SYBR Green qPCR is utilized to determine the relative silencing effect of specific shRNAs. The term "validated" refers to shRNA sequences that have been tested and confirmed effective in silencing. This validation involves testing in specific cell lines and measuring the mean knockdown level through lentiviral transduction. The evaluation of knockdown is conducted by measuring mRNA transcript levels post-lentiviral transduction with SYBR Green qPCR and comparing these levels to those achieved with the MISSION pLKO.1-puro Control Transduction Particles (SHC001V). For instance, a mean knockdown level of 0.90 indicates a 90% reduction at the mRNA level. Typically, validation does not extend to the protein level, as the primary target of shRNA is mRNA expression, which subsequently influences protein expression.
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SHCLND
MISSION® shRNA
Purified DNA
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General description
Unser umfassendes shRNA-Produktangebot besteht aus über 150.000 vorgeklonten shRNA-Konstrukten, die sich gegen mehr als 15.000 menschliche Gene und 15.000 Mausgene richten. Die Bibliothek ist verfügbar in: Genfamilien-Sets: Gensammlungen in Verbindung mit bestimmten funktionalen Klassen wie beispielsweise Kinasen und Ionenkanälen; Gen-Target-Sets, Sets mit shRNA-Klonen, die sich gezielt auf das bevorzugte Gen richten; und einzelnen shRNA-Klonen. Unsere shRNA- und lentiviralen Herstellungsplattformen nutzen spezielle Labore mit hochmoderner Robotertechnik sowie Flüssigkeitsbearbeitungs- und Labor-Informations-Management-Systemen (LIMS), um hervorragende Qualität und optimalen Service für Ihre RNAi-Forschungsanforderungen zu bieten.
MISSION® TRC shRNA aufgereinigte Plasmid-DNA ermöglicht ein problemloses Herstellen von DNA aus jedem Konstrukt. DNA kann direkt zur transienten oder stabilen Transfektion verwendet werden. Diese Plasmide können außerdem zur Produktion lentiviraler Partikel mit Verpackungsplasmiden in einer Verpackungszelllinie kombiniert werden. Für jedes Konstrukt im Zielset wird 1 μg DNA geliefert.
Application
MISSION® shRNA wird in folgenden Anwendungen eingesetzt:
- bei der Erzeugung von Knockdown von ZO-1 (Zonula occludens-1)
- im Knockdown der LIF-Expression (Leukämie-Hemmfaktor) im isogenen MCF10-Modell
- im Knockdown von Nfe2l1 („Nuclear Factor Erythroid 2 Like 1“) in n-MIN6 pankreatischen β-Zellen
Other Notes
Protokolle und Anwendungsdaten finden Sie unter sigma.com/shrna.
Legal Information
Die Nutzung dieses Produkts ist vorbehaltlich einer oder mehrerer Lizenzvereinbarungen.
MISSION is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
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| description Purified DNA | description Bacterial Stock | description Custom Lentiviral Particles | description Lentiviral Particles |
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How is the knockdown measured for validated shRNA clones?
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