17-663

ChIPAb+ EED - przeciwciało i zestaw primerów zweryfikowane pod kątem ChIP

from mouse

• Synonim(y): EED, białko polikombinowe EED, białko WD wiążące się z ogonami cytoplazmatycznymi integryny 1, WAIT-1
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.52
• eCl@ss: 32160702
• Clone: monoclonal
• Species reactivity: human, mouse
• Application: ChIP, IP, WB
• Citations: 11

Właściwości

• biological source: mouse
• Quality Segment: 100
• clone: monoclonal
• species reactivity: human, mouse
• manufacturer/tradename: ChIPAb+, Upstate^®
• technique(s): ChIP: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG2aκ
• NCBI accession no.: NP_003788
• UniProt accession no.: O75530
• shipped in: dry ice
• Gene Information: human ... EED(8726)

Opis

General description

Wszystkie przeciwciała ChIPAb+ są indywidualnie walidowane pod kątem wytrącania chromatyny, w każdej partii, za każdym razem. Każdy zestaw przeciwciał ChIPAb+ zawiera startery kontrolne (testowane co partię za pomocą qPCR) w celu biologicznej walidacji wyników IP w kontekście specyficznym dla locus. Protokół qPCR i sekwencje starterów są dostarczane, umożliwiając badaczom walidację protokołów ChIP przy użyciu naszego przeciwciała w kontekście chromatyny. Każdy zestaw zawiera również ujemne przeciwciało kontrolne, aby zapewnić specyficzność reakcji ChIP.
Zestaw ChIPAb+ EED zawiera przeciwciało EED dla białka polikombinowego, przeciwciało kontroli negatywnej (oczyszczone mysie IgG) oraz startery qPCR, które amplifikują region 138 bp przed ludzkim genem HoxA2. Przeciwciała EED i przeciwciała kontroli negatywnej są dostarczane w skalowalnym rozmiarze reakcji "per ChIP" i mogą być stosowane do funkcjonalnej walidacji wytrącania chromatyny związanej z EED.

~50 kDa

Immunogen

Rekombinowane białko fuzyjne pełnej długości mysiego EED znakowane MBP.

Application

Immunoprecypitacja chromatyny:
Reprezentatywne dane partii.
Sonikowaną chromatynę przygotowaną z komórek Ntera2 (3 X¹⁰⁶ równoważników komórek na IP) poddano immunoprecypitacji chromatyny przy użyciu 1 µg normalnej mysiej IgG lub przeciwciała anty-EED i zestawu Magna ChIP G Kit (nr kat. 17-611).
Pomyślna immunoprecypitacja fragmentów DNA związanych z EED została zweryfikowana przez qPCR przy użyciu starterów promotora GAPDH (negatywnych) i HoxA2 (pozytywnych) (patrz rysunki). Dane przedstawiono jako procentowy wkład każdej próbki IP w stosunku do chromatyny wejściowej dla każdego amplikonu i próbki ChIP, jak wskazano.
Szczegółowe informacje dotyczące eksperymentu można znaleźć w protokole EZ-Magna G ChIP (nr kat. 17-409) lub EZ-ChIP (nr kat. 17-371).

Analiza Western Blot:
Reprezentatywne dane partii.
Lizaty z komórek A431 zostały rozdzielone za pomocą elektroforezy, przeniesione na PVDF i sondowane anty-EED. Białka wizualizowano przy użyciu koziego przeciwciała anty-mysiego sprzężonego z HRP i detekcji chemiluminescencji (patrz rysunki).

Zestaw ChIPAb+ EED -ChIP Validated Antibody & Primer Set zawiera przeciwciało i specyficzne kontrolne startery PCR.

Research Category
Epigenetics & Nuclear Function

Research Sub Category
Chromatin Biology

Biochem/physiol Actions

Nie testowano na innych gatunkach.

Rozpoznaje EED, MW: ~50 kDa.

Packaging

25 testów w zestawie. Zalecane użycie: ~2 μg przeciwciała na immunoprecypitację chromatyny (w zależności od kontekstu biologicznego).

Physical form

Anty-EED (mysia monoklonalna IgG). Jedna fiolka zawierająca 50 μg przeciwciała oczyszczonego z białka G w 0,1 M roztworze Tris-Glicyna (pH 7,4) 150 mM NaCl, zawierającym 0,05% azydku. Może zawierać 30% glicerolu (szczegóły w certyfikacie analizy). Przechowywać w temperaturze -20°C.

Normalne mysie IgG. Dwie fiolki zawierające 25 μg oczyszczonej mysiej IgG w 25 μl buforu do przechowywania zawierającego 0,1% azydku sodu. Przechowywać w temperaturze -20°C.

Primery ChIP, HoxA2 upstream. Jedna fiolka zawierająca 75 μL po 5 μM każdego primera specyficznego dla regionu promotora ludzkiego HoxA2. Przechowywać w temperaturze -20°C.
FOR: AGG AAA GAT TTT GGT TGG GAA G
REV: AAA AAG AGG GAA AGG GAC AGA C

Format: Oczyszczony

Preparation Note

Przechowywać przez 1 rok w temperaturze -20°C od daty otrzymania. Zalecenia dotyczące postępowania: Po pierwszym rozmrożeniu, a przed zdjęciem korka, odwirować fiolkę i delikatnie wymieszać roztwór. Rozdzielić do probówek mikrowirówkowych i przechowywać w temperaturze -20°C. Unikać powtarzających się cykli zamrażania/rozmrażania, które mogą uszkodzić IgG i wpłynąć na działanie produktu. Uwaga: Zmienność temperatur w zamrażarce poniżej -20°C może powodować zamarzanie roztworów zawierających glicerol podczas przechowywania.

Analysis Note

Kontrola
Zawiera mysie przeciwciało IgG kontroli ujemnej i startery specyficzne dla ludzkiego regionu HoxA2.

Chromatin Immunoprecipitation:
Sonicated chromatin prepared from Ntera2 cells (3 X 10⁶ cell equivalents per IP) were subjected to chromatin immunoprecipitation using 2 µg of either a normal mouse IgG, or Anti-EED antibody and the Magna ChIP^® G Kit (Cat. # 17-611).
Successful immunoprecipitation of EED-associated DNA fragments was verified by qPCR using Control Primers (Please see figures).
Please refer to the EZ-Magna ChIP G (Cat. # 17-409) or EZ-ChIP (Cat. # 17-371) protocol for experimental details.

Other Notes

Stężenie: Stężenie specyficzne dla danej partii można znaleźć w certyfikacie analizy.

Legal Information

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 10 - Combustible liquids
• WGK: WGK 3