Legal Information

Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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suitable for fluorescence

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proximity ligation assay: suitable

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proximity ligation assay: suitable

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proximity ligation assay: suitable

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proximity ligation assay: suitable

storage temp.

−20°C

storage temp.

−20°C

storage temp.

20-25°C

storage temp.

−20°C

product line

Duolink®

product line

Duolink®

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Duolink®

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Duolink®

packaging

pkg of Box A (-20°C), pkg of Box B (2-8°C)

packaging

-

packaging

-

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-


Signalwort

Danger

Lagerklasse

3 - Flammable liquids

Flammpunkt (°F)

42.8 °F

Flammpunkt (°C)

6 °C

Was ist los?

WGK 3

Hazard Classifications

Acute Tox. 3 Dermal - Acute Tox. 4 Inhalation - Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 2 - ED ENV 1 - Eye Dam. 1 - Flam. Liq. 2 - Muta. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - Skin Sens. 1



Hier finden Sie alle aktuellen Versionen:

Analysenzertifikate (COA)

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Questions

1–3 of 3 Questions  
  1. What are the suitable stopping points in the Duolink PLA protocol that will not have a negative impact on the results?

    1 answer
    1. The Duolink® PLA protocol offers several stopping points, allowing samples to be left at various stages. For instance, after fixation, samples can be left in 1x PBS at 4 °C for several days. Additionally, blocking and primary antibody incubations can be run overnight. Once the procedure is finished, slides can be stored at different temperatures for varying durations based on the detection method used. It is important to note that the ligation and amplification conditions have been optimized and should not be altered, unless for specific applications where extra caution is necessary.

      Helpful?

  2. Is it possible to utilize Duolink® with PLA® Technology for whole mount or thick tissue samples?

    1 answer
    1. The Duolink® using PLA® Technology Product line has not been tested with whole mount samples.

      Helpful?

  3. I received 2 DuoLink kits, DUO92012A-100RXN and DUO92012B- 100RXN, each containing the kit component DUO82057 lot SLCN4945. One of the bottles of DUO82057 lot SLCN4945 is brown, while the other is black. Please provide troubleshooting assistance for this issue?

    1 answer
    1. The supplier has confirmed that the reagent is still suitable for use and that darkening over time is expected, with no impact on the quality or intensity of staining. The variation in coloration between the same lot is likely due to differences in the amount of time each reagent has been opened and exposed, leading to oxidation.

      Helpful?

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