OGS37
PSF-T7-T7 启动子质粒
plasmid vector for molecular cloning
同義詞:
snapfast 载体
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| 您/SKU | 供貨能力 | 價格 |
|---|
關於此項目
NACRES:
NA.85
UNSPSC Code:
12352200
Promoter:
Promoter name: T7
Promoter activity: inducible
Promoter type: phage
Promoter activity: inducible
Promoter type: phage
Origin of replication:
pUC (500 copies)
Bacteria selection:
kanamycin
Reporter gene:
none
Peptide cleavage:
no cleavage
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form
buffered aqueous solution
mol wt
size 3862 bp
technique(s)
molecular cloning: suitable
bacteria selection
kanamycin
origin of replication
pUC (500 copies)
peptide cleavage
no cleavage
promoter
Promoter name: T7
Promoter activity: inducible
Promoter type: phage
reporter gene
none
shipped in
ambient
storage temp.
−20°C
General description
PSF-T7-T7 启动子质粒允许使用 T7 噬菌体聚合酶转录 RNA。如果您使用的是体外转录试剂盒，那么使用该载体产生的 RNA 将是开盖的，而不是多聚腺苷酸化的，使其不适合在哺乳动物细胞中表达，但是有些试剂盒可用于添加这些 mRNA 特征。PSF-T7-T7 启动子也可用于在含有 T7 聚合酶的细胞系中诱导基因表达。
几乎所有的 SnapFast 载体在多克隆位点下游都含有一个 T7 终止子，将使转录终止。如果需要，载体也可以在基因末端 3 个引物的酶切站点进行酶切，以允许聚合酶还原，而不是利用发夹 T7 终止子。如果您要在不含痘苗病毒的哺乳动物T7系统中表达您的基因，则由于所产生的 RNA 上缺少 5 个 prime cap，因此需要在基因上游提供IRES。
启动子表达水平：
几乎所有的 SnapFast 载体在多克隆位点下游都含有一个 T7 终止子，将使转录终止。如果需要，载体也可以在基因末端 3 个引物的酶切站点进行酶切，以允许聚合酶还原，而不是利用发夹 T7 终止子。如果您要在不含痘苗病毒的哺乳动物T7系统中表达您的基因，则由于所产生的 RNA 上缺少 5 个 prime cap，因此需要在基因上游提供IRES。
启动子表达水平：
Application
基因克隆：已将该质粒设计为与多种克隆技术兼容。多重克隆位点包含一系列标准的常用限制性酶切位点。使用这些位点，可以使用标准的DNA连接酶克隆方法插入基因。也可以使用其他方法，例如不依赖连接酶的克隆（LIC）Gibson Assembly InFusionHD或Seamless GeneArt，并且由于我们所有的质粒都基于相同的堆叠，所以可以使用相同的方法克隆到我们所有的目录载体中。
多克隆位点注意事项：MCS中有一些重要的位点。这些包括NcoI位点、XbaI位点以及BsgI和BseRI位点。NcoI位点含有紧邻在Kozak和Shine-Dalgarno核糖体结合位点下游的起始密码子。当起始密码子置于该位置时可实现基因的最佳定位。如果不需要这样并且您希望使用一个下游的位点进行基因克隆，您可通过使用KpnI切割质粒来去除NcoI位点。
XbaI位点含有终止密码子。该终止密码子位于与紧邻在下游的BsgI和BseRI位点相关的特定位置。当BseRI或BsgI切割质粒后，它们会从XbaI位点的终止密码子产生一个TA突出，而其可与采用相同位点切割的所有肽标签质粒相兼容。BseRI和BsgI位点是非回文并远离其结合位点切割特定数量碱基的。
每当我们将基因克隆到我们的多克隆位点时，我们总是将起始和终止密码子定位在MCS中相同的位置。如果基因的起点和终点与NcoI和XbaI不相容，我们会将序列扩展到最近的外部位点，但仍保持起始和终止密码子的位置一致。
多克隆位点注意事项：MCS中有一些重要的位点。这些包括NcoI位点、XbaI位点以及BsgI和BseRI位点。NcoI位点含有紧邻在Kozak和Shine-Dalgarno核糖体结合位点下游的起始密码子。当起始密码子置于该位置时可实现基因的最佳定位。如果不需要这样并且您希望使用一个下游的位点进行基因克隆，您可通过使用KpnI切割质粒来去除NcoI位点。
XbaI位点含有终止密码子。该终止密码子位于与紧邻在下游的BsgI和BseRI位点相关的特定位置。当BseRI或BsgI切割质粒后，它们会从XbaI位点的终止密码子产生一个TA突出，而其可与采用相同位点切割的所有肽标签质粒相兼容。BseRI和BsgI位点是非回文并远离其结合位点切割特定数量碱基的。
每当我们将基因克隆到我们的多克隆位点时，我们总是将起始和终止密码子定位在MCS中相同的位置。如果基因的起点和终点与NcoI和XbaI不相容，我们会将序列扩展到最近的外部位点，但仍保持起始和终止密码子的位置一致。
Analysis Note
欲查看本品的分析证书，请访问 www.oxgene.com
Other Notes
如需查看本品的序列信息，请访问 www.gelifesciences.com产品网页。
存儲類別/等級
12 - Non Combustible Liquids
閃點 (F)
Not applicable
閃點（°C）
Not applicable