03-119

RIPAb+ CUGBP2 - zwalidowane przeciwciało RIP i zestaw primerów

from mouse

• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.52
• eCl@ss: 32160702

Właściwości

• biological source: mouse
• Quality Segment: 100
• clone: monoclonal
• species reactivity: human
• manufacturer/tradename: RIPAb+, Upstate^®
• technique(s): RIP: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG1
• NCBI accession no.: NM_001025076.2, NM_001025077.2, NM_001083591.1, NM_006561.3
• UniProt accession no.: O95319
• shipped in: dry ice
• Gene Information: human ... CELF2(10659)

Opis

General description

56 kDa

Przeciwciała RIPAb+ są oceniane przy użyciu testu immunoprecypitacji białka wiążącego RNA (RIP). Każdy zestaw przeciwciał RIPAb+ zawiera ujemne przeciwciało kontrolne w celu zapewnienia swoistości reakcji RIP i jest weryfikowany pod kątem koimmunoprecypitacji RNA związanego specyficznie z immunoprecypitowanym białkiem wiążącym RNA będącym przedmiotem zainteresowania. W stosownych przypadkach zestaw RIPAb+ zawiera również startery kontrolne do ilościowego RT-PCR (startery RIP) w celu biologicznego potwierdzenia wyników IP poprzez udaną ko-precypitację określonych docelowych RNA, takich jak informacyjny RNA. Protokół qPCR i sekwencje starterów są dostarczane, umożliwiając badaczom walidację protokołów RIP podczas stosowania przeciwciała w ich kontekście eksperymentalnym. Jeśli nie dostarczono testu specyficznego dla celu, zestaw RIPAb+ jest walidowany przy użyciu zautomatyzowanego testu opartego na mikroprzepływach poprzez wzbogacenie wykrywalnego RNA w stosunku do kontrolnej immunoprecypitacji.
CUGBP2 jest białkiem wiążącym RNA zaangażowanym w regulację kilku zdarzeń potranskrypcyjnych, w tym alternatywnego splicingu pre-mRNA, translacji i stabilności mRNA. CUGBP2 pośredniczy we włączaniu i/lub wykluczaniu eksonów w pre-mRNA, które podlegają alternatywnemu splicingowi specyficznemu dla tkanki i regulowanemu rozwojowo.

Immunogen

Syntetyczny peptyd odpowiadający aminokwasom 209-415 ludzkiego CuGBP2.

Application

Immunoprecypitacja z lizatu RIP:
Reprezentatywne dane partii.
Lizat RIP z komórek Jurkat (~5 X 10E7 równoważników komórek na IP) poddano immunoprecypitacji przy użyciu 5 µg normalnej mysiej IgG (nr kat. CS200621) lub 5 µg przeciwciała anty-CUGBP2 (nr kat. CS204360).
Wytrącone białka (pas 1: mysie IgG, pas 2: anty-CUGBP2) rozdzielono za pomocą elektroforezy, przeniesiono na nitrocelulozę i sondowano przeciwciałem anty-CUGBP2 (nr kat. CS204360, 1:1000). Białka wizualizowano przy użyciu zestawu One-Step IP-Western (GenScript nr kat. L00231)
Strzałka wskazuje CUGBP2 (rysunek 2).
Analiza Western Blot:
Reprezentatywne dane partii.
Lizaty z komórek HL60 sondowano poprzednią partią anty-CUGBP2 (rozcieńczenie 1:1000).
Strzałka wskazuje CUGBP2 ~56 kDa (Rysunek 3).

Kategoria badawcza
Transport białek

Epigenetyka i funkcje jądrowe

Podkategoria badawcza
Metabolizm RNA i białka wiążące

Białko wiążące RNA (RBP)

Zestaw RIPAb+ CUGBP2 -RIP Validated Antibody & Primer Set zawiera przeciwciało i specyficzne kontrolne startery PCR.

Biochem/physiol Actions

CuGBP2

Inne gatunki nie zostały jeszcze przetestowane.

Packaging

10 testów w zestawie. Zalecane użycie: ~5 μg przeciwciała na RIP (w zależności od kontekstu biologicznego).

Physical form

Anty-CUGBP2 (mysi monoklonalny), część # CS204360. Jedna fiolka zawierająca 50 µg białka A oczyszczonej mysiej monoklonalnej IgG1 w 50 µl 1X PBS, pH 7,0 i 0,1% azydku sodu, przed dodaniem 30% glicerolu. Przechowywać w temperaturze -20°C.
Normalna mysia IgG, część nr CS200621. Jedna fiolka zawierająca 125 µg oczyszczonej mysiej IgG w 125 µL buforu do przechowywania zawierającego 0,1% azydku sodu. Przechowywać w temperaturze -20°C.
Primery RIP, JUN, część nr CS203198.
Jedna fiolka zawierająca 75 μL 5 μM każdego primera specyficznego dla cDNA ludzkiego JUN.
Przechowywać w temperaturze -20°C.
FOR: TCG ACA TGG AGT CCC AGG A
REV: GGC GAT TCT CTC CAG CTT CC

Format: Oczyszczony

Oczyszczone białko A

Preparation Note

Przechowywać przez 1 rok w temperaturze -20°C od daty otrzymania.
Zalecenia dotyczące postępowania: Po otrzymaniu, a przed zdjęciem nasadki, odwirować fiolkę i delikatnie wymieszać roztwór. Rozdzielić do probówek mikrowirówkowych i przechowywać w temperaturze -20°C. Unikać powtarzających się cykli zamrażania/rozmrażania, które mogą uszkodzić IgG i wpłynąć na działanie produktu.

Analysis Note

Kontrola
Zawiera mysie przeciwciało IgG kontroli ujemnej i startery kontrolne specyficzne dla cDNA ludzkiego JUN.

RNA Binding Protein Immunoprecipitation:
RIP Lysate prepared from Jurkat cells (~5 X 10E7 cell equivalents per IP) were subjected to immunoprecipitation using 5 µg of either a normal mouse IgG (Cat. # CS200621), or 5 µg of Anti-CUGBP2 antibody (Cat. # CS204360) and the Magna RIP^® RNA-Binding Protein Immunoprecipitation Kit (Cat. # 17-700).
Successful immunoprecipitation of CUGBP2-associated RNA was verified by qPCR using RIP Primers Jun, (Cat. # CS203198) (Figure 1).
Please refer to the Magna RIP (Cat. # 17-700) or EZ-Magna RIP (Cat. # 17-701) protocol for experimental details.

Other Notes

Stężenie: Stężenie specyficzne dla danej partii można znaleźć w certyfikacie analizy.

Legal Information

MAGNA RIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

O ile nie określono inaczej w naszym katalogu lub innej dokumentacji firmy dołączonej do produktu(-ów), nasze produkty są przeznaczone wyłącznie do użytku badawczego i nie mogą być wykorzystywane do żadnych innych celów, w tym między innymi do nieautoryzowanych zastosowań komercyjnych, zastosowań diagnostycznych in vitro, zastosowań terapeutycznych ex vivo lub in vivo lub jakiegokolwiek rodzaju konsumpcji lub zastosowania u ludzi lub zwierząt.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 10 - Combustible liquids
• Co się dzieje?: WGK 2