TRYPSEQ-RO

Trypsin in Sequenzierqualität

from bovine pancreas

• Synonym(e): Trypsin
• UNSPSC Code: 12352204
• EG-Nummer: 3.4.21.4 (BRENDA, IUBMB)
• NACRES: NA.54
• eCl@ss: 32160703
• Specific activity: ≥80 units/mg protein
• Biological source: bovine pancreas

Eigenschaften

• biological source: bovine pancreas
• form: lyophilized (salt-free)
• specific activity: ≥80 units/mg protein
• mol wt: M_r 23.5 kDa
• packaging: pkg of 4 × 100 μg (11047841001), pkg of 4 × 25 μg (11418475001)
• manufacturer/tradename: Roche
• optimum pH: 8.0
• storage temp.: 2-8°C

Beschreibung

General description

Trypsin in Sequenzierqualität wird aus der Bauchspeicheldrüse von Rindern als hochreine und spezifische Protease isoliert. Trypsin in Sequenzierqualität ist eine Serin-Endopeptidase. Sie spaltet spezifisch Peptidbindungen auf der Carboxyl-Seite der basischen Aminosäuren Arg und Lys. Amid- und Ester-Bindungen von Arg und Lys werden ebenfalls gespalten.

Application

Trypsin in Sequenzierqualität wird zum Verdau von Proteinen in Lösung, in Gelen oder auf Blotting-Membranen verwendet.
Das Enzym wird zur Aufklärung von Proteinstrukturen, für tryptisches Mapping, Fingerprinting, Sequenzanalysen und für Translokationsstudien genutzt. Trypsin in Sequenzierqualität erzeugt Glykopeptide aus aufgereinigten Glykoproteinen und ist geeignet für den Verdau von Proteinen in Polyacrylamidgelen.

Biochem/physiol Actions

Die Spezifität von Trypsin in Sequenzierqualität wird mit der oxidierten B-Kette von Insulin (Insulin B_ox) als Substrat verifiziert. Hohe Konzentrationen von Trypsin in Sequenzierqualität (1 Gewichtsteil Enzym und 18 Gewichtsteile Insulin B_ox) werden 18 Stunden inkubiert, um Spuren von Chymotrypsin-Verunreinigungen nachzuweisen.

Spezifität (HPLC, mit Insulin B_ox):
Spaltung nach 1 Stunde: ≥90 %
Unspezifische Spaltungsprodukte nach 18 Stunden: ≤10 %

Preparation Note

Stabilisatoren: Trypsin ist stabil in 4 M.
Arbeitskonzentration: 1/100 bis 1/20 des Proteins nach Gewicht (in Lösung); 1–5 μg/100 μL (für In-Gel-Verdau)
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): Eine Lösung in 0,01 % Trifluoressigsäure (TFA), (v/v) oder 1 mM HCl kann maximal eine Woche lang verwendet werden, wenn sie bei 2 bis 8 °C gelagert wird. Durch Inkubation von Proteinen in Lösung bei neutralen bis leicht basischen pH-Werten kann eine Teilautolyse auftreten. Für diese Anwendung empfiehlt Roche modifiziertes Trypsin in Sequenzierqualität.

Für die Stabilität der Lösung ist die Rekonstituierung in Säure erforderlich: Empfohlen werden 0,01 % TFA (v/v), 1 mM HCl oder 0,1 Essigsäure.

Analysis Note

Reinheit: Frei von Verunreinigungen, die mit der Separation von Peptiden in der RP-HPLC interferieren können.

Other Notes

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht zur Verwendung in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Sicherheitshinweise

• Piktogramme: GHS07,GHS08
• Signalwort: Danger
• Gefahrencodes: H315,H319,H334,H335
• Sicherheitshinweise: P261 - P264 - P280 - P284 - P304 + P340 + P312 - P342 + P311
• Hazard Classifications: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• Zielorgane: Respiratory system
• Lagerklasse: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): does not flash
• Flammpunkt (°C): does not flash