T4393

Thrombin aus Humanplasma

lyophilized powder, 1500-3500 NIH units/mg protein (E1%/280, 18.3), suitable for cell culture

• Synonym(e): Faktor IIa
• CAS-Nummer: 9002-04-4
• UNSPSC Code: 12352202
• NACRES: NA.75
• EC Number: 232-648-7
• MDL number: MFCD00082072
• EG-Nummer: 3.4.21.5 (BRENDA, IUBMB)
• Specific activity: 1500-3500 NIH units/mg protein (E1%/280, 18.3)
• Biological source: human plasma

Eigenschaften

• biological source: human plasma
• Quality Segment: 200
• sterility: sterile
• form: lyophilized powder
• specific activity: 1500-3500 NIH units/mg protein (E1%/280, 18.3)
• technique(s): cell culture | mammalian: suitable
• impurities: HIV, hepatitis B and hepatitis C, tested negative
• UniProt accession no.: P00734
• storage temp.: −20°C
• Gene Information: human ... F2(2147)

Beschreibung

General description

Thrombin wird durch die proteolytische Spaltung von inaktivem Prothrombin in der Leber gewonnen. Das Prothrombin-Gen ist auf dem humanen Chromosom 11p11.2 lokalisiert. Es ist aufgebaut aus der katalytischen Domäne A und B, einer Erkennungsdomäne und Insertionsschleifen. Die Reste am aktiven Situs umfassen die katalytische Tetrade (Histidin 57, Aspartat 102, Serin 195 und Serin 214).

Application

Thrombin aus Humanplasma hat folgende Anwendungen:

• Medienzusatz für die Vorbehandlung von Endothelzellkulturen für konfokale mikroskopische Untersuchungen und ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay)
• Gelatinisierung mesenchymaler Stammzellen (MSCs) zur Herstellung des Fibrin–MSC-Komplexes
• Screening des Serinproteaseinhibitors OGTI in Sekreten von Froschhaut

Biochem/physiol Actions

Serinprotease, die selektiv Arg-Gly-Bindungen in Fibrinogen spaltet, um Fibrin und Fibrinopeptide A und B zu bilden.

Die Hauptfunktion von Thrombin besteht in der Spaltung von Fibrinogen zu Fibrin, um einen stabilen Gerinnungsprozess zu fördern. Ein hoher Thrombinspiegel löst eine neurotoxische Wirkung in dopaminergen Neuronen aus und trägt zur Progression von Parkinson bei. Zahlreiche Mutationen im Prothrombin-Gen tragen zu einer Defizienz bei, die zu Koagulationsstörungen wie Dysprothrombinämie und Hypoprothrombinämie führt. Eine Veränderung des Thrombinspiegels führt bei vielen Sklerosen zu einer entsprechenden Anpassung des Koagulationswegs. Patienten mit koronarer Herzkrankheit (KHK) weisen einen erhöhten Thrombinspiegel auf. Thrombinablagerungen in den Neurofibrillenbündeln im Gehirn können zu einer τ-Proteinansammlung und zu den pathophysiologischen Veränderungen von Alzheimer beitragen.

Preparation Note

Bei Rekonstitution mit 1 ml Wasser enthält ein Fläschchen erklärte Aktivität in 0,15 M Natriumchlorid und 0,05 M Natriumcitrat, pH-Wert 6,5.

Analysis Note

Beim NIH-Assay werden 0,2 ml verdünntes Plasma (1:1 mit Kochsalzlösung) als Substrat und 0,1 ml der Thrombinprobe (stabilisiert in einer 1 % gepufferten Albuminlösung) auf Basis einer modifizierten Biggs-Methode analysiert. Zur Bestimmung der Thrombinkonzentrationen werden nur Gerinnungszeiten im Bereich von 15–25 Sekunden verwendet.

Other Notes

Die Aktivität wird in NIH-Einheiten ausgedrückt, die aus einem direkten Vergleich mit einem NIH-Thrombin-Referenzstandard gewonnen werden

Disclaimer

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Sicherheitshinweise

• Signalwort: Danger
• Lagerklasse: 10 - Combustible liquids
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable
• Zielorgane: Respiratory system
• Piktogramme: GHS08,GHS07
• Gefahrencodes: H315,H319,H334,H335
• Sicherheitshinweise: P261 - P264 - P271 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• Hazard Classifications: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3