IP10
蛋白G Plus/蛋白A-琼脂糖
A mixture of Protein G PLUS and Protein A covalently conjugated to agarose. Useful for purification of IgG from biological fluids.
同義詞:
蛋白G琼脂糖
選擇尺寸
| 您/SKU | 供貨能力 | 價格 |
|---|
關於此項目
form
slurry (Liquid)
contains
≤0.1% sodium azide as preservative
manufacturer/tradename
Calbiochem®
storage condition
do not freeze
technique(s)
antibody protein purification: suitable, protein purification: suitable
suitability
suitable for microbiology
shipped in
wet ice
storage temp.
2-8°C
General description
Application
Physical form
Other Notes
IgG纯化的推荐方案
缓冲液
所述的所有浓度均用于工作溶液，而不是10X浓缩液。注意：叠氮化钠是有毒的。
•结合/洗涤缓冲液：100 mM磷酸钠pH值7.0、150 mM氯化钠、5 mM钠EDTA、0.01%叠氮化钠。
•洗脱缓冲液A（见注释部分）：500 mM醋酸铵pH值3.0，0.01%叠氮化钠。
•洗脱缓冲液B：10 mM甘氨酸/HCl pH值3.0和0.01%叠氮化钠。
•中和缓冲液：500 mM Tris碱，0.01%叠氮化钠。
•贮备液：100 mM磷酸钠，pH值7.0，0.01%叠氮化钠。
方案
A。清理和浓缩
腹水和血清应在室温下凝结，在4°C冷藏过夜（以使凝块收缩并分离脂质），并多次离心以去除全部凝结的蛋白和脂质。用玻璃棒或小木棍将离心管顶部的脂质去除。应将组织培养基离心或过滤以除去聚集体。
IgG可以通过硫酸铵沉淀步骤进行浓缩和部分纯化。搅拌下添加硫酸铵至50%饱和度（313 g/L），并通过加入1 M HCl或NaOH检查pH值是否调节至7.0。离心以收集沉淀的免疫球蛋白，溶解在结合缓冲液中，并使用相同的缓冲液进行透析。
B.纯化
1.用琼脂糖结合物填充色谱柱
2.用约20倍柱体积的洗涤/结合缓冲液洗涤，直至洗脱液的pH值为7.0.
3.如果先前未针对结合缓冲液透析IgG，则将含IgG的样品稀释或透析到洗涤/结合缓冲液中（pH值6.5-7.5）。
4.将样品上样至色谱柱。
5.用洗涤/结合缓冲液洗涤，直到洗脱液在280 nm处的吸光度接近背景水平。
6.用洗脱缓冲液A洗涤以洗脱IgG，并收集组分直至A280恢复至背景水平。
7.用洗脱缓冲液B洗涤，收集组分直至A280恢复至背景。大多数IgG应该用缓冲液A洗脱。
8.加入等体积的中和缓冲液中和洗脱的IgG组分，并用pH值试纸检查pH值。为了获得最佳结果，请立即中和洗脱液。
9.为了立即重复使用色谱柱，重复步骤2的步骤。
10.为准备储存用色谱柱，用5倍柱体积的洗脱缓冲液B清洗色谱柱。
11.为储存色谱柱，使用30倍柱体积的储存缓冲液清洗；然后密封色谱柱出口并储存在冰箱中。
12.使用以下公式对纯化的IgG进行定量：
280 nm处的吸光度/1.4=浓度（mg/mL）。
为了制备洗脱缓冲液A，从乙酸开始，用氢氧化铵将pH值调节至3.0。
Legal Information
Disclaimer
1 of 1
本產品 | |||
|---|---|---|---|
| description A mixture of Protein G PLUS and Protein A covalently conjugated to agarose. Useful for purification of IgG from biological fluids. | description Protein G PLUS agarose suspension specifically formulated for immunoprecipitation. | description Protein G PLUS/Protein A-Agarose mixture specifically formulated for immunoprecipitation. | description Protein A Agarose Suspension designed for immunoprecipitation applications |
| technique(s) antibody protein purification: suitable | technique(s) antibody protein purification: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable | technique(s) antibody protein purification: suitable | technique(s) antibody protein purification: suitable |
| suitability suitable for microbiology | suitability suitable for immunoprecipitation | suitability suitable for microbiology | suitability - |
| form slurry (Liquid) | form slurry (Liquid) | form slurry (Liquid) | form slurry (Liquid) |
| storage temp. 2-8°C | storage temp. 2-8°C | storage temp. 2-8°C | storage temp. 2-8°C |
| manufacturer/tradename Calbiochem® | manufacturer/tradename Calbiochem® | manufacturer/tradename Calbiochem® | manufacturer/tradename Calbiochem® |
| shipped in wet ice | shipped in wet ice | shipped in wet ice | shipped in wet ice |
存儲類別/等級
11 - Combustible Solids
WGK
WGK 1
閃點 (F)
Not applicable
閃點（°C）
Not applicable