TRYPSEQ-RO

Trypsin in Sequenzierqualität

from bovine pancreas

• Synonym(e): Trypsin
• UNSPSC Code: 12352204
• EG-Nummer: 3.4.21.4 (BRENDA, IUBMB)
• NACRES: NA.54
• Specific activity: ≥80 units/mg protein
• Biological source: bovine pancreas

Eigenschaften

• biological source: bovine pancreas
• form: lyophilized (salt-free)
• specific activity: ≥80 units/mg protein
• mol wt: M_r 23.5 kDa
• packaging: pkg of 4 × 100 μg (11047841001), pkg of 4 × 25 μg (11418475001)
• manufacturer/tradename: Roche
• optimum pH: 8.0
• storage temp.: 2-8°C

Beschreibung

General description

Trypsin in Sequenzierqualität wird aus der Bauchspeicheldrüse von Rindern als hochreine und spezifische Protease isoliert. Trypsin in Sequenzierqualität ist eine Serin-Endopeptidase.[1] Sie spaltet spezifisch Peptidbindungen auf der Carboxyl-Seite der basischen Aminosäuren Arg und Lys. Amid- und Ester-Bindungen von Arg und Lys werden ebenfalls gespalten.[2]

Application

Trypsin in Sequenzierqualität wird zum Verdau von Proteinen in Lösung, in Gelen oder auf Blotting-Membranen verwendet.
Das Enzym wird zur Aufklärung von Proteinstrukturen, für tryptisches Mapping, Fingerprinting, Sequenzanalysen und für Translokationsstudien genutzt.[3] Trypsin in Sequenzierqualität erzeugt Glykopeptide aus aufgereinigten Glykoproteinen und ist geeignet für den Verdau von Proteinen in Polyacrylamidgelen.

Biochem/physiol Actions

Die Spezifität von Trypsin in Sequenzierqualität wird mit der oxidierten B-Kette von Insulin (Insulin B_ox) als Substrat verifiziert. Hohe Konzentrationen von Trypsin in Sequenzierqualität (1 Gewichtsteil Enzym und 18 Gewichtsteile Insulin B_ox) werden 18 Stunden inkubiert, um Spuren von Chymotrypsin-Verunreinigungen nachzuweisen.

Spezifität (HPLC, mit Insulin B_ox):
Spaltung nach 1 Stunde: ≥90 %
Unspezifische Spaltungsprodukte nach 18 Stunden: ≤10 %

Preparation Note

Stabilisatoren: Trypsin ist stabil in 4 M.
Arbeitskonzentration: 1/100 bis 1/20 des Proteins nach Gewicht (in Lösung); 1–5 μg/100 μL (für In-Gel-Verdau)
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): Eine Lösung in 0,01 % Trifluoressigsäure (TFA), (v/v) oder 1 mM HCl kann maximal eine Woche lang verwendet werden, wenn sie bei 2 bis 8 °C gelagert wird. Durch Inkubation von Proteinen in Lösung bei neutralen bis leicht basischen pH-Werten kann eine Teilautolyse auftreten. Für diese Anwendung empfiehlt Roche modifiziertes Trypsin in Sequenzierqualität.

Für die Stabilität der Lösung ist die Rekonstituierung in Säure erforderlich: Empfohlen werden 0,01 % TFA (v/v), 1 mM HCl oder 0,1 Essigsäure.

Analysis Note

Reinheit: Frei von Verunreinigungen, die mit der Separation von Peptiden in der RP-HPLC interferieren können.

Other Notes

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Sicherheitshinweise

• pictograms: GHS07,GHS08
• signalword: Danger
• hcodes: H315,H319,H334,H335
• pcodes: P261 - P264 - P280 - P284 - P304 + P340 + P312 - P342 + P311
• Hazard Classifications: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• target_organs: Respiratory system
• Lagerklasse: 11 - Combustible Solids
• wgk: WGK 1
• flash_point_f: does not flash
• flash_point_c: does not flash