미생물 배양 배지 준비
미생물 배양 배지 준비는 미생물의 성장과 분화를 지원하는 한천 또는 배양액을 만들기 위해 영양소, 완충 및 삼투압 균형 유지를 위한 약제, 선택적 억제제 또는 지표 물질을 혼합하는 과정입니다. 미생물 배양 배지 준비는 미생물 검사에서 부패 및 병원성 미생물을 정기적으로 모니터링하는 일상적인 작업입니다.
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배양 배지의 종류
미생물 배지는 모든 또는 특정 유형의 미생물에 대해 최적의 성장 조건을 제공해야 합니다. 배지의 정확한 구성은 배양되는 종과 적용 목표에 따라 다릅니다. 미생물에 따라 배지의 pH를 조정해야 합니다. 미생물 배양 배지는 화학 성분, 물리적 특성 및 기능과 같은 여러 매개변수에 따라 분류됩니다. 이러한 매개변수에 따라 정의된 배지의 종류는 다음과 같습니다.
화학 성분에 따른 미생물 배지의 분류
합성(정의) 배지는 시아노박테리아 및 광합성 원생생물과 같은 광합성 생물 배양에 일반적으로 사용되는 정의된 화학 물질이 있는 배지입니다. 미생물 대사를 연구하는 연구에 널리 사용됩니다.
복합 배지는 다양한 미생물의 영양 요구 사항을 충족하는 펩톤, 육류 추출물, 효모 추출물 등 정의되지 않은 화학 성분을 함유한 배지입니다. 복잡한 영양 요구 사항을 가진 까다로운 미생물을 배양하는 데 사용됩니다.
물리적 특성에 따른 미생물 배양 배지
고체 배지는 1-7% 한천 또는 10-20% 젤라틴을 사용하여 액체 국물을 고체화합니다. 고체 배지는 서로 다른 미생물을 분리하고, 순수한 배양을 확립하고, 한천 경사를 만들고, 한천 찌르기를 만드는 데 사용됩니다.
액체 배지에는 응고제가 포함되어 있지 않습니다. 접종 및 배양 후 세포는 작은 덩어리 또는 국물 흐림의 형태로 보입니다.
제조 방법에 따른 미생물 배양 배지
즉시 사용 가능한 배지는 접시, 병, 튜브 또는 기타 용기에 담겨 바로 사용하거나 재용융 및 보충 후 바로 사용할 수 있는 형태로 공급되는 고체 또는 액체 배지입니다.
상업적으로 탈수된 제제로 제조된 배지는 사용 전에 재수화 및 가공이 필요한 건조한 형태의 배지로, 완전한 배지 또는 사용 전에 보충제를 첨가한 불완전한 배지입니다.
개별 성분으로 제조된 배지는 미생물학 실험실에서 개별 성분으로만 제조한 배지입니다.
주문형 배지는 실험실에서 고농도의 멸균 배지를 며칠 동안 보관하는 시스템에 의해 생산됩니다. 멸균수로 희석하면 오토클레이브 없이도 필요할 때 필요한 양의 즉시 사용 가능한 배지를 생산할 수 있습니다.
미생물 배지의 준비
탈수된 상용 제제로부터 배지를 준비할 때는 제조업체의 지침에 따라 수행해야 합니다. 펩톤, 효모 추출물, 한천, 완충 물질 및 항생제와 같은 기본 성분의 배합은 배지의 일관성을 얻기 위해 수정됩니다. 필요한 양의 탈수 배지 또는 개별 성분을 증류수에 계속 저어준 다음 가열(필요한 경우)하여 용해시킵니다. 한천이 포함된 배지는 가열하기 전에 적절한 교반을 통해 충분히 담가야 합니다. pH를 조정해야 하며, 배지를 적절한 용기에 분배하여 오토클레이브에서 습열로 멸균합니다. 열에 민감한 물질(예: 단백질, 효소)은 멤브레인 필터를 사용하여 멸균합니다.
배양 배지는 조성의 변질을 방지하기 위해 지정된 온도에서 제품 유통기한보다 오래 보관하지 않아야 합니다. 배양 배지를 미생물 감염으로부터 보호하려면 무균 상태로 준비하고 보관하는 것이 필수적입니다. 불투과성 포장 및/또는 5°C ± 3°C에서 보관하면 보관 시 수분 손실을 최소화할 수 있습니다. 빛, 열, 탈수로부터 보호하면 산화 또는 항균성 손실과 같은 화학적 분해를 지연시킬 수 있습니다.
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