CC1034
ADAMTS-5, rekombinowany ludzki skrócony
Synonim(y):
Aggrecanase 2
Zaloguj się, aby wyświetlić ceny organizacyjne i kontraktowe.
Informacje o tej pozycji
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.42
eCl@ss:
32160405
Form:
liquid
Biological source:
human
biological source
human
form
liquid
manufacturer/tradename
Chemicon®
concentration
>50% (truncated ADAMTS-5 of total protein of the preparation, SDS-PAGE), 0.1 mg/mL (total protein concentration), 0.1 mg/mL
NCBI accession no.
UniProt accession no.
shipped in
dry ice
storage temp.
-65 to -96°C
Gene Information
human ... ADAMTS5(11096)
General description
ADAMTS (a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motif) to wielodomenowe proteinazy zewnątrzkomórkowe, zawierające co najmniej jedno powtórzenie trombospondyny typu 1 (Tang, 2001). Enzymy te biorą udział w przetwarzaniu białek macierzy zewnątrzkomórkowej i białek w krążeniu. ADAMTS-5 został po raz pierwszy oczyszczony z pożywki kondycjonowanej chrząstki nosowej bydła, a ludzki ADAMTS-5 cDNA został sklonowany z biblioteki cDNA ludzkiej wątroby (Abbaszade, I. i in., 1999). ADAMTS-5 składa się z prodomeny, domeny katalitycznej, domeny dezintegrującej, motywu trombospondyny typu 1, regionu bogatego w Cys, po którym następuje sekwencja dystansowa i podmotyw trombospondyny. Prodomena jest najprawdopodobniej odcinana przez enzym typu furin, zanim ADAMTS-5 zostanie uwolniony z komórek. ADAMTS-5 ulega konstytutywnej ekspresji w błonie maziowej (Vankemmelbeke, MN. et al, 2001) i degraduje agrekan, główny proteoglikan chrząstki stawowej. Podobnie jak ADAMTS4, inny członek rodziny ADAMTS, ADAMTS-5 rozszczepia agrekan w 5 miejscach (Tortorella, MD. i in., 2002). Cztery miejsca rozszczepienia znajdują się w regionie bogatym w siarczan chondroityny pomiędzy domenami globularnymi agrekanu G2 i G3, podczas gdy jedno miejsce znajduje się w polipeptydzie w kształcie pręta pomiędzy domenami globularnymi G1 i G2. Ponadto ADAMTS-5 rozszczepia jeszcze jedno miejsce w regionie bogatym w siarczan chondroityny, które nie jest rozszczepiane przez ADAMTS4 (Tortorella, MD. et al, 2002). ADAMTS-5 jest hamowany przez TIMP 3 (Kashigawa, M. i in., 2001) i a2-makroglobulinę (Tortorella, MD. i in., 2004).
Postać molekularna: Rekombinowany ludzki ADAMTS-5 D625-930 jest wytwarzany przy użyciu systemu ekspresji bakulowirusów i oczyszczany z supernatantów hodowli komórek owadzich. Białko zawiera domenę katalityczną, domenę dezintegryny i motyw trombospondyny typu 1 pełnej długości ADAMTS-5, a następnie C-końcowy tag His6. Obliczony Mr sekwencji aminokwasowej wynosi 40,8 kDa. W SDS-PAGE białko wykazuje Mr około 50 kDa.
AKTYWNOŚĆ:
Aktywność agrekanazy preparatu ADAMTS-5 określa się za pomocą rekombinowanej domeny międzyglobularnej agrekanu (Aggrecan-IGD firmy Chemicon). ADAMTS-5 hydrolizuje miejsce "agrekanazy" w tej domenie (wiązanie peptydowe E373 -A374 w ludzkim agrekanie). Rekombinowany substrat jest inkubowany w stężeniu 0,1 μM z ADAMTS-5 w 50 mM Tris-HCl, pH 7,5, 150 mM NaCl, 5 mM CaCl2, 1 μM leupeptyny, 1 μM pepstatyny, 1 mM Pefabloc, 0,05 % Brij 35 przez 15 minut w temperaturze 37 °C. Rozszczepienie substratu w miejscu "aggrecanase" szacuje się na podstawie pojawienia się fragmentu hydrolizy z nowym N-końcem ARGSVIL. Fragment jest oznaczany ilościowo za pomocą dwóch przeciwciał monoklonalnych. W określonych warunkach szybkość hydrolizy wynosi >0,5 mola zhydrolizowanego substratu/ min. ml preparatu ADAMTS-5 lub >5 moli zhydrolizowanego substratu/ min. mg.
Inhibitory: ADAMTS-5 jest hamowany przez tkankowy inhibitor metaloproteinazy macierzy 3 (TIMP3) i alfa2-makroglobulinę. Aktywność enzymu jest również hamowana przez chelatory kationów dwuwartościowych, takie jak EDTA i syntetyczne inhibitory metaloproteinaz.
Postać molekularna: Rekombinowany ludzki ADAMTS-5 D625-930 jest wytwarzany przy użyciu systemu ekspresji bakulowirusów i oczyszczany z supernatantów hodowli komórek owadzich. Białko zawiera domenę katalityczną, domenę dezintegryny i motyw trombospondyny typu 1 pełnej długości ADAMTS-5, a następnie C-końcowy tag His6. Obliczony Mr sekwencji aminokwasowej wynosi 40,8 kDa. W SDS-PAGE białko wykazuje Mr około 50 kDa.
AKTYWNOŚĆ:
Aktywność agrekanazy preparatu ADAMTS-5 określa się za pomocą rekombinowanej domeny międzyglobularnej agrekanu (Aggrecan-IGD firmy Chemicon). ADAMTS-5 hydrolizuje miejsce "agrekanazy" w tej domenie (wiązanie peptydowe E373 -A374 w ludzkim agrekanie). Rekombinowany substrat jest inkubowany w stężeniu 0,1 μM z ADAMTS-5 w 50 mM Tris-HCl, pH 7,5, 150 mM NaCl, 5 mM CaCl2, 1 μM leupeptyny, 1 μM pepstatyny, 1 mM Pefabloc, 0,05 % Brij 35 przez 15 minut w temperaturze 37 °C. Rozszczepienie substratu w miejscu "aggrecanase" szacuje się na podstawie pojawienia się fragmentu hydrolizy z nowym N-końcem ARGSVIL. Fragment jest oznaczany ilościowo za pomocą dwóch przeciwciał monoklonalnych. W określonych warunkach szybkość hydrolizy wynosi >0,5 mola zhydrolizowanego substratu/ min. ml preparatu ADAMTS-5 lub >5 moli zhydrolizowanego substratu/ min. mg.
Inhibitory: ADAMTS-5 jest hamowany przez tkankowy inhibitor metaloproteinazy macierzy 3 (TIMP3) i alfa2-makroglobulinę. Aktywność enzymu jest również hamowana przez chelatory kationów dwuwartościowych, takie jak EDTA i syntetyczne inhibitory metaloproteinaz.
Application
Badania funkcjonalne
Degradacja proteoglikanów macierzy zewnątrzkomórkowej
Badania przesiewowe i charakterystyka inhibitorów
Standard w testach enzymatycznych i immunologicznych
Optymalne rozcieńczenia robocze muszą być określone przez użytkownika końcowego.
Degradacja proteoglikanów macierzy zewnątrzkomórkowej
Badania przesiewowe i charakterystyka inhibitorów
Standard w testach enzymatycznych i immunologicznych
Optymalne rozcieńczenia robocze muszą być określone przez użytkownika końcowego.
Physical form
Rozpuszczony w 50 mM Tris-HCl, pH 7,5, 150 mM NaCl, 5 mM CaCl2, 50 mM imidazolu, 0,05% Brij-35.
Preparation Note
Przechowywać w temperaturze -70°C przez 12 miesięcy od daty otrzymania. Enzym może być przechowywany w temperaturze -20°C przez kilka tygodni i w lodzie przez kilka dni. Unikać powtarzających się cykli zamrażania/rozmrażania.
Legal Information
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Disclaimer
Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.
Słowo ostrzegawcze
Danger
Kody zagrożeń
Hazard Classifications
Repr. 1B
Klasa składowania
6.1D - Non-combustible acute toxic Cat.3 / toxic hazardous materials or hazardous materials causing chronic effects
Co się dzieje?
WGK 1
Wykazy regulacyjne
Wykazy regulacyjne dotyczą głównie produktów chemicznych. Można w nich podawać ograniczoną liczbę informacji na temat produktów niechemicznych. Brak wpisu oznacza, że żaden ze składników nie znajduje się w wykazie. Użytkownik odpowiada za zagwarantowanie bezpiecznego i zgodnego z prawem stosowania produktu.
288-32-4
CAS No.
Wybierz jedną z najnowszych wersji:
Masz już ten produkt?
Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.