N2133

Neuraminidase aus Clostridium perfringens (C. welchii)

Type X, lyophilized powder, ≥50 units/mg protein (using 4MU-NANA)

• Synonym(e): Acyl-neuraminyl-Hydrolase, Receptor-destroying enzyme, Sialidase
• CAS-Nummer: 9001-67-6
• UNSPSC Code: 12352204
• NACRES: NA.54
• EC Number: 232-624-6
• MDL number: MFCD00131711
• EG-Nummer: 3.2.1.18 (BRENDA, IUBMB)
• Specific activity: ≥50 units/mg protein (using 4MU-NANA)

Eigenschaften

• type: Type X
• Quality Segment: 200
• form: lyophilized powder
• specific activity: ≥50 units/mg protein (using 4MU-NANA)
• storage temp.: −20°C
• Gene Information: Clostridium perfringens str. 13 ... nanI(988807)

Beschreibung

General description

Neuraminidase ist ein Glycosid-Hydrolase-Enzym, das die Hydrolyse von terminalen Sialinsäurerückständen katalisiert. Die bekanntesten Neuraminidasen sind virale Neuraminidasen, die die Freisetzung des Influenzavirus fördern.

Application

Neuraminidase aus Clostridium perfringens wurde in einer Studie zur Bewertung der Aufreinigung mittels Affinitätschromatographie verwendet. Es wird außerdem in einer Studie zur Untersuchung von ortsgerichteten Mutationen von Aminosäuren des Neuraminidase-Gens, nanH, verwendet.

Biochem/physiol Actions

Neuraminidase kann die Anhaftung von Typ-3-Reovirus an Zellmembranen blockieren. Diese Wirkung steht im Zusammenhang mit der Eigenschaft von Neuraminidase, Sialinsäurerückstände in Zelloberflächenrezeptoren zu hydrolysieren.

Die Spaltung von Sialinsäurerückständen mittels Neuraminidase wurde verwendet, um das Erkennen von Antikörpern von Glycoproteinstrukturen zu untersuchen. Die Verwendung von Neuraminidase für die Schätzung von N-Acetylneuraminsäure war im Vergleich zu zwei anderen Methoden von vorteilhafter.

Die Verwendung von Neuraminidase zum Entfernen von Sialinsäurerückständen aus Glycoproteinen auf Zelloberflächen wird häufig berichtet. Für Verfahren wird in der Regel eine Anwendung von Neuraminidase in PBS bei 37 °C über 30 Minuten mit mehreren anschließenden Reinigungsvorgängen mit PBS angegeben. Die Behandlung von Gewebeschnitten mit Neuraminidase in viel geringeren Konzentrationen erfordert eine längere Inkubation: bei 1–4 U/ml in 0,1 M Acetatpuffer pH 4,2–5, 2 bis 20 Stunden bei 37 °C.

Neuraminidasen werden verwendet, um terminale N-Acetyl-Neuraminsäure (Sialinsäure) von vielen Glycoproteinen zu spalten. Das Enzym von Clostridium perfringens spaltet terminale Sialinsäurerückstände, die α-2,3- α-2,6- oder α-2,8-gebunden an Gal, GlcNac, GalNAc, AcNeu, GlcNeu, Oligosaccharide, Glycolipide, oder Glycoproteine sind. Die relative Spaltungsrate nimmt in dieser Reihenfolge ab: α-2-3 > α-2-6 α-2-8 Neuraminidase aus C. perfringens spaltet am effizientesten α-2-3-gebundene Sialinsäurerückstände im Vergleich zu A. ureafaciens, (Sigma N3642), das vorzugsweise α-2-6-gebundene Rückstände spaltet.

Preparation Note

Aufgereinigt mittels Affinitätschromatographie vom Typ VIII (N 5631)

Analysis Note

Packungsgrößen basieren auf den 4MU-NANA-Einheiten

Other Notes

Eine Einheit hydrolysiert 1,0 Mikromol von 2′-(4-Methylumbelliferyl)-Alpha-D-N-Actetylneuraminsäure pro Minute bei einem pH-Wert von 5,0 und 37 °C.

Sicherheitshinweise

• Piktogramme: GHS08
• Signalwort: Danger
• Gefahrencodes: H334
• Sicherheitshinweise: P261 - P284 - P501
• Hazard Classifications: Resp. Sens. 1
• Lagerklasse: 11 - Combustible Solids
• Was ist los?: WGK 1
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable
• PSA (Persönliche Schutzausrüstung): Eyeshields, Gloves, type N95 (US)