OGS99
PSF-CMV-INTRON1-INTRON表达质粒
plasmid vector for molecular cloning
同義詞:
snapfast 载体
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關於此項目
NACRES:
NA.85
UNSPSC Code:
12352200
Promoter:
Promoter name: CMV
Promoter activity: constitutive
Promoter type: mammalian
Promoter activity: constitutive
Promoter type: mammalian
Origin of replication:
pUC (500 copies)
Bacteria selection:
kanamycin
Reporter gene:
none
Peptide cleavage:
no cleavage
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form
buffered aqueous solution
mol wt
size 4365 bp
technique(s)
molecular cloning: suitable
bacteria selection
kanamycin
origin of replication
pUC (500 copies)
peptide cleavage
no cleavage
promoter
Promoter name: CMV
Promoter activity: constitutive
Promoter type: mammalian
reporter gene
none
shipped in
ambient
storage temp.
−20°C
General description
PSF-CMV-INTRON1 - INTRON EXPRESSION 质粒在启动子（CMV）与多个克隆位点之间包含一个嵌合内含子。其序列是人类 β 球蛋白基因的第一个内含子的嵌合体，由 R Reed 等人开发（《基因和发育》，1989年）。它可诱导真核细胞的有效剪接。我们发现，在体外使用强启动子时，内含子不会增加表达，但有报道称，内含子的存在可以增加较弱启动子的表达水平，还能增加体内表达时间。
启动子表达水平：PSF-CMV-INTRON1 - INTRON EXPRESSION 质粒包含一个哺乳动物 CMV 启动子，以驱动基因表达。我们已在一系列的细胞类型中测试了所有哺乳动物启动子，CMV 在我们研究过的细胞中始终是最强的。但也有很多关于 CMV 启动子在长期培养中通过甲基化沉默的报道。
启动子表达水平：PSF-CMV-INTRON1 - INTRON EXPRESSION 质粒包含一个哺乳动物 CMV 启动子，以驱动基因表达。我们已在一系列的细胞类型中测试了所有哺乳动物启动子，CMV 在我们研究过的细胞中始终是最强的。但也有很多关于 CMV 启动子在长期培养中通过甲基化沉默的报道。
Application
基因中的克隆：该质粒组合经过设计，可兼容各种克隆技术。多克隆位点包含一系列标准的常用限制性克隆位点。通过这些位点，可以使用DNA连接酶的标准克隆方法插入基因。也可以使用其他方法，如非连接酶依赖性克隆（LIC）Gibson Assembly InFusionHD或Seamless GeneArt，因为我们的所有质粒都基于相同的骨架，所以可以使用相同的方法克隆到我们所有的目录载体中。
多克隆位点说明：MCS中有一些重要位点，包括NcoI位点、XbaI位点以及BsgI和BseRI位点。NcoI位点含有起始密码子，其紧邻Kozak和Shine-Dalgarno核糖体结合位点的下游。当起始密码子位于该位置时，它们可帮助获得基因的最佳定位。如果不需要这样做，并且您希望使用下游位点进行基因克隆，则可以利用KpnI切割质粒来去除NcoI位点。
XbaI位点含有终止密码子。该终止密码子位于与紧邻下游的BsgI和BseRI位点相关的特定位置。当BseRI或BsgI切割质粒时，它们从XbaI位点的终止密码子处产生TA突出端，其与用相同位点切割的所有肽标签质粒相容。BseRI和BsgI位点是非回文结构的并且可切割远离其结合位点的限定数量的碱基。
每次将基因克隆到多克隆位点时，我们总是将起始和终止密码子定位在MCS中的相同位置。如果基因的起始和终止密码子与NcoI和XbaI不相容，则将序列延伸到最近的外部位点，但应保持起始和终止密码子的位置一致。
多克隆位点说明：MCS中有一些重要位点，包括NcoI位点、XbaI位点以及BsgI和BseRI位点。NcoI位点含有起始密码子，其紧邻Kozak和Shine-Dalgarno核糖体结合位点的下游。当起始密码子位于该位置时，它们可帮助获得基因的最佳定位。如果不需要这样做，并且您希望使用下游位点进行基因克隆，则可以利用KpnI切割质粒来去除NcoI位点。
XbaI位点含有终止密码子。该终止密码子位于与紧邻下游的BsgI和BseRI位点相关的特定位置。当BseRI或BsgI切割质粒时，它们从XbaI位点的终止密码子处产生TA突出端，其与用相同位点切割的所有肽标签质粒相容。BseRI和BsgI位点是非回文结构的并且可切割远离其结合位点的限定数量的碱基。
每次将基因克隆到多克隆位点时，我们总是将起始和终止密码子定位在MCS中的相同位置。如果基因的起始和终止密码子与NcoI和XbaI不相容，则将序列延伸到最近的外部位点，但应保持起始和终止密码子的位置一致。
Analysis Note
欲查看本品的分析证书，请访问 www.oxgene.com
Other Notes
欲查看本品的分析证书序列信息，请访问产品页面
存儲類別/等級
12 - Non Combustible Liquids
閃點 (F)
Not applicable
閃點（°C）
Not applicable