MAC133

Anticorpo anti-Cas9, clone 7A9

clone 7A9, from mouse

• Sinonimo/i: dCas9
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Clone: 7A9, monoclonal
• Technique(s): immunocytochemistry: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• Application: ICC, IP, WB
• Citations: 28

Proprietà

• biological source: mouse
• Quality Segment: 100
• antibody form: purified antibody
• antibody product type: primary antibodies
• clone: 7A9, monoclonal
• species reactivity (predicted by homology): all
• technique(s): immunocytochemistry: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG1κ
• shipped in: wet ice
• target post-translational modification: unmodified

Descrizione

General description

Cas9 è una endonucleasi essenziale Streptococcus pyogenes di sierotipo M1 che fa parte del sistema immunitario innato di questo microrganismo, o sistema immunitario adattativo CRISPR (sequenze ripetute palindrome brevi raggruppate a intervalli regolari) che protegge dagli elementi genetici mobili (virus, trasposoni e plasmidi coniugativi). I cluster CRISPR contengono spaziatori, sequenze complementari a elementi mobili eredità di un′invasione precedente, e riconoscono gli acidi nucleici invasori. I cluster di CRISPR vengono trascritti e trasformati in RNA CRISPR (crRNA). Nei sistemi CRISPR di tipo II, la corretta trasformazione del pre-crRNA richiede un piccolo RNA trans-attivatore (tracrRNA), la ribonucleasi endogena (rnc) 3 e Cas9. Successivamente il complesso Cas9/crRNA/tracrRNA opera la scissione endonucleolitica del dsDNA bersaglio circolare complementare allo spaziatore. Il filamento bersaglio non complementare al crRNA subisce dapprima una scissione endonucleolitica e quindi un taglio esonucleolitico in direzione 3′-5′. Il legame al DNA richiede proteine ed entrambe le specie di RNA. Cas9 probabilmente riconosce un motivo breve all′interno delle sequenze ripetute di CRISPR (PAM o protospacer adjacent motif) per permettere di distinguere il self dal non-self, dato che nei bersagli all′interno del locus CRISPR batterico PAM non è presente. I ricercatori auspicano di sfruttare le caratteristiche di programmabilità e la precisa natura della scissione in cui interviene Cas9 per ottimizzare le tecnologie del DNA ricombinante.

Visualizzato a ~160 kDa

Immunogen

Dominio N-terminale della proteina Cas9.

Application

Categoria di ricerca
Anticorpi secondari & di controllo

L′anticorpo anti-Cas9, clone 7A9 | MAC133, è un anticorpo mirato contro Cas9 per l′uso nei saggi di Western blotting, immunoprecipitazione e immunocitochimica.

Sottocategoria di ricerca
Anticorpi secondari preadsorbiti per doppia marcatura

Western blotting: un lotto rappresentativo alla concentrazione di 0,5 µg/mL ha permesso di rilevare Cas9 in 1 µg di lisato di cellule HEK293 esprimenti Myc-Cas9.
Immunoprecipitazione: con un lotto rappresentativo è stata ottenuta l'immunoprecipitazione di Cas9 da un lisato di cellule esprimenti Flag-Cas9 e Myc-Cas9 (esperimento condotto da un laboratorio indipendente).

Biochem/physiol Actions

MAC133 riconosce sia Cas9 che dCas9 (nucleasi priva di Cas9)

Physical form

Formato: purificato

IgG1κ monoclonali purificate di topo in tampone contenente Tris-glicina 0,1 M (pH 7,4), NaCl 150 mM con azoturo di sodio 0,05%.

Purificato con proteina G

Preparation Note

Stabile per 1 anno a 2-8 °C dalla data di ricevimento.

Analysis Note

Valutata mediante Western blotting su lisato di cellule HEK293 esprimenti Flag-Cas9.

Western blotting: questo anticorpo alla concentrazione di 0,5 µg/mL ha permesso di rivelare Cas9 in 1 µg di lisato di cellule HEK293 esprimenti Flag-Cas9.

Other Notes

Concentrazione: fare riferimento alla scheda tecnica specifica del lotto.

Disclaimer

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Informazioni sulla sicurezza

• Classe di stoccaggio: 12 - Non Combustible Liquids
• Che succede?: WGK 1