P0294

Pyruvatkinase-/Lactatdehydrogenase-Enzyme aus Kaninchenmuskel

For the Determination of ADP, buffered aqueous glycerol solution

• Synonym(e): PK-/LDH-Enzyme aus Kaninchenmuskel
• NACRES: NA.54
• UNSPSC Code: 12352204
• Concentration: 600-1,000 units/mL pyruvate kinase, 900-1400 units/mL lactic dehydrogenase

Eigenschaften

• Quality Segment: 100
• form: buffered aqueous glycerol solution
• mol wt: 59 kDa
• concentration: 600-1,000 units/mL pyruvate kinase, 900-1400 units/mL lactic dehydrogenase
• storage temp.: −20°C

Beschreibung

General description

Pyruvatkinase aus Kaninchenmuskel ist ein Metalloenzym, das die Umwandlung von Phosphoenolpyruvat in Pyruvat im Glykolyseweg katalysiert Es hat ein Molekulargewicht von 59 kDa. Es ist als Tetramer vorhanden und durchläuft Konformationsänderungen am aktiven Zentrum, um das Substrat aufzunehmen. Lactatdehydrogenase (LDH) katalysiert die Umwandlung von Lactat zu Pyruvat in anaerober Glykolyse. Es kommt als Tetramer vor und enthält zwei Untereinheiten (H und M). Die LDH der Eukaryonten wird für ihre katalytische Funktion von einem Gating-Loop im aktiven Zentrum gesteuert.

Application

Pyruvatkinase-/Lactatdehydrogenase-Enzyme aus Kaninchenmuskel wurden verwendet:

• zur ATP-Generierung in der Herstellung von aktiver Mikrotubuli
• in enzymgekoppeltem ATPase-Assay von Heavy Meromyosin (HMM) aus Kaninchen-Skelettmuskel
• als Kontrollstandard zur Bestimmung der Lactatdehydrogenase von mesenchymalen Stammzellen

Biochem/physiol Actions

Pyruvatkinase katalysiert außerdem die Phosphorylierung von Thiamindiphosphat (TDP) zu Thiamintriphosphat (TTP), das in antiviralen und Tumorbehandlungen Anwendung findet.

Lactatdehydrogenase aus Kaninchenmuskel kann durch Ascorbat gehemmt werden. Es wurde gezeigt, dass Aldolase und Aktin diese hemmende Wirkung blockieren können.

Pyruvatkinase benötigt für die Aktivierung bivalente und monovalente Kationen wie Mg²⁺ bzw. K⁺.

ADP-Quantifizierung Protokoll für die Verwendung von PK/LDH zur Bestimmung von ADP. Lösungen mit einer unbekannten ADP-Konzentration können das Reagenz D in diesem Protokoll ersetzen. Eine weitere Verdünnung der ADP-Lösung kann erforderlich sein.

Physical form

Lösung in 50 % Glycerol, mit 10 mM HEPES, pH 7,0, 100 mM KCl und 0,1 mM EDTA.

Other Notes

Pyruvatkinase-Aktivität: Eine Einheit wandelt 1,0 μmol Phospho-(enol-)pyruvat pro min bei pH-Wert 7,6 und 37 °C zu Pyruvat um.
Lactatdehydrogenase-Aktivität: Eine Einheit reduziert 1,0 μMol Pyruvat pro Minute bei pH-Wert 7,5 und 37 °C zu L-Lactat um.

Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 10 - Combustible liquids
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable
• PSA (Persönliche Schutzausrüstung): Eyeshields, Gloves, multi-purpose combination respirator cartridge (US)