ECM105

Millicoat^® Paski powlekane ludzkim kolagenem typu IV (96-dołkowe)

96-well plate coated with human Collagen Type IV used for cell adhesion studies.

• Synonim(y): Formerly under the CytoMatrix ™ brand name.
• UNSPSC Code: 12352202
• eCl@ss: 32161000
• NACRES: NA.75
• Biological source: human
• Form: lyophilized
• Technique(s): activity assay: suitable, cell based assay: suitable

Właściwości

• biological source: human
• Quality Segment: 100
• form: lyophilized
• species reactivity: human
• manufacturer/tradename: Chemicon^®, Millicoat^®
• technique(s): activity assay: suitable, cell based assay: suitable
• input: sample type: mouse embryonic stem cell(s); sample type hematopoietic stem cell(s); sample type epithelial cells; sample type neural stem cell(s); sample type induced pluripotent stem cell(s); sample type pancreatic stem cell(s); sample type mesenchymal stem cell(s); sample type: human embryonic stem cell(s)
• NCBI accession no.: NM_001845.4
• UniProt accession no.: P02462
• detection method: colorimetric
• shipped in: wet ice
• storage temp.: 2-8°C
• Gene Information: human ... COL4A1(1282)

Opis

General description

Adhezja komórek odgrywa ważną rolę w komunikacji i regulacji komórkowej oraz ma fundamentalne znaczenie dla rozwoju i utrzymania tkanek. Naukowcy nieustannie badają adhezję i migrację wielu różnych typów komórek na różnych białkach składowych macierzy zewnątrzkomórkowej (ECM). Paski Millicoat Cell Adhesion Strips są dostarczane jako 12 x 8-dołkowe wymienne paski w ramce płytki dla wygody i elastyczności w projektowaniu testów. Studzienki w rzędach A - G zostały pokryte ludzkim kolagenem typu IV. Rząd H każdego paska jest pokryty BSA, który służy jako negatywna kontrola testu. Komórki są wysiewane na powlekane podłoże. Następnie przylegające komórki są utrwalane i barwione. Względne przyleganie jest określane przy użyciu odczytów absorbancji.

Application

PROCEDURA:

UWAGA: Optymalny czas i wydajność testu mogą się różnić dla różnych linii komórkowych, ale ogólnie można je uzyskać przy użyciu subkonfluentnych hodowli komórkowych w teście opisanym poniżej. Hodowle subkonfluentne można uzyskać dzieląc komórki na 1 do 2 dni przed wykonaniem testu.

1. Nawodnić paski za pomocą 200 ml PBS na studzienkę przez co najmniej 15 minut w temperaturze pokojowej. Usunąć PBS z nawodnionych pasków.

2. Przygotować zawiesinę pojedynczych komórek, najlepiej przy użyciu nieenzymatycznego buforu dysocjacyjnego. Optymalną gęstość komórek można określić poprzez miareczkowanie komórek. Typowy zakres początkowy wynosi od 1x10E05 do 1x10E07 komórek/ml.

3. Dodaj 100 ml rozcieńczonej zawiesiny komórek do każdego dołka. Inkubować płytkę w temperaturze 37°C przez 45 minut w inkubatorze CO2. Delikatnie przepłucz płytkę 2-3 razy PBS zawierającym Ca2+/Mg2+ (200 ml/basenik).

4. Dodaj 100 ml 0,2% fioletu krystalicznego w 10% etanolu do każdego dołka. Inkubować przez 5 minut w temperaturze pokojowej. Usunąć barwnik ze studzienek. Delikatnie przepłucz paski 3-5 razy PBS (300 ml/basenik), aby usunąć nadmiar barwnika.

5. Dodać 100 ml buforu solubilizacyjnego (mieszanina 50/50 0,1M NaH2PO4, pH 4,5 i 50% etanolu) do każdego dołka. Pozostawić paski do inkubacji i delikatnie wstrząsać w temperaturze pokojowej, aż barwnik związany z komórkami zostanie całkowicie rozpuszczony; około 5 minut.

6. Określić absorbancję przy 540 - 570 nm na czytniku mikropłytek.

Research Category
Cell Structure

Packaging

96 studni

Preparation Note

Paski można przechowywać w temperaturze 2-8°C w torebce foliowej przez co najmniej 3 miesiące. Niewykorzystane paski można umieścić z powrotem w saszetce w celu przechowywania. Należy upewnić się, że środek osuszający pozostaje w saszetce, a saszetka jest bezpiecznie zamknięta.

Legal Information

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

MILLICOAT is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 11 - Combustible Solids
• Co się dzieje?: WGK 3
• Temperatura zapłonu (°F): Not applicable
• Temperatura zapłonu (°C): Not applicable