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Merck

H4502

Hexokinase aus Saccharomyces cerevisiae

Type F-300, lyophilized powder, ≥130 units/mg protein (biuret)

Synonym(e):

Hexokinase D, Hexokinase Typ IV, ATP:D-Hexose-6-phosphotransferase, Hexokinase aus Hefe

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Über diesen Artikel

CAS-Nummer:
UNSPSC Code:
12352204
eCl@ss:
32160410
EC Number:
232-611-5
NACRES:
NA.54
MDL number:
EG-Nummer:
Specific activity:
≥130 units/mg protein (biuret)
Biological source:
Saccharomyces cerevisiae
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biological source

Saccharomyces cerevisiae

Quality Level

type

Type F-300

form

lyophilized powder

specific activity

≥130 units/mg protein (biuret)

mol wt

110 kDa

purified by

crystallization

storage condition

(Keep container tightly closed in a dry and well-ventilated place)

color

white

anion traces

sulfate (SO42-): free

UniProt accession no.

foreign activity

ATPase, myokinase, glucose-6-phosphate dehydrogenase, 6-phosphogluconic dehydrogenase and phosphoglucose isomerase ≤0.01%

storage temp.

−20°C

Gene Information

bakers yeast ... HXK1(850614), HXK2(852639)

General description

Forschungsbereich: Zellsignalisierung

Das Hexokinase 1(HXK1)-Gen ist auf dem Saccharomyces cerevisiae-Chromosom VI lokalisiert. HXK1 wird in Säugetiergewebe universell exprimiert und kommt in Hirn, Erythrozyten, Lymphozyten und Fibroblasten reichlich vor.

Application

Hexokinase wird wie folgt verwendet:
  • für den Glucoseverdau zur Messung des Glucosegehalts in den Wurzel- und Stammproben von Quercus velutina
  • zur Behandlung einer ADP (Adenosindiphosphat)-Lösung zusammen mit D-Glucose zur Entfernung des kontaminierenden ATP (Adenosintriphosphat)
  • im aus 4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazinethansulfonsäure bestehenden Puffer (pH 7,5) für die ADP-[13CU]Glucosesynthese

Biochem/physiol Actions

Hexokinase katalysiert den geschwindigkeitsbestimmenden ersten Schritt der Glykolyse, der die Phosphorylierung von Glucose umfasst.
Katalysiert die Phosphorylierung von D-Hexose-Zuckern an der C6-Position unter Verwendung von ATP als Phosphatquelle.

Die Phosphorylierungsrate unterscheidet sich je nach den Hexosen (pH 7,5, 30 °C).
D-Fructose KM: 0,33 mM
D-Glucose KM: 0,12 mM
D-Mannose KM: 0,05 mM

Hefe-Hexokinase existiert als zwei ähnliche Isoformen, PI und PII (A und B), mit einem isoelektrischen Punkt von 5,25 bzw. 4.

Molekülmasse: ~ 54 kDa (Monomer)
~ 110 kDa (Dimer)
Optimaler pH-Wert: 7,5 bis 9,0
Extinktionskoeffizient: E1 % = 8,85 (PI) und 9,47 (PII) bei 280 nm

Aktivatoren: Hexokinase erfordert Mg2+-Ionen (KM = 2,6 mM) für die Aktivität. Hexokinase wird von Katecholaminen und damit verbundenen Verbindungen aktiviert.

Inhibitoren: Sorbose-1-Phosphat, Polyphosphate, 6-Deoxy-6-fluorglucose, 2-C-Hydroxymethylglucose, Xylose, Lyxose und thiolreaktive Verbindungen (Hg2+ und 4-Chlormercuribenzoat)

Physical form

Lyophilisiertes Pulver, das ca. 15 % Natriumcitrat enthält

Preparation Note

Mit Wasser oder Citratpuffer, pH 7,0, rekonstituieren. Studien haben eine ausgezeichnete Stabilität während des wiederholten Gefrierens und Auftauens über einen Mindestzeitraum von 30 Tagen nachgewiesen.

Analysis Note

Gemisch von Isoenzymen.

Other Notes

Eine Einheit phosphoryliert 1,0 μMol D-Glucose pro Minute bei einem pH-Wert von 7,6 und 25 °C.


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Lagerklasse

11 - Combustible Solids

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Eyeshields, Gloves, type N95 (US)



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Protokolle

Measure hexokinase activity using a continuous spectrophotometric rate-determination assay at 340 nm, catalyzing D-hexose sugar phosphorylation using ATP.

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