CBA054

Zestaw do oznaczania aktywności kalpainy 1/2 InnoZyme

• NACRES: NA.84
• UNSPSC Code: 41116133

Właściwości

• usage: sufficient for 96 tests
• Quality Segment: 100
• packaging: pkg of 1 96-well plate(s)
• manufacturer/tradename: Calbiochem^®
• storage condition: OK to freeze
• assay range: standard curve range: 63-1000 ng/mL; (as measured with purified human calpain 1)
• input: sample type tissue extract(s); sample type cell lysate
• detection method: fluorometric
• shipped in: wet ice

Opis

General description

Wysoce czuły i specyficzny test do pomiaru aktywności kalpain 1 i 2 w próbkach biologicznych, takich jak lizat komórkowy lub ekstrakty tkankowe oraz do badań przesiewowych inhibitorów enzymów. Kalpainy (zależne od jonów wapnia papainopodobne proteazy cysteinowe) są szeroko rozpowszechnione we wszystkich komórkach ssaków. Pośredniczą w indukowanej wapniem aktywacji szlaku MAPK Erk1/Erk2 i uważa się, że uczestniczą w wewnątrzkomórkowym przetwarzaniu sygnału poprzez ograniczoną proteolizę swoich celów.

- Czuły: wykrywa aktywność kalpainy przy 63-1000 ng/ml
- Specyficzny: substrat i inhibitor zoptymalizowany do specyficznego wykrywania aktywności kalpainy
- Wszechstronny: jednorodny 96-dołkowy format może być używany z próbkami biologicznymi lub do badań przesiewowych inhibitorów
- Wygodny: Zawiera wszystkie odczynniki do oznaczania próbek w ciągu 30 minut

Biochem/physiol Actions

Zestaw Calbiochem InnoZyme Calpain 1 & 2 Activity Kit jest przeznaczony do pomiaru aktywności kalpain 1 i 2 w próbkach biologicznych, takich jak lizaty komórkowe lub ekstrakty tkankowe oraz do badań przesiewowych inhibitorów enzymów.

Preparation Note

Uwaga: Kalpaina jest enzymem wrażliwym na temperaturę. Rozcieńczenia kontroli kalpainy muszą być przygotowywane przy użyciu schłodzonego buforu testowego i przechowywane w lodzie przez cały czas.Wytyczne dotyczące przygotowania próbek:- Zalecane stężenie białka dla lizatów komórkowych wynosi ≥2 mg/ml, jak określono przy użyciu standardowego testu białkowego (np. testu Non-Interfering Protein Assay, nr kat. 488250 lub testu białkowego BCA, nr kat. 488250). No. 488250 lub BCA Protein Assay, Cat. Nr kat. 71285) - Zalecany współczynnik rozcieńczenia dla lizatów komórkowych o stężeniu białka ≥2 mg/ml wynosi ~5 lub więcej.

Wszystkie odczynniki niezbędne do przeprowadzenia testu są dostarczane wraz z zestawem. Wszystkie odczynniki (z wyjątkiem kontroli kalpainy i buforu testowego) należy ogrzać do temperatury pokojowej (15-25°C) tuż przed użyciem. Poniższe wytyczne dotyczące przygotowania odczynników zapewnią wystarczającą objętość dla jednej 96-dołkowej płytki.- Kontrola, ludzka kalpaina 1, rozcieńczona: Rozcieńczyć kontrolę, ludzką kalpainę 1 100-400-krotnie schłodzonym buforem testowym; utrzymywać w lodzie przez cały czas.- Bufor aktywacyjny z czynnikiem redukującym: Dodać 80 µl czynnika redukującego do 9,92 ml buforu aktywacyjnego.- Substrat (1X): Rozcieńczyć substrat 1:25 dodając 200 µl substratu do 4,8 ml buforu testowego- Inhibitor (1X): Rozcieńczyć inhibitor w następujący sposób:1. Rozcieńczyć inhibitor w stosunku 1:50, dodając 2 µl inhibitora do 98 µl buforu testowego2. Dodać 50 µl rozcieńczenia 1:50 (krok 1) do 4,95 ml buforu aktywacyjnego z czynnikiem redukującym.

Po dostarczeniu przechowywać kontrolę, ludzką kalpainę 1 w temperaturze -70°C, a pozostałe składniki w temperaturze -20°C. Wszystkie składniki zestawu po otwarciu mogą być przechowywane do 3 miesięcy w następujących warunkach:

Przechowywać w lodówce (4°C): Bufor testowy, bufor aktywacyjny, substrat, inhibitor i płytka 96-dołkowa.

Zamrażarka (-20°C): Czynnik redukujący

Zamrażarka (-70°C): Kontrola, ludzka kalpaina 1



Uwaga: Po pierwszym użyciu kontrolę, ludzką kalpainę 1 należy rozdzielić na podwielokrotności i przechowywać w temperaturze -70°C. Unikać cykli zamrażania/rozmrażania.

Analysis Note

Kontrola pozytywna
Kalpaina 1

Other Notes

Higuchi, M., et al. 2005. J. Biol. Chem.280, 15229;
Tompa, P., et al. 2004. J. Biol. Chem.279, 20775;
Veeranna, et al. 2004. Am. J. Pathol.165, 795;
Dainese, E., et al. 2002. J. Biol. Chem.277, 40296;
Wang, K.K., et al. 2000. Trends Neurosci.23, 20;
Black, R.A., et al. 1997. Nature385, 729;
Molinari, M. and Carafoli, E. 1997. J. Membr. Biol.156, 1;
Sorimachi, H., et al. 1997. Biochem. J.328, 721.

96-Well Plate, Calpain 1 Control, Substrate, Assay Buffer, Activation Buffer, Inhibitor, Reducing Agent, Plate Sealer and a user protocol.

Legal Information

CALBIOCHEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Toksyczność: Drażniący (B)

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Piktogramy: GHS08
• Słowo ostrzegawcze: Danger
• Kody zagrożeń: H360D
• Ostrzeżenia: P201 - P202 - P280 - P308 + P313 - P405 - P501
• Hazard Classifications: Repr. 1B
• Klasa składowania: 6.1C - Combustible acute toxic Cat.3 / toxic compounds or compounds which causing chronic effects
• Co się dzieje?: WGK 3