We test the solubility of this product at 10 mg/mL in a 0.1 M phosphate buffer (pH 6.0). In regards to solution stability of this product, the following information has been listed under Preparation Note on the product's webpage: Solutions of this product at 1 mg/mL in 0.1 M phosphate buffer (pH 6.0) remain active for at least two weeks at room temperature. The solution retains activity after 5 freeze-thaw cycles.
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P6782
Peroxidase aus Meerrettich
Type VI-A, essentially salt-free, lyophilized powder, ≥250 units/mg solid (using pyrogallol), 950-2000 units/mg solid (using ABTS)
Synonym(e):
Donor:hydrogen-peroxide oxidoreductase, Meerrettichperoxidase
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| Größe/SKU | Verfügbarkeit | Preis |
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5 mg | Warenkorb auf Verfügbarkeit prüfen | € 87,10 |
10 mg | Warenkorb auf Verfügbarkeit prüfen | € 162,00 |
25 mg | Warenkorb auf Verfügbarkeit prüfen | € 267,00 |
50 mg | Warenkorb auf Verfügbarkeit prüfen | € 463,00 |
100 mg | Warenkorb auf Verfügbarkeit prüfen | € 753,00 |
Über diesen Artikel
CAS-Nummer:
eCl@ss:
32160410
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.54
EC Number:
232-668-6
MDL number:
EG-Nummer:
Specific activity:
≥250 units/mg solid (using pyrogallol), 950-2000 units/mg solid (using ABTS)
Technischer Dienst
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Unterstützung erhaltentype
Type VI-A
Quality Segment
form
essentially salt-free, lyophilized powder
specific activity
≥250 units/mg solid (using pyrogallol), 950-2000 units/mg solid (using ABTS)
mol wt
~44 kDa
technique(s)
protein detection: suitable
solubility
0.1 M phosphate buffer: soluble 10 mg/mL, clear, orange to red (pH 6.0), H2O: soluble
application(s)
diagnostic assay manufacturing
storage temp.
2-8°C
SMILES string
[O+H2]O[O-]
InChI
1S/H2O3/c1-3-2/h1-2H
InChI key
JSPLKZUTYZBBKA-UHFFFAOYSA-N
General description
Horseradish peroxidase (HRP) wird aus Meerrettich (Amoracia rusticana) Wurzeln isoliert und ist innerhalb der Peroxidasen der Gruppe der Ferroprotoporpyhrine zuzuordnen. HRP besteht aus einer einzelnen Polypeptidkette und entält vier Disulfidbrücken. Sie ist ein Glykoprotein mit einem Kohlenhydratanteil von 18%. Der Kohlenhydratanteil besteht aus Galactose, Arabinose, Xylose, Fucose, Mannose, Mannosamin und Galactosamin - in Mengenverhältnissen abhängig vom Isoenzym. Ihr Molekulargewicht (~44 kDa) setzt sich aus der Polypeptidkette (33,890 Daltons), dem Hemin plus Ca2+ (~700 Daltons) und der Glykosylierung (~9,400 Daltons) zusammen. Es existieren zumindest sieben Isoenzyme von HRP. Der isoelektrische Punkt von HRP ist in einem Bereich von pH 3 3.0 - 9.0.
Application
Meerrettichperoxidase (HRP) wird aus Meerrettichwurzeln (Amoracia rusticana) isoliert. Sie wird in biochemischen Anwendungen wie Western Blots, ELISA und Immunhistochemie eingesetzt. Meerrettichperoxidase wird zur Amplifikation eines schwachen Signals und zur Steigerung der Nachweisbarkeit eines Zielmoleküls, z. B. eines Proteins, verwendet. P6782 ist ein Produkt in Spitzenqualität vom Typ VI-A. Im Wesentlichen handelt es sich um ein salzfreies, lyophilisiertes Pulver. Es dient zur Quantifizierung von Cholesterin und Cholesterinestern und zur In-vitro-Untersuchung von Lipidablagerungen auf Hydrogel- und Silikon-Hydrogel-Kontaktlinsen.
Das Enzym von Sigma wurde bei der Entwicklung eines raschen und empfindlichen Galaktose-Oxidase-Peroxidase-Biosensors für den Galaktosenachweis mit verlängerter Stabilität verwendet. Es ist ein Bestandteil einer Medienplatte (MRS-Agar) mit 3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidin (TMB) für das Wachstum von Lactobacillus sp. TMB agiert als chromogenes Peroxidasesubstrat. Peroxidase erzeugt O2 aus H2O2, das von den Milchsäurebakterien produziert wird, und das TMB färbt die Kolonien in Anwesenheit von O2 blau. Somit erscheinen die H2O2 produzierenden Kolonien nach 48-stündiger Inkubation bei 5 % CO2 in der Luft auf MRS-Agar dunkelblau. Kolonien, die kein H2O2 produzieren, sind farblos. Sie wird zur Untersuchung der stabilisierenden Wirkung von Polyvinylalkohol auf Meerrettichperoxidase eingesetzt. Sie wird auch zum Nachweis von Glucose und Peroxiden in Lösung verwendet.
Biochem/physiol Actions
Wenn Meerrettichperoxidase mit einem Substrat inkubiert wird, erzeugt sie ein farbiges, fluorimetrisches oder lumineszierendes Derivat des markierten Moleküls, wodurch die Quantifizierung ermöglicht wird. Meerrettichperoxidase verringert das Maß der Hemmung in einem mutierten cydAB leicht.
HRP kann leicht mit Wasserstoffperoxid (H2O2) kombiniert werden, und der resultierende [HRP-H2O2]-Komplex kann ein breites Spektrum an Wasserstoffdonatoren oxidieren. Der optimale pH-Wert beträgt 6,0–6,5 und das Enzym ist bei einem pH-Wert im Bereich von 5,0–9,0 am stabilsten. HRP kann durch verschiedene Verfahren an Antikörper konjugiert werden, bei denen Glutaraldehyd, Periodatoxidation oder Disulfidbindungen genutzt werden oder Amino- oder Thiol-gerichtete Vernetzungsmittel zum Einsatz kommen. Sie ist kleiner und stabiler als die Enzymmarkierungen β-Galactosidase und alkalische Phosphatase. Daher ist sie die begehrteste Markierung. Ihre Glykosylierung führt auch zu einer geringeren nichtspezifischen Bindung. Natriumazid, Cyanid, L-Cystein, Dichromat, Ethylenthioharnstoff, Hydroxylamin, Sulfid, Vanadat, p-Aminobenzoesäure sowie die Ionen Cd2+, Co2+, Cu2+, Fe3+, Mn2+, Ni2+ und Pb2+ wirken bekanntermaßen hemmend auf die Enzymaktivität.
Packaging
Abgepackt in mg Feststoff
Preparation Note
Lösungen dieses Produkts mit einer Konzentration von 1 mg/ml in 0,1 M Phosphatpuffer (pH-Wert 6,0) bleiben bei Raumtemperatur mindestens zwei Wochen lang aktiv. Die Aktivität der Lösung bleibt über 5 Gefrier-/Auftau-Zyklen hinweg erhalten.
Analysis Note
Die RZ (Reinheitszahl) ist das Absorptionsratio A403/A275 bestimmt bei 0.5-1.0 mg/ml in deionisiertem Wasser. Es ist ein Mass für den Hämingehalt, nicht für die Enzymaktivität. Selbst Zubereitungen mit hoher RZ können eine tiefe Enzymaktivität haben.
Dieses Produkt wird für einen einfachen Vergleich mit den Einheiten anderer Anbieter mit ABTS getestet: ca. 1.000 Einheiten pro mg Feststoff
Other Notes
Eine ABTS-Einheit oxidiert bei einem pH-Wert von 5,0 und einer Temperatur von 25 °C pro Minute 1 μmol ABTS.
Eine Pyrogalloleinheit bildet in 20 s bei einem pH-Wert von 6,0 und 20 °C 1 mg Purpurogallin aus Pyrogallol.
Weitere Informationen über Peroxidase finden Sie unter www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer.
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| description Type VI-A, essentially salt-free, lyophilized powder, ≥250 units/mg solid (using pyrogallol), 950-2000 units/mg solid (using ABTS) | description lyophilized, powder, ~150 U/mg | description Type II, essentially salt-free, lyophilized powder, 150-250 units/mg solid (using pyrogallol) | description Type XII, essentially salt-free, lyophilized powder, ≥250 units/mg solid (using pyrogallol) |
| specific activity 950-2000 units/mg solid (using ABTS), ≥250 units/mg solid (using pyrogallol) | specific activity ~150 U/mg | specific activity 150-250 units/mg solid (using pyrogallol) | specific activity ≥250 units/mg solid (using pyrogallol) |
| application(s) diagnostic assay manufacturing | application(s) - | application(s) diagnostic assay manufacturing | application(s) - |
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| solubility 0.1 M phosphate buffer: soluble 10 mg/mL, clear, orange to red (pH 6.0), H2O: soluble | solubility 50 mM potassium phosphate buffer, pH 6.0: 5 mg/mL (0.1% BSA) | solubility 0.1 M phosphate buffer: soluble (pH 6.0), H2O: soluble | solubility H2O: soluble, 0.1 M phosphate buffer: soluble (pH 6.0) |
| storage temp. 2-8°C | storage temp. 2-8°C | storage temp. 2-8°C | storage temp. 2-8°C |
| mol wt ~44 kDa | mol wt - | mol wt ~44 kDa | mol wt ~44 kDa |
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Signalwort
Danger
Gefahrencodes
Sicherheitshinweise
Hazard Classifications
Resp. Sens. 1
Lagerklasse
11 - Combustible Solids
PSA (Persönliche Schutzausrüstung)
Eyeshields, Gloves, type N95 (US)
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Can I dissolve 10mg HRP powder by splitting into certain concentrations like 1mg/ml,4mg/ml and 5mg/ml by weighing 1mg,4mg and 5mg amount and dissolving it separately instead of made it to 10mg/ml in phosphate buffer as mention catalog. Will it work?
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