COLLDISP-RO

Collagenasi/dispasi^®

lyophilized, non-sterile, optimum pH 7.0-8.0

• Sinonimo/i: collagenasi
• UNSPSC Code: 12352204
• NACRES: NA.54
• Specific activity: >0.8 U/mg lyophilizate, pH 7.5, 37 °C (casein as substrate, Dispase)
• Biological source: enzyme from Bacillus polymyxa ( Dispase ), enzyme from bacterial ( Collagenase from Vibrio alginolyticus)
• Concentration: 1 mg/mL (Collagenase: 0.1U/mL, Dispase: 0.8U/mL)

Proprietà

• biological source: enzyme from Bacillus polymyxa ( Dispase ), enzyme from bacterial ( Collagenase from Vibrio alginolyticus)
• sterility: non-sterile
• form: lyophilized
• collagenase activity: >0.1 U/mg lyophilizate, 25 °C (4-phenyl-azobenzyl-oxycarbonyl-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg as substrate)
• specific activity: >0.8 U/mg lyophilizate, pH 7.5, 37 °C (casein as substrate, Dispase)
• packaging: pkg of 100 mg (10269638001), pkg of 500 mg (11097113001)
• manufacturer/tradename: Roche
• concentration: 1 mg/mL (Collagenase: 0.1U/mL, Dispase: 0.8U/mL)
• technique(s): tissue processing: suitable
• color: light yellow to brown
• optimum pH: 7.0-8.0
• solubility: water: soluble
• UniProt accession no.: P43154
• application(s): life science and biopharma; sample preparation
• foreign activity: proteolytic activities <0.1 U/mg (hemoglobin as the substrate)
• storage temp.: 2-8°C

Descrizione

General description

La dispasi è una proteasi delicata, neutra e ad azione rapida che separa l′epidermide intatta dal derma. Separa inoltre le cellule epiteliali intatte coltivate dal substrato. Scinde la zona della membrana basale e lascia intatte le cellule epiteliali. La collagenasi è una proteasi che scinde la proteina a tripla elica chiamata collagene. Esistono tre tipi di collagenasi tissutali; appartengono alla famiglia delle metalloproteinasi della matrice (MMP). La collagenasi ottenuta da Clostridium histolyticum ha un′attività molto forte e digerisce collagene da entrambe le estremità, a basse temperature fino a 4-10 °C.

Application

La collagenasi/Dispase^® è stata usata per la preparazione di cellule provenienti da un′ampia varietà di tessuti e organi.

Biochem/physiol Actions

La collagenasi degrada il collagene nativo. Dispase^® è una proteasi aspecifica.

Preparation Note

Attivatore: Ca²⁺

Concentrazione di lavoro: circa 1mg/mL (collagenasi: 0,1 U/mL, dispasi: 0,8 U/mL)

Attività enzimatica:
Collagenasi 0,1 U/mg liofilizzato (secondo Wünsch) (+25 °C, 4-fenil-azobenzil-ossicarbonil-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg come substrato)
Dispase^®: 0,8 U/mg liofilizzato (secondo Wünsch) (+37 °C, caseina come substrato, pH 7,5)
Attività proteolitiche contaminanti: <0,1 U/mg liofilizzato (emoglobina come substrato)

Soluzione di lavoro: Preparazione della soluzione di lavoro Sciogliere l′enzima in acqua a una concentrazione finale di 100 mg/mL. Diluire con PBS (senza Ca²⁺/Mg²⁺) a una concentrazione finale di 1 mg/mL e filtrare attraverso un filtro a membrana sterile da 0,2 μm.
Concentrazione enzimatica della soluzione sterile: Collagenasi, 0,1 U/mL di PBS; Dispase^®, 0,8 U/mL di PBS.

Inibitori:
Inibitori delle collagenasi: EDTA, EGTA
La collagenasi/dispasi non è inibita dal siero.

Condizioni di stoccaggio (soluzione di lavoro): Da -15 a -25 °C
La soluzione ricostituita è stabile a una temperatura compresa tra -15 e -25 °C.
Nota: Conservare in aliquote appropriate ed evitare ripetuti cicli di congelamento e scongelamento.

Conservare in condizioni asciutte.

Ricostituzione in acqua (100 mg/mL). Ulteriore diluizione con PBS (tampone fosfato salino) (senza Ca²⁺/Mg²⁺).

Other Notes

Collagenasi da Vibrio alginolyticus, Dispase^® da Bacillus polymyxa

Da utilizzare solo per ricerca nel settore Life Science. Non usare a scopo diagnostico.

EC 3.4.24.4 & 3.4.24.3

Un′unità equivale all′attività enzimatica che, nelle condizioni di analisi, libera in un minuto amminoacidi e peptidi positivi alla folina corrispondenti a 1 μmol di tirosina.

Legal Information

Dispase is a registered trademark of Godo Shusei Co., Ltd.

Informazioni sulla sicurezza

• Pittogrammi: GHS07,GHS08
• Parola di avvertenza: Danger
• Avvertenze di sicurezza: P261 - P264 - P280 - P284 - P304 + P340 + P312 - P342 + P311
• Hazard Classifications: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• Organi bersaglio: Respiratory system
• Classe di stoccaggio: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 1
• Punto di infiammabilità (°F): does not flash
• Punto di infiammabilità (°C): does not flash
• Codici di pericolo: H315,H319,H334,H335