The Duolink® PLA protocol offers several stopping points, allowing samples to be left at various stages. For instance, after fixation, samples can be left in 1x PBS at 4 °C for several days. Additionally, blocking and primary antibody incubations can be run overnight. Once the procedure is finished, slides can be stored at different temperatures for varying durations based on the detection method used. It is important to note that the ligation and amplification conditions have been optimized and should not be altered, unless for specific applications where extra caution is necessary.
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| Größe/SKU | Verfügbarkeit | Preis |
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Über diesen Artikel
product line
Duolink®
packaging
pkg of Box A (-20°C), pkg of Box B (2-8°C)
technique(s)
proximity ligation assay: suitable
suitability
suitable for brightfield
storage temp.
−20°C
Application
Beachten Sie das Duolink®-In-situ-Hellfeldprotokoll zur Anwendung dieses Produkts.
Besuchen Sie unser Duolink®-PLA-Informationszentrum, wo Sie Anleitungen zur Durchführung von Duolink®-Versuchen, Anwendungen, Fehlerbehebungen und andere Sachverhalten finden.
Zur Durchführung eines kompletten Duolink®-PLA-In-situ-Versuchs benötigen Sie zwei Primärantikörper (PLA-, IHC-, ICC- oder IF-validiert), die zwei Zielepitope erkennen. Andere benötigte Reagenzien sind ein Paar PLA-Sonden von verschiedenen Spezies (eine PLUS und eine MINUS), Detektionsreagenzien, Waschpuffer und Eindeckmittel. Beachten Sie bitte, dass die Primärantikörper von den gleichen Spezies stammen müssen wie die Duolink®-PLA-Sonden. Die Analyse wird mit HRP zur Detektion im Hellfeld durchgeführt.
Spezifität
Hellfeld-Detektionsreagenzien werden für Proben mit starker Autofluoreszenz eingesetzt.
Anwendungshinweis
Es werden zwei Primärantikörper aus unterschiedlichen Spezies benötigt. Testen Sie Ihre Primärantikörper (IgG-Klasse, monoklonal oder polyklonal) in einem gebräuchlichen Immunfluoreszenz- (IF), immunhistochemischen (IHC) oder immunzytochemischen (ICC) Assay, um die optimalen Fixierungs-, Blockierungs- und Titerbedingungen zu bestimmen. Duolink®-In-situ-Reagenzien sind zur Anwendung auf fixierten Zellen, Zytospin-Zellen, auf Objektträgern gewachsenen Zellen, formalinfixierten Paraffinschnitten (FFPE) oder Gewebeschnitten (frisch oder gefroren) geeignet. Es ist keine minimale Zellzahl erforderlich.
Wir können Ihnen Arbeit abnehmen! Informieren Sie sich über unser kundenspezifisches Serviceprogramm zur Beschleunigung Ihrer Duolink®-Projekte
Vollständige Duolink®-Produktliste
Hellfeld-Nachweisreagenzien werden für Proben mit deutlicher Autofluoreszenz verwendet.
Anwendungshinweis
Es werden zwei Primärantikörper aus unterschiedlichen Spezies benötigt. Testen Sie Ihre Primärantikörper (IgG-Klasse, monoklonal oder polyklonal) in einem gebräuchlichen Immunfluoreszenz-(IF-), immunhistochemischen (IHC-) oder immunzytochemischen (ICC-)Assay, um die optimalen Fixierungs-, Blockierungs- und Titerbedingungen zu bestimmen. Duolink®-In-situ-Reagenzien sind zur Anwendung auf fixierten Zellen, Zytospin-Zellen, auf Objektträgern gewachsenen Zellen, Formalin-fixierten Paraffinschnitten (FFPE) oder Gewebeschnitten (frisch oder gefroren) geeignet. Es ist keine Mindestanzahl von Zellen erforderlich.
Wir können Ihnen Arbeit abnehmen! lnformieren Sie sich über unser kundenspezifisches Serviceprogramm zur Beschleunigung der Duolink®-Projekte
Sehen Sie sich die vollständige Duolink®-Produktliste an
Features and Benefits
- Keine Überexpression oder genetische Manipulation erforderlich
- Hohe Spezifität (weniger falsch-positive Ergebnisse)
- Einzelmolekül-Sensitivität durch RCA (Rolling-Circle-Amplifikation)
- Relative Quantifizierung möglich
- Keine Spezialgeräte erforderlich
- Schneller und einfacher als FRET
- Höhere Präzision als co-IP
- Publikationsreife Ergebnisse
Other Notes
Box A und alle Komponenten bei -20 °C lagern. Die Enzyme müssen kontinuierlich eingefroren sein (-20 °C). Beim Entfernen aus dem Gefrierschrank einen Gefrierblock verwenden.
Box B und alle Komponenten bei 2–8 °C lagern.
Box A:
- 5x Ligation - Enthält Oligonukleotide, die an die PLA-Sonden und alle für die Ligation benötigten Komponenten außer der Ligase hybridisieren
- 1x Ligase (1 Einheit/μL)
- 5x Amplifikation - Enthält alle Komponenten, die für die Rolling-Circle-Amplifikation (RCA) erforderlich sind, außer der Polymerase
- 5x Hellfeld-Detektion - Enthält Oligonukleotid-Sonden, die mit Meerrettichperoxidase (HRP) markiert sind und an das RCA-Produkt hybridisieren
- 1x Polymerase (10 Einheiten/μL)
Box B:
- 1x Wasserstoffperoxid - Enthält 0,3 % Wasserstoffperoxid
- Substrat-Reagenzien A–D - Enthalten alle für die enzymatischen Reaktionen von HRP benötigten Substratkomponenten
- 1x Kernfärbung - Enthält Mayers Hämatoxylinlösung für die Zellkernfärbung
Nicht im Detektionskit enthalten:
Primärantikörper, PLA-Sonden, Waschpuffer, Eindeckmittel
Legal Information
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| description - | description - | description - | description - |
| suitability suitable for brightfield | suitability suitable for fluorescence | suitability suitable for brightfield | suitability suitable for fluorescence |
| technique(s) proximity ligation assay: suitable | technique(s) proximity ligation assay: suitable | technique(s) proximity ligation assay: suitable | technique(s) proximity ligation assay: suitable |
| storage temp. −20°C | storage temp. −20°C | storage temp. 20-25°C | storage temp. −20°C |
| product line Duolink® | product line Duolink® | product line Duolink® | product line Duolink® |
| packaging pkg of Box A (-20°C), pkg of Box B (2-8°C) | packaging - | packaging - | packaging - |
Signalwort
Danger
Lagerklasse
3 - Flammable liquids
Flammpunkt (°F)
42.8 °F
Flammpunkt (°C)
6 °C
Was ist los?
WGK 3
Sicherheitshinweise
Hazard Classifications
Acute Tox. 3 Dermal - Acute Tox. 4 Inhalation - Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 2 - ED ENV 1 - Eye Dam. 1 - Flam. Liq. 2 - Muta. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - Skin Sens. 1
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What are the suitable stopping points in the Duolink PLA protocol that will not have a negative impact on the results?
1 answer-
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Is it possible to utilize Duolink® with PLA® Technology for whole mount or thick tissue samples?
1 answer-
The Duolink® using PLA® Technology Product line has not been tested with whole mount samples.
Helpful?
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I received 2 DuoLink kits, DUO92012A-100RXN and DUO92012B- 100RXN, each containing the kit component DUO82057 lot SLCN4945. One of the bottles of DUO82057 lot SLCN4945 is brown, while the other is black. Please provide troubleshooting assistance for this issue?
1 answer-
The supplier has confirmed that the reagent is still suitable for use and that darkening over time is expected, with no impact on the quality or intensity of staining. The variation in coloration between the same lot is likely due to differences in the amount of time each reagent has been opened and exposed, leading to oxidation.
Helpful?
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