This product has a concentration of 10 mg/mL or 10 ug/uL. The 50 uL package size will contain 500 ug.
TR-1003
聚乙烯感染/转染试剂
A highly efficient method of gene transfer into mammalian cells leveraging infection with retroviral vectors.
Polybrene Infection / Transfection Reagent
别名:
1,5-二甲基-1,5-二氮杂十五甲基多溴化物, 海美溴铵
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應用
聚凝胺是一种阳离子聚合物，可以大大提高逆转录病毒或慢病毒感染哺乳动物细胞的效率。它起到中和病毒体与细胞表面之间电荷排斥的作用，从而提高感染效率。逆转录病毒感染的效率在某些细胞中显著提高了 100 到 1,000 倍，这是因为在感染过程中加入了聚凝胺。含有 DMSO 的聚凝胺储液还用于介导 DNA 转移到多种细胞类型中，例如 CHO、鸡胚成纤维细胞、NINH-3T3 和髓样细胞。
方法：逆转录病毒感染
重组逆转录病毒储液是通过将 5ml 生长培养基（含 5％ 血清）添加接近汇合的转染的逆转录病毒包装细胞单层细胞的 100mm 平板中来制备的。24 小时后，去除培养基，并通过 0.45um 过滤器过滤。
将要感染该重组逆转录病毒储液的细胞以每个 100mm 平板 500,000 个细胞的量接种在 10ml 完全培养基中。
24 小时后，去除细胞的生长培养基。用 2ml 的病毒上清液（或将病毒储液稀释至 2ml）感染细胞，每毫升添加 5ug 至 10ug 的聚凝胺（最终浓度），在 37°C 下孵育细胞 3 到 6 小时。
加入 8 ml 完全培养基。感染三天后，将细胞按 1：5 的比例分进选择培养基。
方法：转染
将细胞铺在完全生长培养基中，约有 50％ 汇合。
铺板后 18 至 24 小时，立即使用以下方法制备 DNA-培养基-聚凝胺溶液：
注意：必须按照正确的顺序添加每个组件。
1：完全生长培养基（60mm 平板，2ml；
100mm 平板，3ml），加热至 37°C。
2：质粒 DNA，10ng 至 10ug。轻轻混合。
3：聚凝胺的最终浓度为每毫升 5ug 至 10ug。轻轻混合
从平板中去除培养基，并将 DNA-培养基-聚凝胺溶液添加到细胞中。让细胞在 37°C 下孵育 6 到 20 小时，前 6 个小时大约每 1.5 个小时轻轻摇动一次。
去除 DNA-培养基-聚凝胺溶液，并用 DMSO 储液轻轻覆盖细胞（在 1X HBSS 中的 15％ DMSO：专门培养基（货号 S-051-D）每个 60 mm 平板 3 ml，每个 100 mm 平板 4 ml。手动摇动培养皿 10 秒钟，使溶液均匀分布，然后将细胞置于 37°C 下温育 4 分钟。
立即去除 DMSO 储液，并用完全生长培养基轻轻冲洗细胞两次，每个 60 mm 培养皿每次洗涤用 5 ml，每个 100 mm 培养皿每次洗涤用 10 ml
将完全生长培养基添加到细胞中。
若要获得稳定的转化子，则去除生长培养基，并将细胞按 1：5 比例分进选择培养基。
若要瞬时表达，去除生长培养基并添加新鲜的生长培养基。24 至 72 小时后收获细胞和/或培养基。
提供的试剂通过0.2μm膜过滤并用无菌H2O水化。
方法：逆转录病毒感染
重组逆转录病毒储液是通过将 5ml 生长培养基（含 5％ 血清）添加接近汇合的转染的逆转录病毒包装细胞单层细胞的 100mm 平板中来制备的。24 小时后，去除培养基，并通过 0.45um 过滤器过滤。
将要感染该重组逆转录病毒储液的细胞以每个 100mm 平板 500,000 个细胞的量接种在 10ml 完全培养基中。
24 小时后，去除细胞的生长培养基。用 2ml 的病毒上清液（或将病毒储液稀释至 2ml）感染细胞，每毫升添加 5ug 至 10ug 的聚凝胺（最终浓度），在 37°C 下孵育细胞 3 到 6 小时。
加入 8 ml 完全培养基。感染三天后，将细胞按 1：5 的比例分进选择培养基。
方法：转染
将细胞铺在完全生长培养基中，约有 50％ 汇合。
铺板后 18 至 24 小时，立即使用以下方法制备 DNA-培养基-聚凝胺溶液：
注意：必须按照正确的顺序添加每个组件。
1：完全生长培养基（60mm 平板，2ml；
100mm 平板，3ml），加热至 37°C。
2：质粒 DNA，10ng 至 10ug。轻轻混合。
3：聚凝胺的最终浓度为每毫升 5ug 至 10ug。轻轻混合
从平板中去除培养基，并将 DNA-培养基-聚凝胺溶液添加到细胞中。让细胞在 37°C 下孵育 6 到 20 小时，前 6 个小时大约每 1.5 个小时轻轻摇动一次。
去除 DNA-培养基-聚凝胺溶液，并用 DMSO 储液轻轻覆盖细胞（在 1X HBSS 中的 15％ DMSO：专门培养基（货号 S-051-D）每个 60 mm 平板 3 ml，每个 100 mm 平板 4 ml。手动摇动培养皿 10 秒钟，使溶液均匀分布，然后将细胞置于 37°C 下温育 4 分钟。
立即去除 DMSO 储液，并用完全生长培养基轻轻冲洗细胞两次，每个 60 mm 培养皿每次洗涤用 5 ml，每个 100 mm 培养皿每次洗涤用 10 ml
将完全生长培养基添加到细胞中。
若要获得稳定的转化子，则去除生长培养基，并将细胞按 1：5 比例分进选择培养基。
若要瞬时表达，去除生长培养基并添加新鲜的生长培养基。24 至 72 小时后收获细胞和/或培养基。
提供的试剂通过0.2μm膜过滤并用无菌H2O水化。
外觀
每毫升无菌超纯水溶解 10mg 聚乙烯。
準備報告
在 -20°C 可保存长达 2 年。
免責聲明
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儲存類別代碼
12 - Non Combustible Liquids
水污染物質分類（WGK）
WGK 2
閃點（°F）
Not applicable
閃點（°C）
Not applicable
Enhancement and inhibition of avian sarcoma viruses by polycations and polyanions.
K Toyoshima et al.
Virology, 38(3), 414-426 (1969-07-01)
Nam Ji Sung et al.
Bioscience reports, 40(3) (2020-03-07)
Docosahexaenoic acid (DHA) is an omega-3 fatty acid abundant in fish oils. It is known to have an inhibitory effect on various diseases such as inflammation, diabetes, and cancer. Epithelial-to-mesenchymal transition (EMT) is a process that epithelial cells gain migratory
Margaret M McDaniel et al.
Cell reports, 31(5), 107604-107604 (2020-05-07)
Inflammasome activation leads to pyroptotic cell death, thereby eliminating the replicative niche of virulent pathogens. Although inflammasome-associated cytokines IL-1β and IL-18 have an established role in T cell function, whether inflammasome activation in dendritic cells (DCs) is critical for T cell priming
Manon Viaud et al.
Cell reports, 30(10), 3397-3410 (2020-03-12)
Defective cholesterol efflux pathways in mice promote the expansion of hematopoietic stem and progenitor cells and a bias toward the myeloid lineage, as observed in chronic myelomonocytic leukemia (CMML). Here, we identify 5 somatic missense mutations in ABCA1 in 26
Marta Llaurado Fernandez et al.
Gynecologic oncology, 157(1), 12-20 (2020-01-20)
Low-grade serous ovarian carcinomas (LGSC) are frequently ER/PR positive, though the mechanisms by which ER/PR regulate prognosis or anti-estrogen treatment efficacy are poorly understood. We studied ER/PR expression in LGSC tumors and cell lines to evaluate patient outcomes and cellular
商品
High titer lentiviral particles for LC3 variants used for live cell analysis of cellular autophagy.
包含β-肌动蛋白、α-微管蛋白和波形蛋白用于细胞骨架结果蛋白活细胞分析的高滴度慢病毒颗粒。
High titer lentiviral particles including beta-actin, alpha-tubulin and vimentin used for live cell analysis of cytoskeleton structure proteins.
SeqPlex™-I WTA kit amplifies RNA for NGS, enabling genomic studies from limited samples.
实验方案
产生人诱导多能干细胞（iPSC）的干细胞重编程实验方案，包括基于病毒和非病毒RNA的方法。
Stem cell reprogramming protocols to generate human induced pluripotent stem cells (iPSCs) including viral and non-viral RNA based methods.
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For polybrene reagent TR-1003-G. I know it says to store the vial at -20C but was wondering what to do for aliquots. I thawed out the polybrene to make smaller aliquots from it. For these aliquots, should I store at 4C or -20?
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Polybrene is highly sensitive to freeze-thaw cycles. It is recommended to store in single-use size aliquots to avoid multiple freeze-thaw cycles. Store at -20°C for up to 2 years. If freeze-thaw cycles are necessary, do not freeze/thaw the stock solution more than three times. If the solution remains sterile, it should be stable for up to 1 year at 4°C.
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what is the concentration of polybrene.
1 answer-
This product is a sterile solution of polybrene at 10 mg/mL in water.
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