PF063

MMP-3, proenzym, ludzki, rekombinowany

• Numer WE: 3.4.24.17 (BRENDA, IUBMB)
• NACRES: NA.77
• UNSPSC Code: 12352202
• Assay: ≥95% (SDS-PAGE)

Właściwości

• assay: ≥95% (SDS-PAGE)
• Quality Segment: 100
• form: lyophilized
• manufacturer/tradename: Calbiochem^®
• storage condition: OK to freeze, avoid repeated freeze/thaw cycles
• solubility: water: soluble
• shipped in: wet ice
• storage temp.: −70°C

Opis

General description

Rekombinowany ludzki pro-MMP-3 oczyszczony z supernatantu hodowli komórkowej. Może być stosowany jako kontrola pozytywna lub standard do analizy zymograficznej lub testu substratowego. Wymaga aktywacji do immunoblottingu przed użyciem. M.W. 57000/58000.



Metaloproteinazy macierzy (MMP) to rodzina enzymów odpowiedzialnych za degradację składników macierzy zewnątrzkomórkowej, takich jak kolagen, laminina i proteoglikany. Oprócz homologii sekwencji, wszystkie MMP mają następujące cechy: mechanizm katalityczny zależy od jonu cynku w centrum aktywnym, rozszczepiają jeden lub więcej składników macierzy zewnątrzkomórkowej, są wydzielane jako zymogeny, które są aktywowane przez usunięcie segmentu o masie około 10 kDa z końca N i są hamowane przez tkankowy inhibitor metaloproteinaz (TIMP). Enzymy te są zaangażowane w normalne procesy fizjologiczne, takie jak embriogeneza i przebudowa tkanek, i mogą odgrywać ważną rolę w angiogenezie, zapaleniu stawów, zapaleniu przyzębia i przerzutach. Metaloproteinaza macierzy-3 (MMP-3) znana również jako stromelizyna-1 i transyna (EC 3.4.24.17) rozszczepia szereg substratów, w tym proteoglikan chrząstki, kolageny typu II, III, IV, V i IX, fibronektynę, lamininę i może aktywować MMP 1. MMP-3 jest wydzielana jako proenzymy ~57 i ~59 kDa i może być aktywowana in vitro przez organomercuriale (np, octan 4 aminofenylomocznika, APMA) oraz in vivo przez proteazy poprzez formy pośrednie do aktywnego enzymu MMP 3 o masie 45 kDa. Może również wystąpić dalsza autoliza do formy ~28 kDa. Uważa się, że MMP-3 odgrywa ważną rolę w patofizjologicznych procesach degradacji związanych z takimi schorzeniami jak reumatoidalne zapalenie stawów i inwazja komórek nowotworowych.

Application

Immunoblotting (patrz komentarze)

Test rozszczepienia substratu (patrz komentarze)

Zymografia (patrz komentarze)

Physical form

Liofilizowany ze 100 mM NaCl, 50 mM HEPES, pH 7,3.

Preparation Note

Po rekonstytucji pobrać porcję do silikonowanych fiolek i zamrozić (-70°C).

Analysis Note

Aktywność proenzymu MMP 3 mierzono za pomocą testu rozszczepiania substratu przy użyciu 0,5 mM tiopeptiolidu (Ac-Pro-Leu-Gly-S-Leu-Leu-Gly-Oet) jako substratu. Aktywność oceniano również poprzez degradację substratu peptydowego (DNP-PYAYWMR) przy użyciu aktywowanego MMP-3 mierzonego metodą HPLC.

Other Notes

Proenzym MMP-3 może być stosowany jako kontrola pozytywna lub wzorzec do immunoblottingu, analizy zymograficznej lub testów rozszczepiania substratu. Do SDS-PAGE i immunoblottingu użyto 0,5 μg/pas. Do zymografii z kazeiną użyto 1 μg/panel Proenzymu MMM-3 lub aktywowanego MMP-3. Proenzym MMP-3 może być aktywowany in vitro przez inkubację w 50 mM Tris, pH 7,5, zawierającym 0,05% Triton-X-100, 5 mM _CaCl2 i 1 mM octanu 4 aminofenylortęciowego (APMA) przez 2-4 godziny w temperaturze 37°C. Aby rozpuścić APMA, należy przygotować 10 mM roztwór podstawowy w 0,05 M NaOH. Około 90% proenzymu MMP-3 jest aktywowane podczas 4-godzinnej inkubacji w temperaturze 37°C przy użyciu 1 mM APMA.

Legal Information

CALBIOCHEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Toksyczność: Standardowa obsługa (A)

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 11 - Combustible Solids
• Co się dzieje?: WGK 1
• Temperatura zapłonu (°F): Not applicable
• Temperatura zapłonu (°C): Not applicable