05-321

Anti-Phosphotyrosin-Antikörper, Klon 4G10^®

clone 4G10®, Upstate^®, from mouse

• Synonym(e): Anti-Phosphotyrosin Klon 4G10
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Clone: 4G10®, monoclonal
• Technique(s): immunocytochemistry: suitable, immunohistochemistry: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• Application: ICC, IHC, IP, WB
• Citations: 3242

Eigenschaften

• biological source: mouse
• Quality Segment: 100
• antibody form: purified antibody
• antibody product type: primary antibodies
• clone: 4G10®, monoclonal
• species reactivity (predicted by homology): all
• manufacturer/tradename: Upstate^®
• technique(s): immunocytochemistry: suitable, immunohistochemistry: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG2bκ
• shipped in: wet ice
• target post-translational modification: phosphorylation (pTyr)

Beschreibung

General description

Abhängig vom Molekulargewicht des nachzuweisenden Tyrosin-phosphorylierten Proteins.

Einige der Tyrosin-Reste können mit einer Phosphatgruppe (phosphoryliert) durch Proteinkinasen markiert werden. (In seinem phosphorylierten Zustand wird es als Phosphotyrosin bezeichnet). Die Tyrosin-Phosphorylierung gilt als einer der wichtigsten Schritte bei der Signaltransduktion und Regulierung der Enzymaktivität.
Die Einführung von Anti-Phosphotyrosin-Antikörpern war ein bedeutendes Ereignis in der Signaltransduktionsforschung. Bevor Anti-Phosphotyrosin-Antikörper verfügbar waren, wurde die Tyrosyl-Phosphorylierung von Proteinen und Enzymen anhand von gefährlichen und zeitaufwändigen radioaktiven Versuchen untersucht. Anti-Phosphotyrosin-Antikörper werden häufig in Western Blots eingesetzt, nachdem die Zielproteine immunpräzipitiert wurden, um die Tyrosyl-Phosphorylierung der Proteine zu messen. Anti-Phosphotyrosin-Antikörper werden auch direkt an Zelllysaten verwendet, um die Gesamtveränderung der Tyrosin-Phosphorylierung als Reaktion auf verschiedene Behandlungen zu untersuchen.

Immunogen

Phosphotyramin-KLH

Application

Der Anti-Phosphotyrosin-Antikörper, Klon 4G10, detektiert Tyrosin-phosphorylierte Proteine in allen Spezies. Dieser einzigartige Antikörper ist zur Verwendung in der IC, IH, IH(P) und im WB validiert und in Hunderten von Publikationen erwähnt.

Forschungs-Unterkategorie
Allgemeine posttranslationale Modifikation

Forschungskategorie
Signalgebung

Immunpräzipitation:
Mit 2-4 μg einer früheren Charge wurden die Phosphotyrosin-haltigen Proteine im Lysat einer konfluenten Kultur (10-cm-Petrischale) von Zellen, die eine aktivierte Tyrosinkinase exprimierten, quantitativ immunpräzipitiert. Zur Konservierung von Phosphotyrosin geben Sie: 0,2 mM Natriumorthovanadat zum Lysepuffer hinzu.

Biochem/physiol Actions

Dieser Antikörper erkennt Tyrosin-phosphorylierte Proteine aller Spezies.

Physical form

0,1M Tris-Glycin, 0,15M NaCl, 0,05% Natriumazid, pH 7,4. Flüssig bei 2-8 °C.
Monoklonaler IgG2bκ-Mausantikörper, der von der Maus-Maus-Hybridom-Zelllinie 4G10 (FOX-NY [NS-1-Derivat] Myelom- x Milzzellen) in vitro hergestellt wurde.

Format: Aufgereinigt

Protein G-Sepharose Chromatographie

Preparation Note

Bei 2-8 °C 1 Jahr ab Empfangsdatum haltbar.

Hinweis: Nicht einfrieren.
Für maximale Produktrückgewinnung das Originalfläschchen vor dem Abnehmen der Kappe zentrifugieren. Wenn das Produkt aus Versehen eingefroren und aufgetaut wurde, zentrifugieren Sie es 10 Minuten bei 13,000 x g und 2-8 ºC. Bewahren Sie den Überstand für Ihre Anwendung auf.

Analysis Note

Kontrolle
Positive Antigenkontrolle: Art.-Nr. 12-302, EGF-stimuliertes A431-Zelllysat. 2,5 µl 2-Mercaptoethanol/100 µl Lysat zugeben und 5 Minuten einkochen, um das Präparat zu reduzieren. Jede Bahn für Minigele mit 20 µg reduziertem Lysat beladen.

Regelmäßig mit EGF-behandelten humanen A431-Karzinomzellen beurteilt.

Western-Blot-Analyse:
0,5-2 μg/ml dieser Charge detektierte Tyrosin-phosphorylierte Proteine in einem modifizierten RIPA-Lysat aus EGF-behandelten humanen A431-Karzinomzellen (Cohen, B., 1990; , Druker, B. J., 1989; Kanakura, Y., 1991).

Other Notes

Ersetzt: MAB3090

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

Legal Information

4G10 is a registered trademark of Upstate Group, Inc.

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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