2170

ChemiBLOCKER

• Synonim(y): Odczynnik blokujący
• eCl@ss: 42029053
• UNSPSC Code: 41116010
• NACRES: NA.32

Właściwości

• packaging: pkg of 1 L
• manufacturer/tradename: ChemiBlock, Chemicon^®
• technique(s): ELISA: suitable, immunohistochemistry: suitable, western blot: suitable
• shipped in: wet ice

Opis

General description

ChemiBLOCKER jest unikalnym środkiem blokującym błony. Jako bloker białek pochodzenia niezwierzęcego stanowi alternatywę dla środków blokujących na bazie mleka, minimalizując ryzyko niespecyficznego wiązania przeciwciał z błoną i obniżając tło. ChemiBLOCKER może być stosowany w rozcieńczeniach nawet 20x, ale dla większości zastosowań odpowiednie jest rozcieńczenie 5 do 10 razy. ChemiBLOCKER nie zawiera biotyny i nie zakłóca działania systemów detekcji ABC. ChemiBLOCKER zawiera fosforany i może nie być odpowiedni do stosowania z niektórymi przeciwciałami fosfospecyficznymi.

Powiązane produkty:
- BLOT-QuickBlocker Nowe białko blokujące, które wytwarza półprzezroczysty roztwór. Umożliwia to użytkownikom sprawdzenie membran blot podczas procedury blokowania. 200 g Numer katalogowy 2080
- Bufor do płukania Femto/TBST (10X) 250 ml Numer katalogowy 2081

Wymagane materiały:
- 1X femto/TBST (numer katalogowy 2081), 1X TBST lub 1X PBST
- przeciwciała pierwotne i wtórne
- odczynniki do immunodetekcji

Application

Western Blot

ELISA

PROTOKÓŁ:

1. Przygotować roztwór blokujący mieszając 1 część ChemiBLOCKER z 1 częścią 1X femto-TBST/PBST (TBST lub PBST również działają) do blokowania membran PVDF. W przypadku membran nitrocelulozowych zmieszaj 1 część ChemiBLOCKER z 3 częściami 1X femto-TBST (TBST lub PBST również działają). Uwaga: ChemiBLOCKER może być używany w wielu różnych rozcieńczeniach, może być konieczna pewna optymalizacja. ChemiBLOCKER NIE jest zalecany do badań fosfobiałkowych, ponieważ zawiera fosforylowane białka.

2. Inkubować membranę w roztworze blokującym (10-20 ml) przez 60 minut w temperaturze pokojowej z wytrząsaniem w plastikowej torbie zamykanej termicznie.

3. Przygotować bufor do rozcieńczania przeciwciał (ADB). Dla membran PVDF zmieszać 1 część ChemiBLOCKER z 3 częściami 1X femto-TBST/PBST (TBST lub PBST również działają). Inkubować membranę w 5-10 ml pierwotnego przeciwciała, odpowiednio rozcieńczonego ADB, przez 90 minut w temperaturze pokojowej z wytrząsaniem.

4. Płukać membranę 3 razy w 50 ml 1X femto-TBST (TBST lub PBST również działają) przez 5 minut za każdym razem w temperaturze pokojowej z wytrząsaniem.

5. Inkubować membranę w 5-10 ml przeciwciała wtórnego, odpowiednio rozcieńczonego ADB, przez 90 minut w temperaturze pokojowej z wytrząsaniem.

6. Przemyć membranę jak w kroku #4, ale dodać jedno dodatkowe płukanie (łącznie 4 płukania).

7. Przepłukać membranę 3 razy szybko (30 sekund) w 50 ml czystej wody dejonizowanej za każdym razem, a następnie przetworzyć blot, używając systemu detekcji femto-LUCENT (lub ulubionego systemu).

Packaging

Wystarcza na 100 mini blotów żelowych

Physical form

2-krotny roztwór białek pochodzenia niezwierzęcego w 2 mM TRIS, pH 8,5, 100 mM NaCl, 0,001% Tween-20 i 0,08% Kathon dodany jako środek konserwujący.

Preparation Note

Składniki zestawu należy przechowywać w temperaturze 2-8°C przez okres do 1 roku od daty zakupu. Ogrzać ChemiBLOCKER do temperatury pokojowej i dokładnie wymieszać przed dozowaniem. Aby uniknąć możliwego skażenia mikrobiologicznego, wszystkie roztwory należy dozować aseptycznie. Z czasem związki fenolowe mogą wytrącać się z roztworu, powodując powstawanie niewielkiej ilości ciemnobrązowych lub czarnych cząstek stałych na dnie pojemnika. Materiał ten nie wpływa na działanie związku blokującego.

Other Notes

2X ChemiBLOCKER 1 L

Legal Information

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 12 - Non Combustible Liquids
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable