SAMHELPERV

Zestaw SAM CRISPRa Helper Construct Kit Cząsteczki transdukcji lentiwirusowej

• NACRES: NA.51
• UNSPSC Code: 12352200

Właściwości

• packaging: pkg of 16 vials (8x25μL aliquots for each of the 2 kit components)
• concentration: ≥1x10⁶ VP/ml (via p24 assay)
• application(s): CRISPR; CRISPR
• shipped in: dry ice
• storage temp.: −70°C

Opis

General description

Produkt ten jest zestawem zawierającym dwa zestawy gotowych do użycia cząstek lentiwirusowych umożliwiających natychmiastową transdukcję w celu silnej ekspresji w szerokim zakresie zarówno dzielących się, jak i nie dzielących się linii komórkowych. Cząsteczki lentiwirusowe MS2-P65-HSF1 skutecznie i stabilnie integrują MS2-P65-HSF1 i kasetę oporności na higromycynę połączoną peptydem 2A i napędzaną promotorem EF1 alfa (EF1a-dCas9-VP64-2A-Blasticidin). Cząsteczki lentiwirusowe dCas9-VP64 skutecznie i stabilnie integrują dCas9-VP64 i kasetę oporności na blastycydynę połączoną peptydem 2A i napędzaną przez promotor EF1 alfa (EF1a-dCas9-VP64-2A-Blasticidin). Są one idealne do uniknięcia żmudnego procesu produkcji lentiwirusów i są częścią trzyczęściowego systemu CRISPR z indywidualnym dCas9-VP64. MS2-p65-HSF1 i wektorami ekspresji gRNA.

Aby zamówić gRNA w dowolnym formacie kliknij tutaj.

Application

Genomika funkcjonalna/walidacja celu

• Bezstronne przesiewowe badania genetyczne
• Silna aktywacja transkrypcji w wielu liniach komórkowych
• Stworzenie linii komórkowych stabilnie wyrażających dCas9-VP64 i MS2-p65-HSF1.

Biochem/physiol Actions

Systemy CRISPR/Cas są wykorzystywane przez bakterie i archeony do obrony przed inwazją wirusów i plazmidów. Niedawno system CRISPR/Cas typu II z bakterii Streptococcus pyogenes został zaprojektowany do funkcjonowania w systemach eukariotycznych przy użyciu dwóch składników molekularnych: pojedynczego białka Cas9 i niekodującego RNA (gRNA). Endonukleaza Cas9 może być nieaktywna (dCas9) z mutacjami w dwóch domenach białkowych, RuvC i HnH (odpowiednio D10A i H840A), które są odpowiedzialne za aktywność nukleazy. Białko z niedoborem nukleazy można następnie połączyć z aktywatorem transkrypcyjnym VP64 i wykorzystać w połączeniu z RNA-przewodnikiem zmodyfikowanym aptamerami MS2 RNA, które działają w celu rekrutacji dodatkowych koaktywatorów transkrypcyjnych p65 i HSF1. Zmontowany kompleks SAM jest następnie wykorzystywany jako system dostarczania ładunku do docelowych promotorów genów, umożliwiając specyficzną dla miejsca aktywację transkrypcji interesującego nas genu.

Features and Benefits

• Wysoka specyficzność i aktywność
• Cząsteczki lentiwirusowe o wysokiej czystości i wysokim mianie, zweryfikowane pod względem sekwencji
• Aktywuje geny poprzez aktywację transkrypcyjną, a nie nadekspresję opartą na cDNA

Dowiedz się więcej o aktywatorach SAM CRISPR na stronie SigmaAldrich.com/CRISPRa.

Other Notes

VP/mL jest jednostką miary stężenia dla miana wirusa oszacowanego za pomocą testu p24.

This kit contains 2 components :
2 Helper Constructs with a minimum p24 titer of 1x10⁶ VP/mL

• 8 x 25μl vials of dCas9-VP64-Blasticidin SAM CRISPRa Helper Construct 1 Lentiviral Transduction Particles
• 8 x 25μl vials of MS2-P65-HSF1-Hygromycin SAM CRISPRa Helper Construct 2 Lentiviral Transduction Particles

Legal Information

Umowa licencyjna na użytkowanieCRISPR

Licencje na fluorofory Lentiviral, WPRE i Evrogen

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 10 - Combustible liquids