APT429
CaspaTag Caspase 9 In Situ Assay Kit, fluoresceina
The CaspaTag Caspase-9 In Situ Assay Kit, Fluorescein for flow cytometry is a fluorescent-based assay for detection of active caspase-9 in cells undergoing apoptosis.
Zaloguj się, aby wyświetlić ceny organizacyjne i kontraktowe.
Wybierz wielkość
Zmień widok
Informacje o tej pozycji
UNSPSC Code:
12161503
NACRES:
NA.54
eCl@ss:
32161000
Pomoc techniczna
Potrzebujesz pomocy? Nasz zespół doświadczonych naukowców chętnie Ci pomoże.
Pozwól nam pomócQuality Segment
species reactivity (predicted by homology)
mammals
manufacturer/tradename
CaspaTag, Chemicon®
technique(s)
activity assay: suitable, flow cytometry: suitable
NCBI accession no.
UniProt accession no.
detection method
fluorometric
shipped in
wet ice
General description
Apoptoza jest zachowaną ewolucyjnie formą samobójstwa komórek, które następuje w wyniku wyspecjalizowanego procesu komórkowego. Centralnym elementem tego procesu jest kaskada enzymów proteolitycznych zwanych kaspazami. Enzymy te uczestniczą w serii reakcji, które są wyzwalane w odpowiedzi na sygnały proapoptotyczne i powodują rozszczepienie substratów białkowych, powodując demontaż komórki1.
Kaspazy zostały zidentyfikowane w organizmach od C. elegans do ludzi. Kaspazy ssaków odgrywają różne role w apoptozie i stanach zapalnych. W apoptozie, kaspazy są odpowiedzialne za proteolityczne rozszczepienia, które prowadzą do demontażu komórki (kaspazy efektorowe) i są zaangażowane w poprzedzające zdarzenia regulacyjne (kaspazy inicjatorowe). Aktywna kaspaza składa się z dwóch dużych i dwóch małych podjednostek, które tworzą dwa heterodimery, które łączą się w tetramer2-4. Podobnie jak inne proteazy, kaspazy są syntetyzowane jako prekursory, które ulegają dojrzewaniu proteolitycznemu, autokatalitycznie lub w kaskadzie przez enzymy o podobnej specyficzności5.
Enzymy kaspazowe specyficznie rozpoznają sekwencję 4 lub 5 aminokwasów na docelowym substracie, który koniecznie zawiera resztę kwasu asparaginowego. Reszta ta jest celem rozszczepienia, które zachodzi na karbonylowym końcu reszty kwasu asparaginowego6. Kaspazy mogą być wykrywane poprzez immunoprecypitację, techniki immunoblottingu z wykorzystaniem przeciwciał specyficznych dla kaspaz lub poprzez zastosowanie substratów fluorochromowych, które stają się fluorescencyjne po rozszczepieniu przez kaspazę.
Kaspazy zostały zidentyfikowane w organizmach od C. elegans do ludzi. Kaspazy ssaków odgrywają różne role w apoptozie i stanach zapalnych. W apoptozie, kaspazy są odpowiedzialne za proteolityczne rozszczepienia, które prowadzą do demontażu komórki (kaspazy efektorowe) i są zaangażowane w poprzedzające zdarzenia regulacyjne (kaspazy inicjatorowe). Aktywna kaspaza składa się z dwóch dużych i dwóch małych podjednostek, które tworzą dwa heterodimery, które łączą się w tetramer2-4. Podobnie jak inne proteazy, kaspazy są syntetyzowane jako prekursory, które ulegają dojrzewaniu proteolitycznemu, autokatalitycznie lub w kaskadzie przez enzymy o podobnej specyficzności5.
Enzymy kaspazowe specyficznie rozpoznają sekwencję 4 lub 5 aminokwasów na docelowym substracie, który koniecznie zawiera resztę kwasu asparaginowego. Reszta ta jest celem rozszczepienia, które zachodzi na karbonylowym końcu reszty kwasu asparaginowego6. Kaspazy mogą być wykrywane poprzez immunoprecypitację, techniki immunoblottingu z wykorzystaniem przeciwciał specyficznych dla kaspaz lub poprzez zastosowanie substratów fluorochromowych, które stają się fluorescencyjne po rozszczepieniu przez kaspazę.
Application
CHEMICON® CaspaTag Caspase-9 In Situ Assay Kit, Fluorescein to fluorescencyjny test do wykrywania aktywnej kaspazy-9 w komórkach ulegających apoptozie. Zestaw jest przeznaczony wyłącznie do użytku badawczego. Nie jest przeznaczony do stosowania w procedurach diagnostycznych lub terapeutycznych.
Zasada testu
Zestawy CHEMICON ′s CaspaTag Caspase-9 In Situ Assay wykorzystują nowatorskie podejście do wykrywania aktywnych kaspaz. Metodologia opiera się na fluorochromowych inhibitorach kaspaz (FLICA). Inhibitory są przepuszczalne dla komórek i nie są cytotoksyczne. Po wejściu do komórki inhibitor wiąże się kowalencyjnie z aktywną kaspazą 7. Ten zestaw wykorzystuje znakowany karboksyfluoresceiną fluorometyloketonowy peptydowy inhibitor kaspazy-9 (FAM-LEHD-FMK), który wytwarza zieloną fluorescencję. Po dodaniu do populacji komórek, sonda FAM-LEHD-FMK wchodzi do każdej komórki i kowalencyjnie wiąże się z reaktywną resztą cysteiny, która znajduje się na dużej podjednostce aktywnego heterodimeru kaspazy, hamując w ten sposób dalszą aktywność enzymatyczną. Związany znakowany odczynnik jest zatrzymywany w komórce, podczas gdy niezwiązany odczynnik dyfunduje z komórki i jest wypłukiwany. Zielony sygnał fluorescencyjny jest bezpośrednią miarą ilości aktywnej kaspazy-9 obecnej w komórce w momencie dodania odczynnika. Komórki zawierające związany znakowany odczynnik mogą być analizowane za pomocą fluorometrii opartej na płytkach 96-dołkowych, mikroskopii fluorescencyjnej lub cytometrii przepływowej.
Zasada testu
Zestawy CHEMICON ′s CaspaTag Caspase-9 In Situ Assay wykorzystują nowatorskie podejście do wykrywania aktywnych kaspaz. Metodologia opiera się na fluorochromowych inhibitorach kaspaz (FLICA). Inhibitory są przepuszczalne dla komórek i nie są cytotoksyczne. Po wejściu do komórki inhibitor wiąże się kowalencyjnie z aktywną kaspazą 7. Ten zestaw wykorzystuje znakowany karboksyfluoresceiną fluorometyloketonowy peptydowy inhibitor kaspazy-9 (FAM-LEHD-FMK), który wytwarza zieloną fluorescencję. Po dodaniu do populacji komórek, sonda FAM-LEHD-FMK wchodzi do każdej komórki i kowalencyjnie wiąże się z reaktywną resztą cysteiny, która znajduje się na dużej podjednostce aktywnego heterodimeru kaspazy, hamując w ten sposób dalszą aktywność enzymatyczną. Związany znakowany odczynnik jest zatrzymywany w komórce, podczas gdy niezwiązany odczynnik dyfunduje z komórki i jest wypłukiwany. Zielony sygnał fluorescencyjny jest bezpośrednią miarą ilości aktywnej kaspazy-9 obecnej w komórce w momencie dodania odczynnika. Komórki zawierające związany znakowany odczynnik mogą być analizowane za pomocą fluorometrii opartej na płytkach 96-dołkowych, mikroskopii fluorescencyjnej lub cytometrii przepływowej.
CaspaTag Caspase-9 In Situ Assay Kit, Fluorescein do cytometrii przepływowej to oparty na fluorescencji test do wykrywania aktywnej kaspazy-9 w komórkach poddawanych apoptozie.
Research Category
Apoptosis & Cancer
Apoptosis & Cancer
Preparation Note
- Nieotwarte materiały zestawu należy przechowywać w temperaturze 2-8°C do daty ich ważności.
- Odtworzony odczynnik FLICA (150X) należy zamrozić w temperaturze -20°C na okres do 6 miesięcy i w tym czasie można go dwukrotnie rozmrozić. W razie potrzeby rozdzielić do oddzielnych bursztynowych probówek. Chronić przed światłem przez cały czas.
- Przechowywać rozcieńczony (1X) bufor płuczący w temperaturze do -20°C przez 2 tygodnie.
- Odtworzony odczynnik FLICA (150X) należy zamrozić w temperaturze -20°C na okres do 6 miesięcy i w tym czasie można go dwukrotnie rozmrozić. W razie potrzeby rozdzielić do oddzielnych bursztynowych probówek. Chronić przed światłem przez cały czas.
- Przechowywać rozcieńczony (1X) bufor płuczący w temperaturze do -20°C przez 2 tygodnie.
Other Notes
FLICA Reagent (FAM-LEHD-FMK): One lyophilized vial
10X Wash Buffer: 15 mL
Fixative: 6 mL
Propidium Iodide: 1 mL at 250 μg/mL, ready-to-use
Hoechst Stain: 1 mL at 200 μg/mL, ready-to-use
10X Wash Buffer: 15 mL
Fixative: 6 mL
Propidium Iodide: 1 mL at 250 μg/mL, ready-to-use
Hoechst Stain: 1 mL at 200 μg/mL, ready-to-use
Legal Information
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Disclaimer
Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.
Still not finding the right product?
Explore all of our products under CaspaTag Caspase 9 In Situ Assay Kit, fluoresceina
signalword
Danger
Hazard Classifications
Acute Tox. 3 Inhalation - Acute Tox. 4 Dermal - Acute Tox. 4 Oral - Carc. 1B - Eye Irrit. 2 - Muta. 2 - Skin Irrit. 2 - Skin Sens. 1 - STOT SE 2 - STOT SE 3
target_organs
Eyes,Central nervous system, Respiratory system
Klasa składowania
6.1C - Combustible acute toxic Cat.3 / toxic compounds or compounds which causing chronic effects
Certyfikaty analizy (CoA)
Poszukaj Certyfikaty analizy (CoA), wpisując numer partii/serii produktów. Numery serii i partii można znaleźć na etykiecie produktu po słowach „seria” lub „partia”.
Masz już ten produkt?
Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.