TRYPSEQ-RO

Grado per il sequenziamento della tripsina

from bovine pancreas

• Sinonimo/i: tripsina
• UNSPSC Code: 12352204
• Numero CE: 3.4.21.4 (BRENDA, IUBMB)
• NACRES: NA.54
• Specific activity: ≥80 units/mg protein
• Biological source: bovine pancreas

Proprietà

• biological source: bovine pancreas
• form: lyophilized (salt-free)
• specific activity: ≥80 units/mg protein
• mol wt: M_r 23.5 kDa
• packaging: pkg of 4 × 100 μg (11047841001), pkg of 4 × 25 μg (11418475001)
• manufacturer/tradename: Roche
• optimum pH: 8.0
• storage temp.: 2-8°C

Descrizione

General description

La tripsina per sequenziamento è isolata da pancreas bovino come proteasi altamente purificata e specifica. La tripsina per sequenziamento è una serina endopeptidasi. Scinde specificamente i legami peptidici sul lato carbossilico degli aminoacidi basici Arg e Lys. Vengono scissi anche i legami ammidici ed esteri di Arg e Lys.

Application

La tripsina per sequenziamento è usata per la digestione di proteine in soluzione, in gel o su membrane di blotting.
L′enzima è usato per studi di risoluzione della struttura proteica, mappatura triptica, fingerprinting, analisi della sequenza e traslocazione. La tripsina per sequenziamento genera glicopeptidi da glicoproteine purificate ed è adatta alla digestione delle proteine in gel di poliacrilammide.

Biochem/physiol Actions

La specificità della tripsina per sequenziamento viene verificata con la catena B ossidata dell′insulina (insulina B_ox) come substrato. Elevate concentrazioni di tripsina per sequenziamento (1 parte in peso dell′enzima con 18 parti in peso di insulina B_ox) vengono incubate per 18 ore per rilevare tracce di chimotripsina come impurezza.

Specificità (HPLC, con insulina B_ox):
Scissione dopo 1 ora: ≥90%
Prodotti aspecifici della scissione dopo 18 ore: ≤10%

Preparation Note

Stabilizzatori: La tripsina è stabile in 4 M.
Concentrazione di lavoro: da 1/100 a 1/20 della proteina in peso (in soluzione); 1-5 μg/100 μL (per la digestione in gel)
Condizioni di conservazione (soluzione di lavoro): per non più di una settimana, se conservata tra 2 e 8 °C, si può usare una soluzione in 0,01% di acido trifluoroacetico (TFA), (v/v) o 1 mM di HCl. Incubando le proteine in soluzione a un pH neutro o leggermente basico può avere luogo una parziale autolisi. Per questa applicazione Roche raccomanda tripsina, modificata, per sequenziamento.

Per la stabilità della soluzione è necessaria la ricostruzione in acido: Si raccomandano 0,01% di TFA (v/v), 1 mM di HCl o 0,1% di acido acetico.

Analysis Note

Purezza: esente da impurezze che possano interferire con la separazione dei peptidi nella HPLC a fase inversa.

Other Notes

Da utilizzare solo per ricerca nelle scienze naturali. Non usare in procedure diagnostiche.

Informazioni sulla sicurezza

• Pittogrammi: GHS07,GHS08
• Parola di avvertenza: Danger
• Avvertenze di sicurezza: P261 - P264 - P280 - P284 - P304 + P340 + P312 - P342 + P311
• Hazard Classifications: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• Organi bersaglio: Respiratory system
• Classe di stoccaggio: 11 - Combustible Solids
• Che succede?: WGK 1
• Punto di infiammabilità (°F): does not flash
• Punto di infiammabilità (°C): does not flash
• Codici di pericolo: H315,H319,H334,H335